[發(fā)明專利]一種檢測(cè)單核增生李斯特菌的試劑盒及其制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910673407.3
• 申請(qǐng)日: 2019-07-24
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110308274A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-10-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張樹(shù)文;黃翔;劉光明;孫孌燕
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京黎明生物制品有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/543
• 分類號(hào): G01N33/543;G01N33/569
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種用于檢測(cè)單核增生李斯特菌的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括包裝盒和容納于其中的試紙條，所述試紙條包括底板和依次搭接粘貼在所述底板上的樣品墊、標(biāo)記物墊、反應(yīng)墊、和吸水墊,所述標(biāo)記物墊上包被有用彩色乳膠顆粒標(biāo)記的抗體,所述反應(yīng)墊上設(shè)置有質(zhì)控區(qū)和測(cè)試區(qū)，所述質(zhì)控區(qū)包被有生物素，所述測(cè)試區(qū)包被有單核增生李斯特菌體蛋白抗體。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述用彩色乳膠顆粒標(biāo)記的抗體包括用藍(lán)色乳膠顆粒標(biāo)記的抗生物素抗體和用紅色乳膠顆粒標(biāo)記的抗單核增生李斯特菌菌體蛋白抗體。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述彩色乳膠顆粒為直徑為200-500nm或其間任意值的彩色聚苯乙烯乳膠顆粒。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述彩色乳膠顆粒為直徑為200、250、300、350、400、450或500nm的彩色聚苯乙烯乳膠顆粒。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述底板由聚氯乙烯制成。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述樣品墊由玻璃纖維制成。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述標(biāo)記物墊由聚酯膜制成。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述反應(yīng)墊由硝酸纖維素膜制成。

9.一種制備根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的試劑盒的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

步驟1）：用彩色乳膠顆粒標(biāo)記抗體：用0.01-0.5M PH6-8的PBS將所述彩色乳膠顆粒稀釋成0.5-5%的終濃度，加入所述抗體使其終濃度為0.1-0.5mg/ml；0-4℃反應(yīng)過(guò)夜；加入終濃度為0.5-5%的BSA封閉0.5-4h；離心，去上清，將沉淀用含0.1-1%BSA的0.01-0.5M PH6-8的PBS復(fù)溶，得到乳膠-抗體結(jié)合物，置于0-4℃?zhèn)溆茫?/p>

步驟2）：點(diǎn)膜：用0.01-0.5M PH6-8的PBS稀釋所述抗體，用點(diǎn)膜機(jī)將所得稀釋液點(diǎn)在硝酸纖維素膜上的測(cè)試區(qū)或質(zhì)控區(qū)，25-45℃烘干1-4小時(shí)，得到點(diǎn)好的膜，密封置于室溫備用；

步驟3）：點(diǎn)乳膠：用含0.1-0.5%BSA的0.01-0.1M PH6-8的PBS稀釋步驟1）中標(biāo)記好的所述乳膠-抗體結(jié)合物，用機(jī)器噴點(diǎn)在聚酯膜上，25-45℃烘干1-4小時(shí)，得到點(diǎn)好的乳膠，密封置于室溫備用；

步驟4）：組裝：將所述點(diǎn)好的膜、吸水墊、所述點(diǎn)好的乳膠和玻璃纖維分別按順序粘貼在PVC底板上，切成相應(yīng)寬度并包裝待用。