[發明專利]一種鉤枝藤枝葉有效部位及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201910770646.0
• 申請日: 2019-08-20
• 公開（公告）號: CN110368407B
• 公開（公告）日: 2021-07-13
• 發明（設計）人: 李珂珂;弓曉杰;門磊;李春斌;石玉生
• 申請（專利權）人: 大連民族大學
• 主分類號: A61K36/185
• 分類號: A61K36/185;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 大連智高專利事務所(特殊普通合伙) 21235
• 代理人: 李楠

本發明具體公開了一種鉤枝藤枝葉有效部位及其制備方法和應用，涉及天然藥物化學技術領域。本發明以鉤枝藤枝葉為原料，將其用乙醇提取，環己烷、二氯甲烷依次萃取后，將二氯甲烷萃取部位經過Diol基色譜閃式柱層析，得到鉤枝藤枝葉有效部位。該鉤枝藤枝葉有效部位在抗腫瘤細胞實驗中具有顯著的抗腫瘤活性，尤其是對非小細胞肺癌細胞A549，其細胞毒作用優于陽性藥順鉑。本發明的成本低廉，制備工藝簡單易操作，產品在抗腫瘤藥物中具有廣泛用途。

技術領域

本發明公開了一種鉤枝藤枝葉有效部位及其制備方法和應用，屬于天然藥物化學技術領域。

背景技術

當前，隨著人口增長和老齡化，以及與社會和經濟發展相關的某些癌癥病因的變化，促使癌癥發病人數逐年增加。據世衛組織發布的最新全球癌癥報告顯示，2018年全球新增1810萬例癌癥病例(男性950萬，女性860萬)，死亡人數達960萬(男性540萬，女性420萬)；而且全球幾乎一半的新發癌癥病例及超過一半的癌癥死亡病例都發生在亞洲，我國作為亞洲人口最多的國家，占亞洲癌癥發病與死亡的一半左右。而在所有癌癥中，肺癌的發病率和死亡率分別占整體癌癥的11.6％和18.4％，均居所有癌癥之首；在我國尤其是男性，肺癌的發病率超過0.4‰。臨床上的肺癌病例，非小細胞肺癌占肺癌總病例數的85％～88％。因此，進一步開發癌癥治療藥物具有重要價值和意義。

中藥以及民族藥的提取物活性成分在抗腫瘤治療方面具有一定療效。鉤枝藤(Ancistrocladus tectorius)系鉤枝藤科(Ancistrocladaceae)鉤枝藤屬(Ancistrocladus)的一種藤本植物，屬內約有20個種，我國只有A.tectorius一種，產于海南島，資源豐富。鉤枝藤在海南民間藥用歷史悠久，具有消炎、止瀉、行氣和散結等功效，是我國少數民族藥黎藥的一個重要組成部分，常用于治療瘧疾、寄生蟲感染等疾病。早在1981年，我國學者陳政雄等報道了鉤枝藤中的生物堿類化學成分和其抗腫瘤作用，鉤枝藤總生物堿對大鼠W-256有抑制作用，對小鼠S-180和艾氏腹水瘤抑制作用不明顯。近年來，德國學者Bringmann的研究組最新報道顯示，鉤枝藤中的生物堿類成分具有較強的抗人急性淋巴白血病細胞(CCRF-CEM)及其耐藥細胞CEM/ADR5000的活性。但是，目前所有關于鉤枝藤中化學成分抗腫瘤作用的報道，未有涉及其有效成分的制備工藝，也未見針對肺癌尤其是非小細胞肺癌的藥物應用。

發明內容

本發明所要解決的技術問題，是提供一種鉤枝藤枝葉有效部位的制備方法及其應用，由該方法制備得到的有效部位具有顯著的抗癌作用尤其是抗非小細胞肺癌作用。

本發明所要解決的上述技術問題，通過以下技術方案予以實現：

一種鉤枝藤枝葉有效部位的制備方法，其包含如下步驟：

(1)醇提步驟：取新鮮干燥后的鉤枝藤枝葉，粉碎，用乙醇溶液提取，將提取液在50℃以下減壓濃縮，制成浸膏或干粉，回收溶劑乙醇，制得鉤枝藤枝葉醇提物；

(2)萃取步驟：在鉤枝藤枝葉醇提物的浸膏或干粉中加入0.2～0.5倍重量的水，分散溶解，然后依次用環己烷和二氯甲烷萃取，分別得環己烷萃取部位和二氯甲烷萃取部位；

(3)Diol基色譜柱層析步驟：將二氯甲烷萃取部位上Diol基色譜層析柱，依次用環己烷/二氯甲烷(9:1)、二氯甲烷/乙酸乙酯(20:1)、乙酸乙酯、乙酸乙酯/甲醇(5:1)及甲醇梯度洗脫，制備得到各個分離部位。收集二氯甲烷/乙酸乙酯(20:1)洗脫部位，濃縮干燥后即得所述的鉤枝藤枝葉有效部位。

進一步的，醇提步驟中所述的乙醇溶液為體積分數為75～95％的乙醇水溶液；進一步優選的，醇提步驟中所述的乙醇溶液為體積分數為95％的乙醇水溶液。

進一步的，醇提步驟中干燥的鉤枝藤枝葉與乙醇溶液的用量比為1g：5～20mL；進一步優選的，干燥的鉤枝藤枝葉與乙醇溶液的用量比為1g：10～15mL。