[發(fā)明專利]一種天然Rakicidins類化合物Rakicidin B1-2及其發(fā)酵提取方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910737610.2
• 申請日: 2019-08-12
• 公開（公告）號(hào): CN110698537B
• 公開（公告）日: 2023-05-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳麗;林風(fēng);江紅;趙薇;周劍;江宏磊;連云陽
• 申請（專利權(quán)）人: 福建省微生物研究所
• 主分類號(hào): C07K5/062
• 分類號(hào): C07K5/062;C07K1/22;C07K1/16;C12P21/02;A61K38/05;A61P35/00;A61P31/04;C12R1/29
• 代理公司: 北京東方芊悅知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11591
• 代理人: 彭秀麗

1.一種天然Rakicidins類化合物Rakicidin?B1-2及其藥學(xué)上可接受的鹽，其特征在于，所述化合物Rakicidin?B1-2的結(jié)構(gòu)如下式(Ⅰ)所示：

2.一種制備權(quán)利要求1所述天然Rakicidins類化合物Rakicidin?B1-2的方法，其特征在于，所述Rakicidin?B1-2是由保藏編號(hào)為CGMCCNo.14823的海洋小單孢菌株Micromonospora?sp.FIM-R160609經(jīng)發(fā)酵及分離獲得。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備所述天然Rakicidins類化合物Rakicidin?B1-2的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)取保存的海洋小單孢菌株Micromonospora?sp.FIM-R160609進(jìn)行發(fā)酵，收集發(fā)酵液進(jìn)行固液分離獲得菌絲體；將所得菌絲體用甲醇或乙醇浸泡，收集浸泡液；

(2)以D3502大孔樹脂吸附柱進(jìn)行層析，并分別以67％和75％的乙醇-水溶液進(jìn)行梯度洗脫，收集75％乙醇-水洗脫液組分；

(3)將收集的洗脫液以HZ816樹脂吸附柱進(jìn)行層析，并分別以66％、69％和73％的乙醇-水溶液進(jìn)行梯度洗脫，收集含有Rakicidin?B1-2的73％的乙醇-水洗脫液組分；

(4)以乙酸乙酯或二氯甲烷萃取所得洗脫液，濃縮獲得粗品后用甲醇溶解，進(jìn)行半制備液相色譜分離，并以體積比710：290的乙腈-水進(jìn)行洗脫，分段收集，即得。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備所述天然Rakicidins類化合物Rakicidin?B1-2的方法，其特征在于，所述步驟(2)中，所述D3502大孔樹脂吸附柱的徑高比為1：5-1：10，裝柱體積2.5-4.0L，吸附流速為30-40ml/min。

5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的制備所述天然Rakicidins類化合物Rakicidin?B1-2的方法，其特征在于，所述步驟(3)中，所述HZ816樹脂吸附柱徑高比為1：5-1：8，裝柱體積2.2-3L，吸附流速為25-35ml/min。

6.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的制備所述天然Rakicidins類化合物Rakicidin?B1-2的方法，其特征在于，所述步驟(4)中，所述半制備液相色譜為Welch?Material，5μm，250mm×10mm，控制洗脫液流速8ml/min。

7.權(quán)利要求1所述天然Rakicidins類化合物Rakicidin?B1-2及其藥學(xué)上可接受的鹽用于制備具有抗臨床致病厭氧菌活性藥物的用途；其中，

所述抗臨床致病厭氧菌為甲氧西林耐藥金黃色葡萄球菌MRSA15-1、甲氧西林耐藥金黃色葡萄球菌MRSA15-2、甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌MSSA15-1、甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌MSSA15-2、萬古霉素耐藥糞腸球菌ATCC51575、萬古霉素耐藥糞腸球菌ATCC700802。

8.一種治療致病厭氧菌感染疾病的藥物，其特征在于，以權(quán)利要求1所述天然Rakicidins類化合物Rakicidin?B1-2及其藥學(xué)上可接受的鹽為活性成分，并添加藥學(xué)上可接受的載體。

9.海洋小單孢菌株Micromonospora?sp.FIM-R160609用于發(fā)酵制備權(quán)利要求1所述天然Rakicidins類化合物Rakicidin?B1-2的用途，其特征在于，所述海洋小單孢菌株Micromonospora?sp.FIM-R160609已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，其保藏編號(hào)為CGMCC?No.14823。