[發明專利]一種mRNA疫苗遞送載體及其制備方法

有效

• 申請號: 201910783273.0
• 申請日: 2019-08-23
• 公開（公告）號: CN110448695B
• 公開（公告）日: 2021-07-27
• 發明（設計）人: 夏小俊;張紅俠;吳鈞;游欣如
• 申請（專利權）人: 中山大學腫瘤防治中心
• 主分類號: A61K47/34
• 分類號: A61K47/34;A61K47/24;A61K39/00;A61P35/00
• 代理公司: 廣州新諾專利商標事務所有限公司 44100
• 代理人: 曹愛紅;劉婉

本發明提供了一種mRNA疫苗遞送載體，所述mRNA疫苗遞送載體為類脂聚合物，所述類脂聚合物由PAMAM樹枝狀聚合物與1,2?環氧十二烷反應制得。本發明還提供了該mRNA疫苗遞送載體的制備方法。本發明提供的mRNA疫苗遞送載體特異性好、穩定性好、效率高、毒性低、安全有效。

技術領域

本發明屬于醫藥領域，具體涉及一種mRNA疫苗遞送載體及其制備方法。

背景技術

近年來，包括腫瘤疫苗在內的腫瘤免疫療法在改變腫瘤治療和腫瘤生物學的方面取得了突破。治療性疫苗在治療多種類型的腫瘤和傳染病方面顯示出巨大的潛力。在腫瘤疫苗的發展中，抗原通常以蛋白質多肽和DNA質粒的形式作為疫苗的主要組成部分被用作傳統疫苗的開發；而今，基于mRNA(messenger RNA，信使RNA)形式的抗原的疫苗治療方法也逐步得到應用，并成為常規疫苗策略的有力替代品。多肽抗原合成成本較高，耗時較長；而DNA 抗原表達效率不高，而且有造成基因突變的風險。而mRNA形式的抗原不僅可以在非分裂以及難以轉染的細胞如樹突狀細胞中實現快速的蛋白質表達，并且其免疫原性可以通過化學修飾調節。由于以mRNA為基礎的疫苗具有作用高效快速、安全性高以及制備成本較低等特點，因此與基于蛋白短肽和質粒DNA的疫苗相比具有更大的發展潛力與優勢。目前，在許多基礎研究和臨床試驗中，mRNA疫苗的細胞內遞送已顯示出可誘導編碼抗原蛋白質合成和加工遞呈并激活T細胞，從而發揮高效率的抗腫瘤免疫反應的作用。

在過去幾年中，體外轉錄mRNA已成為用于遞送遺傳信息的潛在新型藥物。無修飾及遞送載體的裸露mRNA注射具有快速且成本低的特點，但由于mRNA自身帶高負電荷、易降解、穩定性差等特點，mRNA的體內遞送仍面臨若干潛在挑戰。目前主要的mRNA體內遞送手段是利用魚精蛋白或者納米脂質體來提高mRNA的穩定性和刺激抗原的提呈。然而魚精蛋白包裹mRNA還沒有用于腫瘤疫苗，其用于治療自身免疫疾病的產品目前正在臨床試驗；而納米脂質體用于mRNA腫瘤疫苗體內遞送需要淋巴結注射，對臨床操作難度較高，其治療效果也還有待臨床試驗的驗證。因此，mRNA腫瘤疫苗的臨床應用前景雖然光明，但是如何穩定安全的實現mRNA疫苗在體內的表達和激活免疫反應仍然是一個技術難題。

有效的mRNA腫瘤疫苗需要克服穩定性差、效率有限、毒性高和成本高等問題，實現mRNA的有效遞送及編碼抗原的高效表達，從而引起特異性的抗腫瘤免疫反應。作為一種全新的治療方法，腫瘤納米疫苗的一個優勢是可以實現同時遞送腫瘤抗原及免疫佐劑。隨著納米醫學的發展，許多納米工程制劑，包括基于聚合物的納米材料和基于脂質體的納米材料，已經設計用于在體內遞送siRNA(small interfering RNA，小干擾RNA)或其他小寡核苷酸，但用于mRNA疫苗遞送的材料還非常有限。由于mRNA的結構及自身物理化學特征，現有的納米材料對于mRNA遞送仍不夠有效，以mRNA為基礎的腫瘤疫苗的發展與臨床應用仍面臨許多問題。

發明內容

本發明的目的是針對以上要解決的技術問題，提供一種能夠穩定性好、效率高、毒性低、安全有效的mRNA疫苗遞送載體。

本發明的另一個目的是提供所述mRNA疫苗遞送載體的制備方法。

本發明的另一個目的是提供一種mRNA疫苗。

本發明的另一個目的是提供所述mRNA疫苗的制備方法。

為此，本發明提供了一種mRNA疫苗遞送載體，該mRNA疫苗遞送載體為類脂聚合物，所述類脂聚合物由PAMAM樹枝狀聚合物(poly(amidoamine)(PAMAM)dendrimers)與1,2- 環氧十二烷反應制得。

優選地，所述PAMAM樹枝狀聚合物與1,2-環氧十二烷的摩爾比為1:5。

本發明還提供了所述mRNA疫苗遞送載體的制備方法，包括以下步驟：