[發明專利]α1-抗胰蛋白酶免疫比濁法檢測試劑盒的制備方法

在審

• 申請號: 201910674010.6
• 申請日: 2019-07-25
• 公開（公告）號: CN112285356A
• 公開（公告）日: 2021-01-29
• 發明（設計）人: 袁嘉揚;杜微微
• 申請（專利權）人: 蘇州普瑞斯生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/531
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.α1-抗胰蛋白酶免疫比濁法檢測試劑盒的制備方法，其特征在于：包括如下制備步驟：

A：試劑R1的制備：

在配液罐中先加入部分純化水于磁力攪拌器上，調節攪拌子至中檔轉速，使溶液保持中速轉動狀態，邊攪拌邊投入濃度為1.6-4.8g/L的第一緩沖液A、濃度為8.75-24.31g/L的第一緩沖液B、濃度為8.0-20.0g/L的電解質、濃度為60-120g/L的高分子促進劑、濃度為0.8-2.0ml/L第一防腐劑，攪拌20-30分鐘至物料完全溶解、溶液清澈透明配液罐底部無沉淀后，調節pH值到7.00-9.50之間，繼續攪拌5-10分鐘至全部物料完全溶解，溶液清澈透明，配液罐底部無沉淀，定容至最終體積，

定容后的溶液存放在成品罐中，進行標識；

B：試劑R2的制備：

在配液罐中先加入部分純化水于磁力攪拌器上，打開磁力攪拌器電源開關，調節攪拌子至中檔轉速，使溶液保持中速轉動狀態，邊攪拌邊投入濃度為1.6-4.8g/L的第二緩沖液A，濃度為8.75-24.31g/L的第二緩沖液B，濃度為8.0-20.0g/L的氯化鈉，濃度為1-5g/L的穩定劑，濃度為0.8-2.0ml/L的第二防腐劑，攪拌20-30分鐘至物料完全溶解，溶液清澈透明配液罐底部無沉淀后，調節pH值到6.00-7.50之間，繼續攪拌5-10分鐘；

燒杯中以5-20g/L標準加入生物素于磁力攪拌器上，打開磁力攪拌器電源開關，調節攪拌子至中檔轉速，使溶液保持中速轉動狀態，邊攪拌邊加入15-40mg/L標準的α1-抗胰蛋白酶抗體，攪拌2-4h反應，反應結束后透析去除游離抗體，以5-20g/L標準加入鏈霉親和素反應2-4h，反應結束后透析去除未結合的生物素-抗體；

最后把鏈霉親和素-生物素-α1-抗胰蛋白酶抗體加入配液罐中，繼續攪拌20-30分鐘至溶液清澈透明，配液罐底部無沉淀，溶液存放在成品罐中，進行標識。

2.根據權利要求1所述的α1-抗胰蛋白酶免疫比濁法檢測試劑盒的制備方法，其特征在于：在試劑R1的制備中，第一緩沖液A和第一緩沖液B包括PBS緩沖液、HEPES緩沖液、MES緩沖液、Tris緩沖液、甘氨酸緩沖體系等中的一種或幾種的組合。

3.根據權利要求1所述的α1-抗胰蛋白酶免疫比濁法檢測試劑盒的制備方法，其特征在于：在試劑R1的制備中，電解質包括氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、硫酸鎂中一種或兩種以上的混合物。

4.根據權利要求1所述的α1-抗胰蛋白酶免疫比濁法檢測試劑盒的制備方法，其特征在于：在試劑R1的制備中，高分子促進劑包括聚乙二醇8000、聚乙二醇6000、聚乙二醇4000、聚乙二醇2000等中的一種。

5.根據權利要求1所述的α1-抗胰蛋白酶免疫比濁法檢測試劑盒的制備方法，其特征在于：在試劑R1的制備中，第一防腐劑包括疊氮鈉、Proclin-950、Proclin-300、硫柳汞等中的一種。

6.根據權利要求1所述的α1-抗胰蛋白酶免疫比濁法檢測試劑盒的制備方法，其特征在于：在試劑R2的制備中，第二緩沖液A和第二緩沖液B包括BPBS緩沖液、HEPES緩沖液、甘氨酸緩沖體系、MES緩沖液、MOPSO緩沖液、Tris緩沖液等中的一種或幾種。

7.根據權利要求1所述的α1-抗胰蛋白酶免疫比濁法檢測試劑盒的制備方法，其特征在于：在試劑R2的制備中，穩定劑包括牛血清白蛋白、酪蛋白、明膠、甘露醇中的一種或幾種。

8.根據權利要求1所述的α1-抗胰蛋白酶免疫比濁法檢測試劑盒的制備方法，其特征在于：在試劑R2的制備中，第二防腐劑包括疊氮鈉、Proclin-950、Proclin-300、硫柳汞等中的一種。

9.根據權利要求1所述的α1-抗胰蛋白酶免疫比濁法檢測試劑盒的制備方法，其特征在于：在試劑R2的制備中，生物素結合α1-抗胰蛋白酶抗體比例為1:1-4:1之間，鏈霉親和素結合生物素-α1-抗胰蛋白酶抗體比例為1:1-4:1之間。