[發(fā)明專利]一種酶促反應(yīng)體系用于潛在指紋顯現(xiàn)的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910722660.3
• 申請日: 2019-08-06
• 公開（公告）號: CN110464361B
• 公開（公告）日: 2022-04-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 林愛華;趙燕熹;王利華;蒙永江;張鵬;宋發(fā)軍;耿紅;王紅瑩;孟艷艷
• 申請（專利權(quán)）人: 中南民族大學(xué)
• 主分類號: A61B5/1172
• 分類號: A61B5/1172
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務(wù)所(普通合伙) 42001
• 代理人: 余曉雪

本發(fā)明涉及痕量檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體公開了一種酶促反應(yīng)體系用于潛在指紋顯現(xiàn)的方法，該方法為一種酶催化反應(yīng)產(chǎn)生熒光產(chǎn)物而顯現(xiàn)出潛在指紋的方法。先制備酶促反應(yīng)體系顯色液，然后將其噴或涂到可能有指紋但不含熒光物質(zhì)的指紋客體上，體系中的酶等物質(zhì)會與指紋中的乳酸發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生有熒光的產(chǎn)物從而顯現(xiàn)指紋，在紫外光照射下可直接拍照，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于靈敏、快速，顯色試劑組成不復(fù)雜，對操作人員不會產(chǎn)生毒性，還可以實(shí)現(xiàn)“隱蔽偵察”，有望在刑偵等方面得到應(yīng)用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及痕量檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種酶促反應(yīng)體系用于潛在指紋顯現(xiàn)的方法。

背景技術(shù)

指紋具有人各不同,終生不變和觸物留痕的特點(diǎn)。科學(xué)正確地發(fā)現(xiàn)、提取、顯現(xiàn)、鑒定指紋對于開展偵查工作、懲治犯罪具有重要的實(shí)踐作用，對遺留在客體表面上的指紋進(jìn)行提取和鑒定是偵破案件的重要依據(jù)。

目前識別潛在指紋的方法可分為三大類：物理顯現(xiàn)法、物理化學(xué)顯現(xiàn)法和化學(xué)顯現(xiàn)法，當(dāng)前技術(shù)的發(fā)展和改進(jìn)主要集中在采用新穎的表征手段來增加檢驗(yàn)的靈敏度以及不同的適用范圍，中國專利(CN201410146802.3)中，王利華等采用了多種熒光猝滅體系進(jìn)行潛在指紋顯現(xiàn)。在中國專利(CN201810189499.3)中，發(fā)明人制備了一種磁性熒光粉末進(jìn)行潛指紋顯現(xiàn)，提高靈敏度，但是其制備過程復(fù)雜。中國專利(CN201710888373.0)制備了一種特殊材料：黑體輻射發(fā)光材料，通過該材料來降低背景熒光獲得較清晰的指紋圖像，但是該材料的制備過程復(fù)雜。

酶作為生物催化劑，其催化反應(yīng)效率高，專一性強(qiáng)，靈敏度高。中國專利(CN201710045379.1)利用酶對潛指紋進(jìn)行了顯現(xiàn)，但其需要對潛指紋樣本進(jìn)行兩次轉(zhuǎn)移，再用抗體進(jìn)行標(biāo)記后，才用相關(guān)試劑進(jìn)行顯現(xiàn)，整個(gè)操作過程非常復(fù)雜，且耗時(shí)長。

目前尚未見在常溫常壓下，短時(shí)間內(nèi)通過酶催化潛在指紋中痕量物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)顯現(xiàn)潛指紋的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，本發(fā)明的目的在于提供了一種酶促反應(yīng)體系用于潛在指紋顯現(xiàn)的方法。汗液是潛指紋的主要成分，指紋汗液中除了大部分的水分以外，還含有乳酸、氨基酸、蛋白質(zhì)、氯化鈉等物質(zhì)，文獻(xiàn)資料顯示汗液中乳酸含量約為6.6×10^-3mol/L。乳酸脫氫酶可以催化乳酸發(fā)生反應(yīng)生成丙酮酸，該反應(yīng)的乳酸檢出限為2.25×10^-5mol/L；由于酶促反應(yīng)具有專一性，潛指紋中其他共存組分對該反應(yīng)不會產(chǎn)生干擾，因此使用該方法可以直接對潛指紋中的乳酸進(jìn)行測定。利用該酶促反應(yīng)可以建立一種成本低、快速、靈敏度高、操作簡單的潛指紋顯現(xiàn)方法。該方法能快速顯現(xiàn)汗?jié)撝讣y且顯現(xiàn)試劑的組成不復(fù)雜，顯現(xiàn)操作簡單，對操作人員不會產(chǎn)生毒性。

為了實(shí)現(xiàn)上述技術(shù)目的，本發(fā)明的一種酶促反應(yīng)體系用于潛在指紋顯現(xiàn)的方法的步驟如下：

(1)制備好酶促反應(yīng)體系顯色液，置于冰箱備用；

(2)將酶促反應(yīng)體系顯色液噴或涂到可能有指紋但不含熒光物質(zhì)的指紋客體上；

(3)在紫外光照下顯影。

所述酶促反應(yīng)體系顯色液包括：50～80U/mL乳酸脫氫酶、0.007～0.009mol/L氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸和Tris-HCl-水合肼緩沖液三種液體。

所述Tris-HCl-水合肼緩沖液的制備方法：參照常規(guī)的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)書中的附錄配置pH9.0、0.05mol/LTris-HCl緩沖液后，再向其中加入水合肼使水合肼終濃度為1.2～1.8mol/L(優(yōu)選1.5mol/L)；

所述水合肼以水合肼濃度為50％(質(zhì)量百分比)以上的水合肼溶液形式加入。

所述酶促反應(yīng)體系顯色液噴或涂到指紋客體上的順序?yàn)椋合葒娀蛲縏ris-HCl-水合肼緩沖液和氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，最后噴或涂乳酸脫氫酶，其中Tris-HCl-水合肼緩沖液和氧化型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸先后順序不限，也可以同時(shí)噴或涂。