[發明專利]一種高產膠質芽孢桿菌工業生產發酵工藝

在審

• 申請號: 201910773086.4
• 申請日: 2019-08-21
• 公開（公告）號: CN112410237A
• 公開（公告）日: 2021-02-26
• 發明（設計）人: 韓國寶;梁愛民;張天航;盧倩雯
• 申請（專利權）人: 朝陽華星生物工程有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N3/00;C12R1/07
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種高產膠質芽孢桿菌工業生產發酵工藝，其特征在于，所述的工藝至少包括如下步驟：

1)一級培養：取適量粉芽孢桿菌接種于內含培養液的茄子瓶中活化處理，于培養搖床內培養，得到初級種子,將初級種子接種至50L的種子罐內，調節PH值至7.5-7.8，溫度32-40℃，在有氧環境下培養15-20h，并且投入種子培養基，形成一級種子；

2)二級培養：將一級種子接種至300L的種子罐內，調節PH值至7.5-7.8，溫度32-40℃，在有氧環境下培養18-21h，并且投入種子培養基，形成二級種子；

3)三級培養：準備5000L種子罐，調節5000L種子罐的PH值至7.5-7.8，對5000L的種子罐進行溫度121--124℃，持續30min的實消滅菌處理，將二級種子接種至滅菌后的5000L種子罐內，控制配料體積為3000L，罐壓0.08mpa，風量80-100m3/hr，轉速80-100r/min，溫度32-40℃，在有氧環境下培養20-24h，并且投入種子培養基，形成三級種子；

4)轉發酵罐：準備60m³發酵罐，調節60m³發酵罐實消滅菌后的PH值至7.5-7.8，對的發酵罐進行溫度121--124℃，持續30min的實消滅菌處理，將三級種子接種至滅菌后的60m³發酵罐內，控制配料體積為25 m³，罐壓0.08mpa，風量700-1000m3/hr，轉速80-100r/min，溫度32-40℃，并且投入發酵培養基，發酵時間23-25h，得初成品；

5)干燥處理：將初成品進行噴霧干燥，噴霧干燥完成后進行檢查計數，得完成品；

其中，所述的種子培養基和發酵培養基的原料相同，所述的種子培養基和發酵培養基的原料為：豆粕粉、蔗糖、酵母浸膏、磷酸氫二鉀、硫酸鎂和碳酸鈣。

2.根據權利要求1所述的高產膠質芽孢桿菌工業生產發酵工藝，其特征在于，所述的種子培養基和發酵培養基的原料用量比例相同，其中，豆粕粉0.1-0.3%，蔗糖0.5-0.8%，酵母浸膏0.03-0.08%，磷酸氫二鉀0.5% ，硫酸鎂0.02%，碳酸鈣0.1%。

3.根據權利要求2所述的高產膠質芽孢桿菌工業生產發酵工藝，其特征在于，所述的5000 L種子罐和60m³發酵罐之間設置有接種管，所述接種管使用前對其進行蒸汽滅菌，所述的蒸汽壓力大于0.4Mpa，且消毒時間大于30min。

4.根據權利要求3所述的高產膠質芽孢桿菌工業生產發酵工藝，其特征在于，所述步驟5)中的完成品，需通過鏡檢芽孢數達到0.9Χ10¹⁰ -1.1Χ10¹⁰cfu/ml。

5.根據權利要求1所述的高產膠質芽孢桿菌工業生產發酵工藝，其特征在于，所述步驟3)和步驟4)中的配料體積為實消滅菌后的配料體積。

6.根據權利要求1所述的高產膠質芽孢桿菌工業生產發酵工藝，其特征在于，所述步驟4)中的初成品，通過鏡檢菌體90%以上形成芽孢后，即停止發酵罐。