[發(fā)明專利]降血糖功效的植物乳桿菌及其篩選方法和應(yīng)用藥劑及食品

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910709658.2
• 申請(qǐng)日: 2019-08-02
• 公開（公告）號(hào): CN110964659A
• 公開（公告）日: 2020-04-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曹毅;喬代蓉;徐輝;蔡婷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四川大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A61K35/747;A61P3/10;A61P39/06;A23L33/135;C12R1/25
• 代理公司: 成都弘毅天承知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 51230
• 代理人: 楊保剛

1.一種植物乳桿菌，其特征在于：該植物乳桿菌的保藏編號(hào)為CCTCC M 2019591，拉丁文名稱為Lactobacillus plantarum CT152。

2.一種具有降血糖功能的藥品及食品，其特征在于：采用權(quán)利要求1所述的植物乳桿菌。

3.一種植物乳桿菌的篩選方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1：進(jìn)行益生指標(biāo)測(cè)定，包括模擬的胃腸液中的存活率測(cè)定、膽鹽耐受力測(cè)定、對(duì)Caco-2細(xì)胞的粘附能力測(cè)定及抗生素耐藥性檢測(cè)；

S2：進(jìn)行抗氧化能力測(cè)定；

S3：進(jìn)行乳酸菌的抗糖尿病特性的檢測(cè)，包括大鼠腸道α-glucosidase活力抑制率的測(cè)定和乳酸菌干預(yù)高糖刺激胰島細(xì)胞分泌胰島素實(shí)驗(yàn)。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的植物乳桿菌的篩選方法，其特征在于：所述進(jìn)行抗氧化能力測(cè)定的步驟，具體包括：乳酸菌清除DPPH能力的測(cè)定、乳酸菌清除羥自由基能力測(cè)定、乳酸菌抗脂質(zhì)過氧化能力測(cè)定、乳酸菌的還原能力測(cè)定及乳酸菌的GSH-Px和T-SOD的酶活測(cè)定。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的植物乳桿菌的篩選方法，其特征在于：還包括進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的步驟，具體包括2型糖尿病模型大鼠的構(gòu)建及進(jìn)行灌胃治療。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的植物乳桿菌的篩選方法，其特征在于：所述模擬的胃腸液中的存活率測(cè)定的具體步驟包括：將乳酸菌用0.85％生理鹽水重懸后，在pH為3的模擬胃液中將其菌液密度調(diào)節(jié)為1×10⁹CFU/mL，混勻后將其放置于37℃培養(yǎng)1，2和3h后分別計(jì)活菌數(shù)，在模擬胃液中培養(yǎng)3h后，取1mL培養(yǎng)液加入至9mL pH為8的模擬腸液中，混勻后于37℃培養(yǎng)，分別于2、4和8h檢測(cè)活菌數(shù)，用MRS固體培養(yǎng)基37℃培養(yǎng)24-48h，計(jì)算其存活率，

存活率(％)＝[log CFU N1/log CFU N]×100％

N₁＝經(jīng)過模擬胃腸液處理之后的乳酸菌活菌數(shù)，N₀＝未處理前乳酸菌的活菌數(shù)。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的植物乳桿菌的篩選方法，其特征在于：所述膽鹽耐受力測(cè)定的步驟包括：培養(yǎng)18h-24h的乳酸菌按2-5％分別接種于含有或不含有0.3％膽鹽的MRS-THIO培養(yǎng)基中，混合物于37℃培養(yǎng)16-24h，每隔一段時(shí)間在600nm；處測(cè)吸光值，記錄不加膽鹽和加了膽鹽的培養(yǎng)基吸光值達(dá)到0.3個(gè)單位時(shí)各自所需的時(shí)間，這兩個(gè)時(shí)間差即為乳酸菌在膽鹽中生長的延遲時(shí)間，延遲時(shí)間設(shè)為LT，LT越短說明乳酸菌，耐受膽鹽的能力越強(qiáng)；所述MRS-THIO培養(yǎng)基中中的MRS含有0.2％的巰基乙酸鈉。