[發明專利]一種具有高抗氧化活性瓊二糖的制備方法及應用

在審

• 申請號: 201910736279.2
• 申請日: 2019-08-10
• 公開（公告）號: CN110373442A
• 公開（公告）日: 2019-10-25
• 發明（設計）人: 岳帆;張斌;管昶;王麗麗;高芹芹;徐小龍
• 申請（專利權）人: 青島博智匯力生物科技有限公司
• 主分類號: C12P19/14
• 分類號: C12P19/14;C12P19/12;C12N9/24;A23B4/20;C12R1/01
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本發明公開了一種具有高抗氧化活性瓊二糖的制備方法及應用，屬于海洋生物技術領域。本發明以瓊膠寡糖為原料，利用酶降解法制備得到瓊二糖，通過測定瓊二糖對DPPH自由基、ABTS⁺自由基、·OH自由基的清除能力，實現高抗氧化活性瓊二糖的均一性制備，并將瓊二糖用于南美白對蝦肉的保鮮，能有效減緩南美白對蝦蝦肉中蛋白質腐敗、降低脂肪氧化速率的作用，從而提高保鮮期限，延長南美白對蝦的貨架期，實現了高抗氧化活性瓊二糖在水產品保鮮領域中的高效利用。

技術領域

本發明涉及一種具有高抗氧化活性瓊二糖的制備方法，尤其涉及一種利用酶解法制備具有高抗氧化活性瓊二糖的的方法及其在水產品保鮮領域的應用，屬于海洋生物技術領域。

背景技術

瓊膠是一種水溶性多糖，廣泛應用于食品、醫藥及日用化工行業。在食品中，瓊膠可作為食品膠凝劑、穩定劑和增稠劑，起著增加食品黏度、使食品黏滑，口感富有彈韌性；在醫藥中，瓊膠主要用作微生物培養基。瓊膠寡糖作為瓊膠的降解產物，其水溶性較好。瓊膠寡糖制備方式主要有3種，分別為化學法（包括酸降解法、氧化降解法）、物理法（包括微波降解法、輻照降解法等）和酶法。與化學法和物理法相比，酶法制備瓊膠寡糖具有反應溫和、底物專一性強、產量較高、副產物少等優點。因此，酶法制備瓊膠寡糖及其性質研究成為近年的研究熱點。

相關研究表明瓊膠寡糖具有較好的抗氧化活性。其中瓊二糖具有較好的抗氧化活性，對ABTS⁺自由基、·OH自由基、二苯基苦味酰肼（DPPH）三種自由基均具有較強的清除作用。此外，瓊二糖還可用于果蔬的保鮮，如用瓊二糖處理蜜柚，可減少蜜柚果實有機酸、總糖、可溶性固形物、木質素和V_C的損耗，從而提高蜜柚果實的硬度，延長其保鮮期和貨架期。

水產品中含有豐富的蛋白質和多種不飽和脂肪酸，但因其含水量較高、微生物容易滋生、脂肪易氧化從而導致腐敗變質。瓊二糖作為一種無毒、高效、無味、成本較低的天然保鮮劑，在果蔬類植物保鮮中已得到應用，而將瓊二糖應用于水產品保鮮上的研究比較少。低聚合度、高抗氧化能力瓊膠寡糖在水產品保鮮領域中的應用成為本技術領域的關鍵技術問題，亟需關鍵技術的集成與應用。

發明內容

為克服上述現有技術中的不足，本發明提供一種具有高抗氧化活性瓊二糖的制備方法及應用，以瓊膠寡糖為原料，利用酶降解法制備得到瓊二糖，通過測定瓊二糖對DPPH自由基、ABTS⁺自由基、·OH自由基的清除能力，實現高抗氧化活性瓊二糖的均一性制備，并將瓊二糖用于南美白對蝦肉的保鮮，實現高抗氧化活性瓊二糖在水產品保鮮領域中的高效利用。

本發明通過下述技術方案實現上述技術效果：

一種具有高抗氧化活性瓊二糖的制備方法，具體包括以下步驟：

（一）瓊二糖寡聚體的制備

1）瓊膠寡糖的溶解：用去離子水將瓊膠寡糖配置為質量濃度為1%的溶液，在30℃水浴加熱攪拌使之完全溶解；

2）瓊膠寡糖的酶解：將粗酶液與溶解的瓊膠寡糖按照1:5～10的體積比混合，于30℃水浴加熱攪拌5～10min；

3）酶解液滅活：將酶解后的液體于100℃滅活10～20min；

4）酶解液離心：將酶解滅活的產物于6000～8000r/min，高速離心10～15min；

5）酶解液凍干：酶解液離心物真空冷凍干燥，得到瓊二糖寡聚體粉末；

（二）瓊二糖的制備

1）瓊二糖寡聚體的溶解：用去離子水將瓊二糖寡聚體配置為質量濃度為1%的溶液，在30℃水浴加熱攪拌使之完全溶解；

2）瓊二糖寡聚體的酶解：將粗酶液與溶解的瓊二糖寡聚體按照1:5～10的體積比混合，于30℃水浴加熱攪拌5～10min；