[發(fā)明專利]一種乳源活性肽的制備方法及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910690064.1
• 申請(qǐng)日: 2019-07-29
• 公開（公告）號(hào): CN110551790B
• 公開（公告）日: 2021-09-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 盧建軍;姚靜宜;董信陽;馮杰;鄭有秀
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號(hào): C12P39/00
• 分類號(hào): C12P39/00;C12P21/06;C12P21/00;A23K50/30;A23K50/75;A23K50/60;A23K20/147;C12R1/225;C12R1/685
• 代理公司: 北京化育知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11833
• 代理人: 尹均利

本發(fā)明公開了一種乳源活性肽的制備方法及應(yīng)用,以大豆蛋白和酪蛋白為原料，通過酶解和微生物發(fā)酵相結(jié)合的方法獲得乳源活性肽產(chǎn)品。大豆蛋白按一定質(zhì)量比例添加蒸餾水，浸泡預(yù)處理，調(diào)整體系pH，添加酸性蛋白酶反應(yīng)。酪蛋白按一定比例添加蒸餾水，調(diào)整體系pH，添加胰蛋白酶反應(yīng)。然后大豆蛋白酶解液與酪蛋白酶解液混合，按照5％比例接種發(fā)酵，控制發(fā)酵pH在7.0左右，發(fā)酵溫度為40～50℃，發(fā)酵時(shí)間為100～120小時(shí)，發(fā)酵完成后，低溫干燥制成動(dòng)物用乳源活性肽。乳源活性肽對(duì)動(dòng)物消化道功能成熟與發(fā)育有重要的促進(jìn)作用，本發(fā)明的動(dòng)物用乳源活性肽，可顯著提高畜禽采食量和生長(zhǎng)性能，增強(qiáng)機(jī)體免疫能力和抗氧化能力。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于動(dòng)物飼料領(lǐng)域，具體涉及一種乳源活性肽的制備方法及應(yīng)用。

背景技術(shù)

動(dòng)物腸道不僅是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的場(chǎng)所，也是重要的免疫器官，維護(hù)正常的腸道機(jī)能對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育至關(guān)重要。動(dòng)物在營(yíng)養(yǎng)素缺乏、感染、應(yīng)激及病理等情況下，均可導(dǎo)致腸道結(jié)構(gòu)和功能損傷、細(xì)菌和內(nèi)毒素移位以及腸道黏膜屏障功能障礙等，嚴(yán)重影響動(dòng)物健康和生產(chǎn)性能，給養(yǎng)殖生產(chǎn)帶來重大的經(jīng)濟(jì)損失。

目前，大豆蛋白或酪蛋白均只采用發(fā)酵或酶解的單一方法制備活性肽，其中酶解法生產(chǎn)的小肽苦味較重，適口性差；微生物發(fā)酵法生產(chǎn)的小肽，得率不高，且平均分子質(zhì)量較大，難以完全發(fā)揮潛在的生物學(xué)功能。通過酶解法和微生物發(fā)酵結(jié)合的方法生產(chǎn)活性肽，不僅可獲得適口性好，產(chǎn)率高的小肽，而且還可獲得更豐富的微生物代謝微量營(yíng)養(yǎng)養(yǎng)分。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供了一種乳源活性肽的制備方法和應(yīng)用，本發(fā)明的方案具體如下：

乳源活性肽的生產(chǎn)方法的制備方法如下：

取大豆蛋白，按大豆蛋白:水質(zhì)量比＝1:2-5的比例添加蒸餾水，85～95℃浸泡處理3～4小時(shí)，冷卻至40～50℃，用2mol/L HCl溶液調(diào)整體系pH至3.0-5.0，按每克原料的酶濃度為5000～6000U添加酸性蛋白酶，維持溫度在40～50℃，反應(yīng)10-15小時(shí)，制成大豆蛋白酶解液；

取酪蛋白，按酪蛋白:水質(zhì)量比＝1:5-10的比例添加蒸餾水，用2mol/L NaOH溶液調(diào)整體系pH至8.0-9.0，按每克大豆蛋白原料的酶濃度為1000～2000U添加胰蛋白酶，維持溫度在40～50℃左右，反應(yīng)2-5小時(shí)，制成酪蛋白酶解液；

然后大豆蛋白酶解液與酪蛋白酶解液以1:2-5體積混合備用；

按照麩皮4質(zhì)量份，豆粕粉1質(zhì)量份，硫酸銨4質(zhì)量份，磷酸氫二鉀0.3質(zhì)量份，氯化鈣0.5質(zhì)量份，蒸餾水125質(zhì)量份的比例配制發(fā)酵培養(yǎng)基，與混合酶解液等體積混合后115℃滅菌15min備用；

瑞士乳桿菌和黑曲霉分別使用MRS和查氏液體培養(yǎng)基進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，37℃條件下靜置培養(yǎng)24小時(shí)，按照5％-10％體積比例接種發(fā)酵，即菌液:(培養(yǎng)基+酶解物)＝5-10:100；控制發(fā)酵pH在7.0，發(fā)酵溫度為40～50℃，發(fā)酵時(shí)間為100～120小時(shí)；發(fā)酵完成后，低溫干燥制成動(dòng)物用乳源活性肽。

作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，所述大豆蛋白為粗蛋白質(zhì)量百分比含量≥46％的低溫豆粕制成的大豆蛋白粉；酪蛋白為牛乳源酪蛋白，粗蛋白質(zhì)量百分含量≥90％，白色至淡黃色粉末或顆粒。

作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，混合酶解液發(fā)酵完成后，低溫干燥的條件為真空度0.06-0.09MPa，β-環(huán)狀糊精為干燥助劑，混合酶解液濃縮時(shí)間為40-60min，濃縮溫度為40-55℃，干燥后的成品中肽分子量280～1000道爾頓的質(zhì)量百分比含量為40-60％。

本發(fā)明公開了一種采用所述方法制備得到的乳源活性肽。所述的乳源活性肽可以在制備動(dòng)物飼料或制備動(dòng)物飼料添加劑中進(jìn)行應(yīng)用。作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，對(duì)于乳仔豬、肉禽，每噸飼料添加300～500克所述乳源活性肽，對(duì)于中大豬，每噸飼料添加800～1000克所述乳源活性肽。