[發明專利]腦癱基礎上的顳葉癲癇動物模型的建立方法

有效

• 申請號: 201910702959.2
• 申請日: 2019-07-31
• 公開（公告）號: CN110269046B
• 公開（公告）日: 2021-03-26
• 發明（設計）人: 劉晶;張宏云;鄒偉;馬靜云
• 申請（專利權）人: 大連醫科大學附屬第一醫院
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02
• 代理公司: 大連東方專利代理有限責任公司 21212
• 代理人: 李銀姬;李馨

本發明提供一種在腦癱基礎上的顳葉癲癇動物模型及其的制備方法，將幼齡動物進行單側頸總動脈結扎術后，進行缺氧2h～3.5h后，送回母鼠身邊，飼養3w～5w，存活的動物的腹腔內注射匹羅卡品誘發出Racine標準四級及四級以上癲癇，獲得在腦癱基礎上的顳葉癲癇動物模型。本發明的動物模型，其建立方法簡單，動物模型的存活率高，存活率為70％以上，模型動物存在學習及長期記憶功能的損害，但短期記憶無損傷，腦電圖除可發現無臨床發作的電發作即腦電波的異常外，還有可有臨床發作的癲癇發作，可廣泛應用于不同治療方法對合并顳葉癲癇的腦癱患兒的療效評價，尤其可用于存在認知損害的腦癱合并顳葉癲癇患兒療效評估。

技術領域

本發明屬于神經系統疾病的研究領域，特別涉及一種合并顳葉癲癇的腦癱疾病模型的造模方法。

背景技術

腦性癱瘓，是指先天或圍生期由多種不同原因造成的中樞神經系統損害，以非進行性的運動障礙為主的一組疾病，主要表現為中樞性運動障礙、肌張力異常、姿勢及反射異常，并可同時伴有癲癇，智力低下，語言障礙，視覺及聽覺障礙等合并癥。本病的發病率較高，國際上腦癱的發病率為1‰-5‰，我國腦癱患兒的發病率為1.8‰-4‰，腦癱的臨床表現多種多樣，根據運動功能障礙的范圍和性質可分為痙攣性、手足徐動型、強直型、共濟失調型、震顫型、肌張力低下型和混合型，多采用大鼠幼鼠缺血缺氧方法復制腦癱疾病，這種動物疾病模型主要用于實驗生理學、實驗病理學和實驗治療學(包括新藥篩選)研究。腦癱的發生發展十分復雜，以人本身作為實驗對象來深入探討腦癱的發生機制，推動醫藥學的發展來之緩慢，臨床積累的經驗不僅在時間和空間上都存在局限性，而且許多實驗在道義上和方法上也受到限制。而借助于動物模型的間接研究，可以有意地改變那些在自然條件下不可能或不易排除的因素，以便更準確地觀察模型的實驗結果并與腦癱進行比較研究，有助于有效地認識腦癱的發生發展規律及研究防治措施。但大鼠幼鼠缺血缺氧的腦癱模型僅能復制出部分和人相似的臨床表現，更無法復制出腦癱相關的合并癥，如癲癇。癲癇發作不僅可引起腦部神經元的壞死或病理性凋亡及神經生物改變，而且，還常常引起患者及家屬嚴重的心理障礙。癲癇患者經常具有羞恥感、不合群、活動受限，保護過度或孤獨感是臨床上最為常見的社會心理問題。

腦癱患兒主要為運動功能的損害，部分患兒也存在認知功能障礙，腦癱患兒易繼發癲癇的發生，癲癇的發生會進一步加重腦部的損傷和認知功能障礙的惡化，而腦癱患兒繼發癲癇的類型并沒有統一的說法，在查閱資料的過程中發現，部分性發作及全身強直陣攣發作均占很高的比例(50％)。目前還沒有相關合并癲癇的腦癱動物模型供于使用，故對進一步了解具有合并癲癇的腦癱疾病的發生發展過程以及防治治療方法均非常不利。

發明內容

鑒于上述現有技術中存在的問題，本發明提供一種新的既有顳葉癲癇又有腦癱的動物模型。本發明能夠在現代生物醫學研究中得到廣泛應用，有助于有效地認識人類疾病的發生、發展規律和研究防治措施。

本發明的技術方案如下：

本發明的一方面，提供一種在腦癱基礎上的顳葉癲癇動物模型的建立方法，包括以下步驟：

(1)將幼齡動物進行單側頸總動脈結扎術后，進行缺氧2h～3.5h，獲得存活的第一動物；

(2)將第一動物送回母鼠身邊，飼養3w～5w，獲得存活的第二動物；

(3)第二動物的腹腔內注射匹羅卡品誘發出Racine標準四級及四級以上癲癇，獲得存活的第三動物；

(4)對于連續發作1h～1.5h的Racine標準四級及四級以上癲癇的第三動物，終止癲癇發作，得到腦癱基礎上的顳葉癲癇動物模型。

在上述技術方案中，所述第一動物為缺血缺氧腦癱動物模型，即，先進行缺血手術，再進行缺氧操作而獲得。所述缺血手術可采用本領域常規手段，優選地，可采用單側頸總動脈結扎術，單側頸總動脈結扎后將動物放入37℃保溫箱中休息1～3h，再進行缺氧操作，缺氧時間優選為2～3.5小時，更優選為2h。