[發(fā)明專利]高效轉(zhuǎn)化農(nóng)作物秸稈的復(fù)合菌劑及其制備方法和應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910707779.3
• 申請(qǐng)日: 2019-08-01
• 公開（公告）號(hào): CN110358715A
• 公開（公告）日: 2019-10-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊謙;林樅雨
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 哈爾濱工業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12N1/14;C12P19/02;C05F11/08;C05F17/00;C12R1/465;C12R1/685;C12R1/885
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標(biāo)事務(wù)所 23109
• 代理人: 岳泉清

1.高效轉(zhuǎn)化農(nóng)作物秸稈的復(fù)合菌劑，其特征在于該高效轉(zhuǎn)化農(nóng)作物秸稈的復(fù)合菌劑高效轉(zhuǎn)化農(nóng)作物秸稈的復(fù)合菌劑由復(fù)合菌群和固定劑混合而成，所述的復(fù)合菌群按質(zhì)量百分含量由37％～43％的灰略紅鏈霉菌、27％～33％的黑曲霉和27％～33％的綠色木霉組成。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高效轉(zhuǎn)化農(nóng)作物秸稈的復(fù)合菌劑，其特征在于所述的復(fù)合菌群按質(zhì)量百分含量由40％的灰略紅鏈霉菌、30％的黑曲霉和30％的綠色木霉組成。

3.高效轉(zhuǎn)化農(nóng)作物秸稈的復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于該制備方法按以下步驟實(shí)現(xiàn)：

一、將灰略紅鏈霉菌接種到活化培養(yǎng)基中在26℃～28℃下進(jìn)行恒溫培養(yǎng)，得到活化的灰略紅鏈霉菌，該活化固體培養(yǎng)基中的組分為：濃度為3.0～5.0g/L酵母浸粉，8.0～12.0g/L麥芽浸粉，3.0～5.0g/L葡萄糖和16.0～20.0g/L瓊脂；

二、將黑曲霉接種到PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行活化培養(yǎng)，得到活化的黑曲霉；

三、將綠色木霉接種到PDA培養(yǎng)基上進(jìn)行活化培養(yǎng)，得到活化的綠色木霉；

四、將活化后的灰略紅鏈霉菌、黑曲霉和綠色木霉分別進(jìn)行3～5次傳代后純培養(yǎng)，灰略紅鏈霉菌進(jìn)行16s rDNA鑒定，黑曲霉和綠色木霉進(jìn)行ITS鑒定，確定培養(yǎng)的菌種為目標(biāo)菌種后分別制備孢子懸液，然后將孢子懸液接種到種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)，分別得到菌液，灰略紅鏈霉菌種子培養(yǎng)基組分為：濃度為3.0～5.0g/L酵母浸粉，8.0～12.0g/L麥芽浸粉，3.0～5.0g/L葡萄糖，黑曲霉和綠色木霉種子培養(yǎng)基為PDA液體；

五、按質(zhì)量百分含量將37％～43％的灰略紅鏈霉菌菌液、27％～33％的黑曲霉菌液和27％～33％的綠色木霉菌液混合均勻得到復(fù)合菌群，復(fù)合菌群與固定劑混合后干燥，得到高效轉(zhuǎn)化農(nóng)作物秸稈的復(fù)合菌劑。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的高效轉(zhuǎn)化農(nóng)作物秸稈的復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于步驟一中灰略紅鏈霉菌活化培養(yǎng)的條件是在28℃的溫度下恒溫培養(yǎng)4～5天。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的高效轉(zhuǎn)化農(nóng)作物秸稈的復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于步驟二中黑曲霉接種到PDA培養(yǎng)基上在28℃的溫度下活化培養(yǎng)4～5天；步驟三中綠色木霉接種到PDA培養(yǎng)基上在28℃的溫度下活化培養(yǎng)4～5天。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的高效轉(zhuǎn)化農(nóng)作物秸稈的復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于步驟四中孢子懸液按照1％接種到種子培養(yǎng)基。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的高效轉(zhuǎn)化農(nóng)作物秸稈的復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于步驟四中孢子懸液接種到種子培養(yǎng)基中以28～32℃、180～220r/min振蕩培養(yǎng)3～5天。

8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的高效轉(zhuǎn)化農(nóng)作物秸稈的復(fù)合菌劑的制備方法，其特征在于所述的固定劑為微粉碳酸鈣或膨潤土。

9.如權(quán)利要求1所述的高效轉(zhuǎn)化農(nóng)作物秸稈的復(fù)合菌劑的應(yīng)用，其特征在于將高效轉(zhuǎn)化農(nóng)作物秸稈的復(fù)合菌劑溶于水中配置成復(fù)合菌液，復(fù)合菌液噴施在農(nóng)作物秸稈表面進(jìn)行轉(zhuǎn)化。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的高效轉(zhuǎn)化農(nóng)作物秸稈的復(fù)合菌劑的應(yīng)用，其特征在于復(fù)合菌溶液中復(fù)合菌劑的濃度為30g/L～50g/L。