[發明專利]一種土著氮轉化微生物富集培養的方法及其治理的應用

在審

• 申請號: 201910675304.0
• 申請日: 2019-07-25
• 公開（公告）號: CN110358685A
• 公開（公告）日: 2019-10-22
• 發明（設計）人: 劉菊梅;王濤;閆瑞強;沈渭壽;李彥林;司萬童;任艷霞;王瑜;劉爽爽;向雙雙
• 申請（專利權）人: 重慶文理學院;生態環境部南京環境科學研究所
• 主分類號: C12N1/02
• 分類號: C12N1/02;C12Q1/02;C12Q3/00;C02F3/34;C02F101/16
• 代理公司: 重慶市信立達專利代理事務所(普通合伙) 50230
• 代理人: 陳炳萍

1.一種土著氮轉化微生物富集培養的方法，其特征在于：具體包括以下步驟：

步驟一、底泥采集與分類：從需要治理河道的水體中分別對中部和兩側位置進行底泥采集，采集時需要采集表層的底泥、中層的底泥以及底層的底泥，表層的底泥采集的深度設置為3-5cm，采集量設置為50-70g，中層的底泥采集的深度為設置7-9cm，采集量為設置50-70g，底層的底泥采集的深度設置為11-13cm，采集量設置為50-70g，同時對河道底層的溫度進行檢測；

步驟二、底泥存儲：分別將步驟一中采集的底泥放入試管中，添加治理河道的水，之后放入到存放箱內部進行存儲，存放箱內部的溫度與河道底層溫度相同；

步驟三、培養物的測試：將步驟二中的各個試管中的底泥分被提取10-12g，水量提取20g中，分成四組進行試驗，對試驗的各個底泥和水中的氨氮含量進行檢測，將檢測數據存檔，之后將試驗的底泥和水放入到培養管中，添加微生物制劑制得一定量氮轉化微生物，然后將培養管放入到離心機內部進行混合處理；

步驟四、微生物環境控制：之后將試驗的試管放入到培養箱中，對培養箱內部的溫度和濕度進行環境控制，之后對試管內部的底泥和水進行二次氨氮檢測，將此次檢測數據與原始檢測數據進行對比，從而對不同環境下的氮轉化微生物對不同深度下和不同位置的底泥和水的氨氮轉化率；

步驟五、富集培養：之后分別提取試管內部的底泥，然后將其轉接到氮轉化微生物的富集培養基中，之后放入到離心機內部進行混合處理，同時對離心時的溫度進行有效控制，溫度控制為17-19℃，然后將培養物轉接到新鮮的富集培養基中，繼續放入到離心機內部進行混合處理，同時對離心時的溫度進行有效控制，溫度同樣控制為17-19℃，之后進行3-5次的轉接培養獲得轉化基體；

步驟六、提升培養量：將步驟五中的轉化基體放入到培養罐中，添加相應的營養鹽和微生物促生劑，對土著氮轉化微生物進行大規模的培養，通過調節培養罐內部的溫度、濕度、營養鹽濃度、氧氣濃度和微生物促生劑濃度，采用精細化處理，培養土著氮轉化微生物，之后對產生的二次污染進行處理，之后將培養出的土著氮轉化微生物投放到采集的治理河道河水中進行測試。

2.根據權利要求1所述的一種土著氮轉化微生物富集培養的方法，其特征在于：所述步驟一中對河道底層的溫度24小時的全天候監測，通過對河道的水流速度和內部的其他污染物進行有效的檢測，從而測試出該河道對氮轉化微生物的影響因素。

3.根據權利要求1所述的一種土著氮轉化微生物富集培養的方法，其特征在于：所述步驟二中添加治理河道的水，每個試管內部分別添加100g的河水。

4.根據權利要求1所述的一種土著氮轉化微生物富集培養的方法，其特征在于：所述步驟三中培養管放入到離心機內部進行混合處理的時間設置為15-18s。

5.根據權利要求1所述的一種土著氮轉化微生物富集培養的方法，其特征在于：所述步驟五中進行測試時，對不同溫度的河水進行氮轉化率檢測，從而檢測出在適應的投放時間。

6.使用權利要求1-5任意一項所述的土著氮轉化微生物富集培養得到的富集培物在氨氮治理中的應用，其特征在于：具體步驟如下：

步驟一、采集0.1g土著氮轉化微生物投放在治理河水的水中，之后增加水量，之后對氮含量進行檢測，從而測試出氮轉化率，繼而測試出適宜的投放比例；

步驟二、按照步驟一中的投放比例相應量的經過培養罐中大規模的培養的土著氮轉化微生物在經過檢測的適應的投放時間投放在需要治理的河道中即可。

7.根據權利要求6所述的一種土著氮轉化微生物富集培物在氨氮治理中的應用，其特征在于：所述步驟一中對氮含量進行檢測時，每添加50kg的水，檢測一次氮含量，從而檢測出土著氮轉化微生物的轉化率。