[發明專利]VEGF多腫瘤標記物的熒光免疫層析聯合檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201910680323.2
• 申請日: 2019-07-26
• 公開（公告）號: CN110412282A
• 公開（公告）日: 2019-11-05
• 發明（設計）人: 鄒檢平
• 申請（專利權）人: 北京健平金星生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;G01N33/53;G01N33/533;G01N33/543;G01N33/558;G01N33/58
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種VEGF多腫瘤標記物的熒光免疫層析聯合檢測試劑盒，其特征在于，包括盒體和用于扣合的上蓋，所述盒體內設有聯合檢測盤，所述聯合檢測盤為POCT熒光免疫層析試紙條，所述POCT熒光免疫層析試紙條包括底板、加樣區、樣品墊、結合墊、吸水墊、檢測線和質控線，所述結合墊與吸水墊之間為硝酸纖維素膜，質控線位于試劑條的末端。

2.根據權利要求1所述的一種VEGF多腫瘤標記物的熒光免疫層析聯合檢測試劑盒，其特征在于，所述硝酸纖維素膜上包被VEGF受體腫瘤標志物：PSA、AFP、CEA、CA199、CA125、CA153、CA50、CA724、CA242、NSE、CYFRA21-1等。

3.根據權利要求1所述的一種VEGF多腫瘤標記物的熒光免疫層析聯合檢測試劑盒，其特征在于，所述結合墊上噴涂有熒光微球標記抗體。

4.根據權利要求1所述的一種VEGF多腫瘤標記物的熒光免疫層析聯合檢測試劑盒，其特征在于，所述POCT熒光免疫層析試紙條所檢測蛋白抗原為VEGF PSA AFPCEA CA199CA125 CA153 CA50 CA724 CA242CYFRA21-1腫瘤標志物抗原。

5.根據權利要求3所述的一種VEGF多腫瘤標記物的熒光免疫層析聯合檢測試劑盒，其特征在于，所述熒光微球標記抗體分別為熒光微球標記的抗VEGF抗體，熒光微球標記PSA抗體，熒光微球標記AFP抗體，熒光微球標記CEA抗體，熒光微球標記CA199抗體，熒光微球標記CA125抗體，熒光微球標記CA153抗體，熒光微球標記CA50抗體，熒光微球標記CA724抗體。

6.根據權利要求2所述的一種VEGF多腫瘤標記物的熒光免疫層析聯合檢測試劑盒，其特征在于，所述硝酸纖維素膜上抗體的包被量為0.05～1.0μg，結合墊上熒光微球標記抗體的標記量為0.05～1.0μg。

7.根據權利要求3所述的一種VEGF多腫瘤標記物的熒光免疫層析聯合檢測試劑盒，其特征在于，所述結合墊上噴涂有熒光微球標記抗體細胞裂解液包含體積百分比為0.05％～2％的表面活性劑、5mM～1M緩沖液和0.5mM～10mM蛋白酶抑制劑及含校準品干粉。

8.根據權利要求7所述的一種VEGF多腫瘤標記物的熒光免疫層析聯合檢測試劑盒，其特征在于，所述校準品干粉為相應溶液濃度作為橫坐標熒光強度的比值作為縱坐標，采用擬合法得到標準曲線。

9.根據權利要求1-8所述的一種VEGF多腫瘤標記物的熒光免疫層析聯合檢測試劑盒，其特征在于，包括如下步驟：

S1:首先將細胞裂解液加入樣本采集管中，渦旋震蕩；

S2:將S1中震蕩液置于冰箱-20℃，靜置10min，之后置于37℃烘箱中烘烤1-5min；

S3:再次震蕩，離心處理，收集上清液；

S4:將試劑盒中的熒光免疫層析試紙條在室溫中恢復10-20min，于加樣區加樣；

S5:置于熒光檢測儀孵育倉，8-12min后，儀器自動檢測并讀取X線的熒光強度；

S6：根據實際測得熒光的值與濃度標準曲線，得到樣品中VEGF及其他腫瘤標志物蛋白濃度，再與標準取樣時樣本中VEGF及其它腫瘤標志物蛋白濃度對比，獲得修正系數，根據標準曲線計算得出最終的濃度結果。