[發(fā)明專利]自交聯(lián)蛋白、配體組合物、制備方法、試劑盒及系統(tǒng)

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910703584.1
• 申請日: 2019-07-31
• 公開（公告）號: CN112305227A
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄺俊韜;蔡敏
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳市帝邁生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/531;G01N33/53
• 代理公司: 深圳市威世博知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44280
• 代理人: 唐雙

1.一種自交聯(lián)蛋白，其特征在于，包括：

至少第一信號蛋白和第二信號蛋白，所述第一信號蛋白與所述第二信號蛋白通過偶聯(lián)反應(yīng)或點擊化學(xué)反應(yīng)連接，以形成所述自交聯(lián)蛋白。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的自交聯(lián)蛋白，其特征在于，

所述第一信號蛋白含有疊氮基團或疊氮反應(yīng)基團中的一種；

所述第二信號蛋白含有疊氮基團或疊氮反應(yīng)基團中的另一種；

其中，所述第一信號蛋白與所述第二信號蛋白通過疊氮基團與疊氮反應(yīng)基團之間的點擊化學(xué)反應(yīng)連接，以形成所述自交聯(lián)蛋白。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的自交聯(lián)蛋白，其特征在于，

所述疊氮反應(yīng)基團包括：可與所述疊氮基團形成三氮唑環(huán)的炔烴、或者與所述疊氮基團形成二氮雜環(huán)的環(huán)烯烴。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的自交聯(lián)蛋白，其特征在于，

所述偶聯(lián)反應(yīng)采用的方法為混合酸酐法、碳二亞胺法、戊二醛法、戊二酸酐法、重氮化法、琥珀酸酐法、羰基二咪唑法或過碘酸鈉法。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的自交聯(lián)蛋白，其特征在于，

所述偶聯(lián)反應(yīng)中用到的交聯(lián)劑為基于NHS-酯和亞氨酸酯反應(yīng)性基團的同型雙功能氨基反應(yīng)性蛋白交聯(lián)劑、基于馬來酰亞胺和酰肼反應(yīng)基團的巰基-糖類交聯(lián)劑、基于馬來酰亞胺或吡啶二巰基反應(yīng)基團的同型雙功能交聯(lián)劑、適用于蛋白和其他分子的伯胺和巰基基團之間的連接的異型雙功能蛋白交聯(lián)劑、適用于羧基與伯胺連接的碳二亞胺交聯(lián)劑、光反應(yīng)性交聯(lián)劑中的異型雙功能交聯(lián)劑、化學(xué)選擇性連接交聯(lián)劑或雙功能交聯(lián)劑。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的自交聯(lián)蛋白，其特征在于

所述第一信號蛋白與所述第二信號蛋白均為堿性磷酸酶、辣根過氧化物酶、藻紅蛋白、藻藍(lán)蛋白、藻紅藍(lán)蛋白或別藻藍(lán)蛋白中的至少一種。

7.一種配體組合物，其特征在于，包括：

配體；

自交聯(lián)蛋白，為如權(quán)利要求1-6任一項所述的自交聯(lián)蛋白；

所述配體與所述自交聯(lián)蛋白通過偶聯(lián)反應(yīng)或點擊化學(xué)反應(yīng)連接，以形成所述配體組合物。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的配體組合物，其特征在于，

所述配體含有疊氮基團或疊氮反應(yīng)基團中的一種；

所述自交聯(lián)蛋白含有疊氮基團或疊氮反應(yīng)基團中的另一種；

其中，所述配體與所述自交聯(lián)蛋白通過疊氮基團與疊氮反應(yīng)基團之間的點擊化學(xué)反應(yīng)連接，以形成所述配體組合物。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的配體組合物，其特征在于，

所述疊氮反應(yīng)基團包括：可與所述疊氮基團形成三氮唑環(huán)的炔烴、或者與所述疊氮基團形成二氮雜環(huán)的環(huán)烯烴。

10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的配體組合物，其特征在于，

所述偶聯(lián)反應(yīng)采用的方法為混合酸酐法、碳二亞胺法、戊二醛法、戊二酸酐法、重氮化法、琥珀酸酐法、羰基二咪唑法或過碘酸鈉法。

11.根據(jù)權(quán)利要求7所述的配體組合物，其特征在于，

所述配體為抗體、抗原、半抗原-載體偶聯(lián)物或者親和素中的至少一種。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的配體組合物，其特征在于，

所述抗體包括血管緊張素I抗體、NT-ProBNP抗體、肌鈣蛋白抗體、甲胎蛋白抗體、癌胚抗原抗體、HIV抗原抗體、乙肝表面抗原抗體、甲狀腺球蛋白抗體、肌鈣蛋白I或T抗體或肌紅蛋白抗體中的至少一種；

所述抗原包括：血管緊張素I抗原、NT-ProBNP抗原、肌鈣蛋白抗原、甲胎蛋白抗原、癌胚抗原抗原、HIV抗原抗原、乙肝表面抗原抗原、甲狀腺球蛋白抗原、肌鈣蛋白I或T抗原或肌紅蛋白抗原中的至少一種；

所述半抗原-載體偶聯(lián)物包括醛固酮以及醛固酮半抗原蛋白偶聯(lián)物、HA透明質(zhì)酸以及透明質(zhì)酸半抗原蛋白偶聯(lián)物、血管緊張素I-載體偶聯(lián)物、血管緊張素II-載體偶聯(lián)物或HABP透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白中的至少一種。