[發明專利]一種細梗薔薇愈傷組織培養基及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201910688737.X
• 申請日: 2019-07-29
• 公開（公告）號: CN112293249B
• 公開（公告）日: 2023-03-31
• 發明（設計）人: 李惠玲;章漳
• 申請（專利權）人: 伽藍（集團）股份有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 薛琦;倪麗紅

本發明公開了一種細梗薔薇愈傷組織培養基及其制備方法和應用。該細梗薔薇愈傷組織培養基包括防褐化培養基和增殖培養基，其中，細梗薔薇愈傷組織防褐化培養基中包括MS基礎培養基、植物激素和冰川水；細梗薔薇愈傷組織增殖培養基中包括基礎培養基和植物激素，所述基礎培養基為1/2MS基礎培養基、MS基礎培養基、WPM基礎培養基或B5基礎培養基；所述植物激素為α?NAA、6?BA、2,4?D和KT中的一種或多種。本發明的培養基能夠實現細梗薔薇(Rosa.gracififlora)愈傷組織的有效增殖，增殖能力強；能夠大大降低愈傷組織的褐化程度，具有安全無毒、周期短、繁殖快、操作簡單及成本低的特點。

技術領域

本發明涉及一種細梗薔薇愈傷組織培養基及其制備方法和應用。

背景技術

薔薇屬植物花色艷麗，種類繁多，不僅可以作為觀賞植物引種于園林中，而且作為藥用植物，其根、莖、葉和花皆可入藥。最近的研究表明，薔薇根或果實具有抗菌、抗炎、抗氧化等作用，可用于治療皮膚病、肝毒性、腎功能紊亂、腹瀉、炎癥性疾病、糖尿病、高血脂癥、肥胖癥和癌癥等多種疾病。

但是，由于薔薇的種子具有深度休眠特性，很難在當年萌發，使得園林引種困難。所以利用植物組織培養細胞技術，可以在人工可控的和重復的條件下培養大量的植物細胞或愈傷組織，可以為人類提供酶制劑、醫藥制品、添加劑等相關原料，不占用土地及資源，克服了由于植物本身發芽或地理環境、氣候、土壤等生長條件不同，造成的植物資源不能合理充分使用及藥材質量不一的缺點。

目前，為了培育得到愈傷組織，研究人員對培養基和培養方法進行了改造和創新，例如中國專利CN201611075162.7所報導的山葡萄愈傷組織的培養基，再例如中國專利CN201511022141.4所報導的野漆愈傷組織防褐化的方法。但是該些培養基均是基于不同植物生長特性所設計的培養基，并不適用于薔薇屬植物的愈傷組織培養。并且，現有的薔薇屬植物在愈傷組織的誘導及繼代培養時，存在不同程度的褐化問題，易導致愈傷組織的生長和分化受到抑制。雖然通過勤轉接、低溫弱光下短時間培養等培養條件控制，褐化現象可以有所減輕，但并不能有效控制褐化，目前還沒有找出其他更好的方法來有效地控制薔薇屬植物愈傷組織的褐化現象。

因此，如何利用植物組織培養細胞技術誘導獲得增殖能力強、褐化程度低的薔薇屬植物愈傷組織是本領域亟待解決的技術問題。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于克服現有技術中愈傷組織培養基不適用于薔薇屬植物愈傷組織的培養，難以獲得增殖能力強、褐化程度低的薔薇屬植物愈傷組織的缺陷，而提供了一種細梗薔薇愈傷組織培養基及其制備方法和應用。本發明的培養基能夠利用細梗薔薇(Rosa.gracififlora)的無菌幼苗的葉片誘導出愈傷組織細胞，能夠實現細梗薔薇(Rosa.gracififlora)愈傷組織的有效增殖，增殖能力強。本發明的防褐化培養基能夠大大降低愈傷組織的褐化程度，愈傷組織不褐化死亡，為不定芽的誘導以及次生代謝物質的產生提供基礎，具有安全無毒、周期短、繁殖快、操作簡單及成本低的特點。

本發明提供了一種細梗薔薇愈傷組織防褐化培養基，其包括下述組分：MS基礎培養基、植物激素和冰川水。

本發明中，所述細梗薔薇一般是指薔薇科薔薇屬植物細梗薔薇(Rosa.gracififlora)。

本發明中，所述MS基礎培養基可為本領域常規的MS基礎培養基，可市售獲得，也可自行配制，其具體配方如下表1所示。

表1

本發明中，所述植物激素可為本領域常規的植物激素，優選為α-NAA、6-BA、2,4-D和KT中的一種或多種，例如“α-NAA和6-BA”、“6-BA和2,4-D”、“2,4-D和KT”或2,4-D。

其中，所述α-NAA是指α-萘乙酸，為本領域常規的植物生長調節劑。