[發明專利]一種牛磺酸修飾的新型抗氧化肽的制備方法

在審

• 申請號: 201910801506.5
• 申請日: 2019-08-28
• 公開（公告）號: CN110423792A
• 公開（公告）日: 2019-11-08
• 發明（設計）人: 金火喜;李巖;余方苗;唐云平;楊立業;歐陽小琨
• 申請（專利權）人: 浙江海洋大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K14/78;C07K1/107;A61P39/06;A61P37/04;A61P9/12
• 代理公司: 杭州浙科專利事務所(普通合伙) 33213
• 代理人: 吳秉中

本發明提出了一種牛磺酸修飾的新型抗氧化肽的制備方法，以東海烏參膠原蛋白為原料，通過酶解、濃縮，得到高濃度膠原蛋白水解產物，加入一定量的牛磺酸，在適宜條件下進行類蛋白反應獲得牛磺酸修飾的新型抗氧化肽。本發明中新型多功能肽的制備方法，其反應效率高，合成耗時短，產物易純化，降低了生產成本，預處理過的生物原料活性不受破壞，且產物活性能得到提升。

技術領域

本發明涉及抗氧化肽技術領域，具體涉及一種牛磺酸修飾的新型抗氧化肽的制備方法。

背景技術

目前，抗氧化肽主要通過酶解蛋白而獲得。但是，利用酶水解的方式從蛋白質中得到抗氧化活性肽存在著一個明顯的局限性，即抗氧化肽的一級結構肯定來源于原料蛋白質一級結構中的某一部分，所以抗氧化肽的活性必定取決于原料蛋白質的一級結構。這樣，僅僅采用酶水解蛋白質的方式，無法直接得到不同于原料蛋白質一級結構的肽片段，即無法通過酶水解的方式從原料蛋白質中得到更高活性的抗氧化肽。所以，對抗氧化肽進行分子修飾，在己有的抗氧化肽分子上再連接或把個別氨基酸替換成其他特定結構的分子，形成的新化合物具有不同于原多肽的特殊結構，從而有可能改善其抗氧化的活性。

牛磺酸是一種含硫的氨基酸，廣泛存在于海洋生物中，但其不參與蛋白質合成，在體內以游離狀態存在。牛磺酸是調節機體正常生理活動的活性物質，具有廣泛的生理功能，對動物大腦、心臟、肝臟、性腺等器官的發育都有十分重要的作用。現代醫學實驗證明，牛磺酸具有促進嬰幼兒腦組織和智力發育、提高神經傳導和視覺機能、防止心血管病、改善內分泌狀態，增強人體免疫、維持機體滲透壓平衡、改善記憶、增強細胞膜抗氧化能力，延緩衰老、保護心肌細胞等功效。牛磺酸在臨床上已被廣泛應用于心血管疾病、糖尿病、消化道疾病、神經系統疾病、眼部疾病等一系列疾病的治療。在食品領域，牛磺酸已作為一種優良的大眾化食品營養強化劑被廣泛地添加到乳制品、飲料、豆制品、飼料等食品中。在牛奶中加入適量的牛磺酸，其營養價值可接近人奶。在飼料中添加牛磺酸能夠明顯提高和改善畜禽的生長性能、繁殖能力和免疫力。利用牛磺酸對現有抗氧化肽進行修飾，可獲得體內無法合成的新型多肽，是非常有前景的新型活性肽的開發策略。

發明內容

本發明提供一種牛磺酸修飾的新型抗氧化肽及其制備方法，其目的在于，提供一種牛磺酸修飾的新型抗氧化肽的制備方法，其反應效率高，合成耗時短，產物易純化，降低了生產成本，預處理過的生物原料活性不受破壞，且產物活性能得到提升。

本發明提供一種牛磺酸修飾的新型抗氧化肽，包括：

A.天然多肽，其氨基酸序列為SEQ ID NO.1所示；

B.在A限定的多肽上，為替代原氨基酸或者在多肽N端或C端增聯一個氨基酸，所述氨基酸為牛磺酸。

作為本發明進一步的改進，所述天然多肽為東海烏參膠原蛋白水解蛋白產物。

本發明進一步保護一種上述牛磺酸修飾的新型抗氧化肽的制備方法，以東海烏參膠原蛋白為原料，通過酶解、濃縮，得到高濃度膠原蛋白水解產物，加入一定量的牛磺酸，在適宜條件下進行類蛋白反應獲得牛磺酸修飾的新型抗氧化肽。

作為本發明進一步的改進，所述東海烏參膠原蛋白的制備方法如下：選用東海烏參作為原料，切碎，經過酸、堿和檸檬酸的浸泡，去除重金屬和雜蛋白，得到粗膠原蛋白，向粗膠原蛋白溶液中加入氯化鈉，離心，棄除上清液，固體經透析、冷凍干燥得到東海烏參膠原蛋白。

作為本發明進一步的改進，所述東海烏參膠原蛋白的酶解方法如下：向東海烏參膠原蛋白溶液中加入NaOH溶液，調節pH至8.5，加入堿性蛋白酶，適宜溫度下酶解2-4h，滅活，離心，收集上清液。

作為本發明進一步的改進，所述濃縮的方法包括：冷凍干燥、噴霧干燥和減壓水分蒸發，得到的高濃度膠原蛋白水解產物密度為2-3.5g/cm³。