[發明專利]一種檢測玉米赤霉烯酮的生物傳感器、其制備方法與使用該傳感器檢測玉米赤霉烯酮的方法在審
| 申請號： | 201910719412.3 | 申請日： | 2019-08-06 |
| 公開（公告）號： | CN110261363A | 公開（公告）日： | 2019-09-20 |
| 發明（設計）人： | 楊慶利;王琦;吳薇;顏春蕾;都晗;趙海燕;于春娣;朱英蓮 | 申請（專利權）人： | 青島農業大學 |
| 主分類號： | G01N21/64 | 分類號： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京天奇智新知識產權代理有限公司 11340 | 代理人： | 賈文健 |
| 地址： | 266109 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 玉米赤霉烯酮 生物傳感器 傳感器檢測 種檢測 制備 檢測 熒光基團標記 核酸適配體 特異性識別 氧化石墨烯 物質檢測 靈敏度 適配體 自組裝 | ||
1.一種檢測玉米赤霉烯酮的生物傳感器，其特征在于，所述生物傳感器由5’端被熒光基團標記的可特異性識別玉米赤霉烯酮的核酸適配體即ZEN適配體，和氧化石墨烯自組裝形成；
其中，
所述氧化石墨烯用作熒光猝滅劑；
所述ZEN適配體的核苷酸序列為：
5’-CTACCAGCTTTGAGGCTCGATCCAGCTTATTCAATTATACCAGCTTATTCAATTATACCAGC-3’。
2.根據權利要求1所述檢測玉米赤霉烯酮的生物傳感器，其特征在于，所述的熒光基團標記為Cy3、Cy5、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 594、FAM、ROX中的一種。
3.根據權利要求2所述檢測玉米赤霉烯酮的生物傳感器，其特征在于，所述的熒光基團標記為Cy3。
4.權利要求1～3任一項所述檢測玉米赤霉烯酮的生物傳感器的制備方法，其特征在于，步驟如下：
將20μL濃度為1μM的ZEN適配體加入到20μL的濃度為5～25μg/mL的氧化石墨烯中，搖勻后在室溫下孵育10min，以使ZEN適配體與氧化石墨烯充分結合，形成ZEN適配體-氧化石墨烯復合物即為檢測玉米赤霉烯酮的生物傳感器。
5.根據權利要求4所述檢測玉米赤霉烯酮的生物傳感器的制備方法，其特征在于，所述氧化石墨烯的濃度為20μg/mL。
6.使用權利要求5制備的生物傳感器檢測玉米赤霉烯酮的方法，其特征在于，步驟如下：
將權利要求5制備的生物傳感器與待測樣品按照99:1的體積比混合，于30～50℃水浴1h，以使生物傳感器與待測樣品充分混合，用熒光分光光度計掃描反應后的溶液在512nm激發波長下的熒光發射光譜，測定熒光強度，將測得的熒光強度導入標準曲線，計算獲得待測樣品中玉米赤霉烯酮的濃度。
7.根據權利要求6所述檢測玉米赤霉烯酮的方法，其特征在于，所述水浴溫度為45℃。
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