[發明專利]共組裝表位疫苗及其應用

有效

• 申請號: 201910669138.3
• 申請日: 2019-07-24
• 公開（公告）號: CN110339352B
• 公開（公告）日: 2022-03-01
• 發明（設計）人: 宋會娟;王偉偉;張闖年;黃平升;孔德領
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院生物醫學工程研究所
• 主分類號: A61K39/385
• 分類號: A61K39/385;A61K39/00;A61K39/395;A61P35/00;A61P37/02;C07K19/00
• 代理公司: 北京中理通專利代理事務所(普通合伙) 11633
• 代理人: 劉巖

本發明公開了一種自組裝、共組裝表位疫苗及其應用，通過共價鍵鍵合包括T細胞表位和B細胞表位的表位肽和小分子多肽載體，在水溶液中自組裝，調整濃度，通過多肽自組裝形成納米結構，再由鍵合不同表位肽的含有抗原表位的多肽序列在水溶液中的共組裝形成納米結構制備的表位疫苗以及其在制備/預防腫瘤中的應用，從而保護多肽，并改變表位多肽的存在形式，增強表位多肽被抗原提呈細胞的識別與攝取，提高免疫原性，最終提高表位疫苗的細胞免疫應答和腫瘤免疫治療效果。

技術領域

本發明屬于生物醫學工程領域，特別涉及自組裝表位疫苗及多表位共組裝多價疫苗和應用。

背景技術

表位疫苗相對傳統疫苗擁有較多優勢，其最大的優點就是可以克服傳統疫苗造成的毒力恢復或散毒帶來的安全性問題。另外表位疫苗本身無毒、穩定，符合未來疫苗發展的方向。

在各種分子中，用表達于腫瘤細胞表面的腫瘤抗原的細胞毒性T淋巴細胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位肽刺激機體，可以產生抗原特異性的CTL細胞，從而參與腫瘤免疫應答，其機理在于用CTL表位肽刺激機體后，可引起抗原特異性的CTL細胞的克隆增殖，而CD8⁺CTL是目前認為抗腫瘤免疫的主要效應細胞，其向胞外釋放穿孔素、細胞溶解素等物質或通過細胞表面的死亡受體(腫瘤壞死因子受體家族的成員，包括FAS)等溶解(即殺滅)靶細胞，同時亦可分泌IFN-γ等細胞因子間接殺傷腫瘤細胞，為殺傷腫瘤創造一個良好的微環境。

基于腫瘤抗原某表位的多肽疫苗已成為當今腫瘤免疫治療的重要研究領域。但這類疫苗在體內半衰期短，不易被抗原呈遞細胞(Antigen-presenting cells,APCs)攝取，且難以進入APC胞內I型主要組織相容性復合體(Major histocompatibility complex,MHCI)抗原呈遞途徑，故不能有效激發Th1、CTL保護性免疫應答，表現為弱免疫原性，不能滿足腫瘤免疫治療的要求。

為了增加CTL應答的強度，發揮抗腫瘤療效，就必須借助一定的載體才能發揮免疫作用。少量報道表明，將表位肽負載到納米載體(脂質體、聚合物納米粒)中或鍵合到其它分子上，可以保護多肽在機體內穩定存在而免被降解，并幫助多肽分子被抗原呈遞細胞識別，從而增強細胞或體液免疫反應。

多表位疫苗(Multi-epitope vaccine)是指同時攜帶多個目標抗原相關以及輔助性T細胞表位的疫苗。與傳統疫苗相比，多表位疫苗有很多優勢：多表位疫苗能被多種遺傳背景的MHC分子識別、結合，從而得到高效的遞呈；在細胞免疫方面具有獨特的優勢；可以有效地應對病原微生物的變異和免疫反應中的諸多不利因素。

發明內容

本發明通過提供一種新的表位疫苗，可以與抗腫瘤治療中有效的另外一種或幾種藥物聯合使用，表現出治療的協同作用，顯著提高生存率和治愈率。

本發明一種共組裝表位疫苗,由鍵合不同表位肽的含有抗原表位的多肽序列在水溶液中的共組裝體，所述含有抗原表位的多肽序列為包括T細胞表位和B細胞表位的表位肽以共價鍵與小分子多肽載體連接。

進一步，包括T細胞表位和B細胞表位的表位肽通過酰胺鍵、氨基酸序列或二硫鍵作為連接基團以共價鍵與小分子多肽載體連接。

進一步，所述不同表位肽的含有抗原表位的多肽序列摩爾比為1:1。

進一步，共組裝表位疫苗為納米溶液或水凝膠。

本發明另一種解決方式是提供一種自組裝表位疫苗由包括T細胞表位和B細胞表位的表位肽以共價鍵與小分子多肽載體連接形成的含有抗原表位的多肽序列在水溶液中的自組裝體，所述自組裝表位疫苗的形態為納米溶液或水凝膠。

進一步，包括T細胞表位和B細胞表位的表位肽通過酰胺鍵、氨基酸序列或二硫鍵作為連接基團以共價鍵與小分子多肽載體連接。

進一步，包括T細胞表位和B細胞表位的表位肽與小分子多肽載體的摩爾比為1～3：1。