[發明專利]一種經酸解或酶解預處理的谷氨酰胺轉胺酶發酵培養基及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201910696116.6
• 申請日: 2019-07-30
• 公開（公告）號: CN110452890A
• 公開（公告）日: 2019-11-15
• 發明（設計）人: 步國建;張玉如;甘李;寇雪蕊;和超楠;劉艷;賀曉潔
• 申請（專利權）人: 泰興市東圣生物科技有限公司;江蘇東圣食品科技有限公司
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10;C12N1/20;C12R1/465
• 代理公司: 31257 上海麥其知識產權代理事務所(普通合伙)
• 代理人: 董紅曼<國際申請>=<國際公布>=<進入

本發明公開了一種經酸解或酶解預處理的谷氨酰胺轉胺酶發酵培養基及其制備方法和應用。本發明對培養基中的魚粉成分分別進行酸法水解、酶法水解，使得其中的營養成分能夠為產谷氨酰胺轉胺酶菌株所利用，提高產谷氨酰胺轉胺酶菌株對營養成分的利用率，進而提高產酶效率。本發明方法操作簡便、高效、費用低廉、極易在工業生產中運用。

技術領域

本發明涉及微生物發酵和酶工程領域，涉及一種經酸解或酶解預處理的谷氨酰胺轉胺酶發酵培養基及其制備方法和應用。

背景技術

谷氨酰胺轉胺酶，是一種催化酰基轉移反應的轉移酶，它能夠促使蛋白質分子內交聯，蛋白質分子間交聯以及蛋白質和氨基酸之間的交聯，可以在很大程度上改善蛋白質的功能性質，提高蛋白質的營養價值，在食品加工業中有著廣泛的應用。因此，生產谷氨酰胺轉胺酶具有巨大的市場需求和應用開發價值。

谷氨酰胺轉胺酶最早在豚鼠肝臟中首次發現，1989年首次從茂源鏈霉菌中分離得到，1997年實現規模化生產，2001年正式列為我國食品添加劑。谷氨酰胺轉胺酶廣泛存于自然界中，按來源可以將它分成三類：動物來源的谷氨酰胺轉胺酶，植物來源的谷氨酰胺轉胺酶和微生物來源的谷胺酰胺轉胺酶。由于動植物來源的谷氨酰胺轉胺酶來源少且成本昂貴，而微生物具有繁殖速度快、產酶量高等特點，目前生產的谷氨酰胺轉胺酶主要通過微生物發酵獲得。

鏈霉菌屬產谷氨酰胺轉胺酶的菌株，具有產量相對較高、對營養條件要求相對較為簡單的優點，適合在工業中大規模應用。但是，因其在現有發酵培養基上產酶量相對較低，所以需要采用一定的方式對其培養基其中的成分進行優化，進而提高其在該培養基上的產量。

發明內容

本發明克服了現有技術中的谷氨酰胺轉胺酶發酵培養基中魚粉的利用率低、發酵產酶的效率不高等問題。本發明對其中魚粉成分分別進行酸法水解、酶法水解的預處理，從而使其中的營養成分能夠為產谷氨酰胺轉胺酶菌株所利用，提高產谷氨酰胺轉胺酶菌株對營養成分的利用率，進而提高產酶效率。本發明所要解決的技術問題是提供一種魚粉水解工藝在谷氨酰胺轉胺酶發酵培養基中的應用，其具有能提高谷氨酰胺轉胺酶發酵培養基中魚粉的利用率，提高發酵產酶的效率。

本發明提供了一種谷氨酰胺轉胺酶發酵培養基的配方，所述培養基包括以下重量配比的原料組成成分：可溶性淀粉20份、硝酸鉀1份、七水合硫酸鎂0.5份、三水合磷酸氫二鉀0.5份、氯化鈉0.5份、七水合硫酸亞鐵0.01份、瓊脂20份、純水957.49份、pH調至7.2-7.4。

本發明還提供了一種谷氨酰胺轉胺酶發酵培養基的配方，所述培養基包括以下重量配比的原料組成成分：甘油20份、酵母成分6份、經酸解預處理的魚粉25份、七水合硫酸鎂2份、三水合磷酸氫二鉀2份、純水935份，pH調至7.4。

本發明還提供了一種谷氨酰胺轉胺酶發酵培養基的配方，所述培養基包括以下重量配比的原料組成成分：甘油20份、酵母成分6份、經酶解預處理的魚粉：25份；七水合硫酸鎂2份、三水合磷酸氫二鉀2份、產谷氨酰胺轉胺酶菌株的發酵促進劑10份、純水935份，pH調至7.4。

進一步地，上述魚粉的來源為一種或多種魚類，是經去油、脫水、粉碎加工后成為的一種高蛋白飼料，相對于國藥的魚粉蛋白胨，它相對于節省成本。

進一步地，上述培養基所適用的菌株包括鏈霉菌屬產谷氨酰胺轉胺酶的菌株。

進一步地，上述菌株所產谷氨酰胺轉胺酶的分子量為36-38kDa。

本發明還提供了一種制備谷氨酰胺轉胺酶發酵培養基的制備方法，所述制備方法為：先將原料魚粉進行酸解預處理，然后按比例添加2％甘油、0.3％酵母成分、2.5％經酸解預處理的魚粉、0.2％七水合硫酸鎂、0.2％三水合磷酸氫二鉀、純水1L，磁力攪拌器攪拌混合，調節pH為7.2-7.4，121℃、20min滅菌后冷卻，得到所述谷氨酰胺轉胺酶培養基。

其中，所述酸解預處理的方法包括以下步驟：