[發(fā)明專利]蛋白穩(wěn)定液、蛋白校準(zhǔn)品、試劑盒及檢測蛋白校準(zhǔn)品穩(wěn)定性的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910725954.1
• 申請(qǐng)日: 2019-08-07
• 公開（公告）號(hào): CN110412294B9
• 公開（公告）日: 2023-05-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 饒微;袁錦云;劉坤;劉來壯;陳華
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N33/58
• 代理公司: 北京康信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11240
• 代理人: 路秀麗

本發(fā)明提供了一種蛋白穩(wěn)定液、蛋白校準(zhǔn)品、試劑盒及檢測蛋白校準(zhǔn)品穩(wěn)定性的方法。其中，該蛋白穩(wěn)定液包括基礎(chǔ)稀釋液以及陰離子表面活性劑和/或多元醇，基礎(chǔ)稀釋液包括蛋白緩沖液。通過在維持蛋白結(jié)構(gòu)基本穩(wěn)定的蛋白緩沖液的基礎(chǔ)上，添加陰離子表面活性劑和/或多元醇，陰離子表面活性劑能夠破壞蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間的氫鍵等非共價(jià)鍵，解聚蛋白質(zhì)聚合體，從而防止蛋白質(zhì)之間的團(tuán)聚，增加蛋白質(zhì)的分散性，避免蛋白質(zhì)在溶液中因長期保存發(fā)生聚集變性而失去其特定的功效；而多元醇類物質(zhì)，能夠改善蛋白微環(huán)境的極性，在蛋白表面形成水化膜，提高親水性，抑制其團(tuán)聚。而且，二者聯(lián)用后的協(xié)同作用能進(jìn)一步抑制蛋白團(tuán)聚。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及檢測試劑領(lǐng)域，具體而言，涉及一種蛋白穩(wěn)定液、蛋白校準(zhǔn)品、試劑盒及檢測蛋白校準(zhǔn)品穩(wěn)定性的方法。

背景技術(shù)

蛋白質(zhì)作為一類生物大分子，在醫(yī)藥，科研，醫(yī)療等領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用。蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性是其應(yīng)用需要關(guān)注的重要性能之一，也是其產(chǎn)品質(zhì)量的重要組成部分。然而，諸多因素會(huì)影響蛋白質(zhì)保存的穩(wěn)定性，主要有團(tuán)聚作用、氧化作用、極端pH、重金屬離子和機(jī)械力等。大量的蛋白質(zhì)由于其穩(wěn)定性較差，從而影響其廣泛的應(yīng)用。因此，蛋白質(zhì)在保存過程中需注意以上因素的影響。

經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，部分蛋白質(zhì)，尤其是與神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)的蛋白質(zhì)如β淀粉樣蛋白、α-突觸核蛋白等，由于其分子內(nèi)存在高度疏水區(qū)域，且易形成β片層結(jié)構(gòu)(β片層結(jié)構(gòu)又稱β折疊(β-pleatedsheet)。β折疊是蛋白質(zhì)的一種二級(jí)結(jié)構(gòu)，在β折疊中，兩條以上氨基酸鏈(肽鏈)，或同一條肽鏈之間的不同部分形成平行或反平行排列，形成β折疊。β折疊中，蛋白質(zhì)相鄰肽鏈主鏈的N-H和C＝O之間形成有規(guī)則的氫鍵，在β-折疊中，所有的肽鍵都參與鏈間氫鍵的形成，氫鍵與β-折疊的長軸呈垂直關(guān)系，β折疊靠鍵間氫鍵維持穩(wěn)定)，容易發(fā)生團(tuán)聚，形成聚集體，影響其穩(wěn)定性，從而制約了對(duì)該類蛋白的研究與應(yīng)用。

為了提高此類蛋白的穩(wěn)定性，現(xiàn)有技術(shù)中也有報(bào)道將其制備成凍干粉以提高穩(wěn)定性，但這些方法仍未解決此類蛋白在液體狀態(tài)時(shí)的穩(wěn)定性。因此，仍需要對(duì)現(xiàn)有技術(shù)進(jìn)行改進(jìn)，以提高此類易形成β片層結(jié)構(gòu)的蛋白在液體環(huán)境中的穩(wěn)定性。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的主要目的在于提供一種蛋白穩(wěn)定液、蛋白校準(zhǔn)品、試劑盒及檢測蛋白校準(zhǔn)品穩(wěn)定性的方法，以解決現(xiàn)有技術(shù)中此類易形成β片層結(jié)構(gòu)的蛋白在液體環(huán)境中容易團(tuán)聚而不穩(wěn)定的問題。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了一種蛋白穩(wěn)定液，該蛋白穩(wěn)定液包括：基礎(chǔ)稀釋液，基礎(chǔ)稀釋液包括蛋白緩沖液；以及陰離子表面活性劑和/或多元醇。

進(jìn)一步地，陰離子表面活性劑為磺酸鹽陰離子表面活性劑、硫酸鹽陰離子表面活性劑、羧酸鹽陰離子表面活性劑或磷酸鹽陰離子表面活性劑；優(yōu)選地，磺酸鹽表面活性劑的結(jié)構(gòu)為R-SO₃-M所示，其中，R為碳原子數(shù)為10～15的烴基，M為堿金屬中的一種；更優(yōu)選地，磺酸鹽表面活性劑為十二烷基磺酸鈉；優(yōu)選地，硫酸鹽陰離子表面活性劑的結(jié)構(gòu)為R-O-SO₃-M所示，R為碳原子數(shù)為10～15的烴基，M為堿金屬中的一種；更優(yōu)選地，硫酸鹽陰離子表面活性劑為十二烷基硫酸鈉；優(yōu)選地，羧酸鹽陰離子表面活性劑的結(jié)構(gòu)為R-COO-M所示，其中R為碳原子數(shù)為10～22的烴基，M為堿金屬中的一種；更優(yōu)選地，羧酸鹽陰離子表面活性劑為硬脂酸鈉；優(yōu)選地，磷酸鹽陰離子表面活性劑的結(jié)構(gòu)為R-O-PO₃-M所示，R為碳原子數(shù)為10～15的烴基，M為堿金屬中的一種；更優(yōu)選地，磷酸鹽陰離子表面活性劑為單十二烷基磷酸鈉。

進(jìn)一步地，陰離子表面活性劑在蛋白穩(wěn)定液中的質(zhì)量含量為0.005％～0.1％，優(yōu)選為0.005％～0.01％。

進(jìn)一步地，多元醇為碳原子數(shù)為3～12的多元醇；優(yōu)選地，多元醇為甘露醇、甘油、海藻糖或山梨醇；優(yōu)選地，多元醇在蛋白穩(wěn)定液中的質(zhì)量含量為5％～50％，更優(yōu)選為10～40％，進(jìn)一步優(yōu)選為15～30％。

進(jìn)一步地，基礎(chǔ)稀釋液還包括BSA、防腐劑及電解質(zhì)中的任意一種或多種。