[發(fā)明專利]一種參與紫草素生物合成的CYP76B100蛋白及其編碼基因與應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910718772.1 | 申請日： | 2019-08-05 |
| 公開（公告）號： | CN112322592B | 公開（公告）日： | 2021-12-28 |
| 發(fā)明（設計）人： | 劉濤;宋皖;莊以彬;馬延和 | 申請（專利權）人： | 中國科學院天津工業(yè)生物技術研究所 |
| 主分類號： | C12N9/02 | 分類號： | C12N9/02;C12N15/53;C12N1/19;C12N15/81;C12P7/22;C12R1/865 |
| 代理公司： | 上海一平知識產權代理有限公司 31266 | 代理人： | 王正君;徐迅 |
| 地址： | 300308 天津*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 參與 紫草 生物 合成 cyp76b100 蛋白 及其 編碼 基因 應用 | ||
1.一種分離的CYP76B100多肽，其特征在于，所述多肽為如SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的多肽。
2.一種分離的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸為編碼如SEQ ID NO.1所示CYP76B100多肽的核苷酸序列。
3.如權利要求2所述的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸為如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。
4.一種載體，其特征在于，它含有權利要求2所述的多核苷酸。
5.一種遺傳工程化的宿主細胞，其特征在于，所述的宿主細胞含有權利要求4所述的載體，或其基因組中整合權利要求2所述的多核苷酸，所述宿主細胞選自下組：釀酒酵母、大腸桿菌、或其組合。
6.一種CYP76B100多肽的制備方法，其特征在于，所述方法包括：
(a)培養(yǎng)權利要求5所述的宿主細胞；
(b)從培養(yǎng)物中分離出所述CYP76B100多肽。
7.一種如權利要求1所述的CYP76B100多肽、權利要求4所述的載體、或權利要求5所述的宿主細胞的用途，其特征在于，它被用于催化以下反應，或被用于制備催化以下反應的催化制劑：將2-香葉基-對苯二酚的3″位碳原子進行羥基化反應，生成3″-羥基-2-香葉基-對苯二酚。
8.一種催化反應的方法，其特征在于，包括步驟：在權利要求1所述的多肽存在的條件下，進行2-香葉基-對苯二酚的3″位碳原子的羥基化的催化反應。
9.如權利要求8所述的方法，其特征在于，所述方法在輔酶因子的存在下進行。
10.如權利要求8所述的方法，其特征在于，所述方法在氧氣存在下進行。
11.一種3″-羥基-2-香葉基-對苯二酚的制備方法，其特征在于，包括：
在權利要求1所述的多肽的存在下，催化2-香葉基-對苯二酚，從而得到3″-羥基-2-香葉基-對苯二酚。
12.如權利要求11所述的方法，其特征在于，所述方法在輔酶因子的存在下進行。
13.如權利要求12所述的方法，其特征在于，所述輔酶因子為NADPH和/或NADH。
14.如權利要求13所述的方法，其特征在于，所述輔酶因子的用量為0.5-6.0mM。
15.如權利要求11所述的方法，其特征在于，所述方法在氧氣存在下進行。
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