[發明專利]一種評價肌漿網鈣泄漏的方法

有效

• 申請號: 201910707026.2
• 申請日: 2019-08-01
• 公開（公告）號: CN110441273B
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發明（設計）人: 謝文俊;賀雯瑾;張伊;李晶晶;戚瑛
• 申請（專利權）人: 西安交通大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 西安智大知識產權代理事務所 61215
• 代理人: 王晶

1.一種評價肌漿網鈣泄漏的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1)

進行心肌細胞離體分離與培養實驗并用激光共聚焦顯微鏡采集熒光圖像記錄心肌細胞的鈣活動；

步驟2)

對步驟1)采集的熒光圖像進行標準化，再對標準化處理后的圖像進行熒光強度統計，獲取其幅度分布直方圖；

步驟3)

對步驟2)中幅度分布直方圖圍成的曲線進行以其峰值為中心的左右不對稱高斯擬合，通過原曲線及擬合曲線中心兩側的面積計算得到熒光偏差參量R_fluo；

步驟4)、對原始圖像進行時間差分，得到全新流量圖：

y₂(x,t)＝y(x,t)-y(x,t-1)

對流量圖重復步驟2)的操作，得到其幅度分布直方圖后進行不對稱高斯擬合，再通過原曲線及擬合曲線中心兩側的面積計算得到流量偏差參量R_flow，至此得到兩個描述肌漿網鈣泄漏的新參數；

其中步驟2)-4)可在計算機系統中執行，其第一虛擬模塊執行步驟2)，第二虛擬模塊執行步驟3)，第三虛擬模塊執行步驟4)，所得結果可通過顯示設備顯示；

所述的步驟2)中，對于采集到的熒光圖像，先獲取熒光基線值，再用圖像上各點熒光強度除以基線強度，得到標準化圖像：

其中ΔF為各點熒光強度，而F₀則為基線熒光強度；

對幅度分布直方圖以其峰值為中心，將曲線左右兩部分分別用參數不同的高斯函數進行擬和：

其中，A為峰值；b為峰值對應位置的橫坐標，即中心位置；C₁、C₂分別為中心位置左右兩側的半高寬，x_max為曲線峰值所在位置橫坐標；

對幅度分布直方曲線及擬和后曲線分別計算其面積：

其中x1，x2為計算的起止位置；

得到熒光偏差參量：

其中S₁為幅度分布直方圖中心位置左側面積，S₂為幅度分布直方圖中心位置右側面積，S_N2為擬合曲線中心位置右側面積；

與上述過程相同：對流量圖的熒光強度幅度分布直方圖以其峰值為中心，將曲線左右兩部分分別用參數不同的高斯函數進行擬和，對幅度分布直方曲線及擬和后曲線分別計算其面積；

計算得出流量偏差參量：

其中S′₁為流量圖的幅度分布直方圖中心位置左側面積，S′₂為流量圖熒光強度幅度分布直方圖中心位置右側面積，S′_N2為流量圖熒光強度幅度分布曲線的擬合曲線。

2.根據權利要求1所述的一種評價肌漿網鈣泄漏的方法，其特征在于，所述的步驟1)中，分離下來的心肌細胞需在生長狀況良好的情況下用熒光染料染色，再使用激光共聚焦顯微鏡通過線掃描的方式記錄細胞鈣活動情況。