[發(fā)明專利]一種提高國蘭根狀莖增殖和分化效率的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910656999.8
• 申請日: 2019-07-19
• 公開（公告）號: CN110338059B
• 公開（公告）日: 2021-05-04
• 發(fā)明（設計）人: 曾瑞珍;徐禮譜;李娟;李曉紅;郭和蓉;謝利;張志勝
• 申請（專利權(quán)）人: 華南農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 陳娟

1.一種提高國蘭根狀莖增殖和分化效率的方法，其特征在于，包括如下步驟：

將根狀莖接種至培養(yǎng)基上，培養(yǎng)，即可；所述根狀莖為無污染、活力高的根狀莖；所述根狀莖的長度為0.8～1.2cm；所述根狀莖用于增殖培養(yǎng)時切除頂端；所述根狀莖用于分化培養(yǎng)時保留頂端；

所述培養(yǎng)基為增殖培養(yǎng)基或分化培養(yǎng)基；所述增殖培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基，所述增殖培養(yǎng)基中還添加有6-BA 1.0～2.0mg·L^-1，NAA 0.2～0.5mg·L^-1，AC 0.3～0.5g·L^-1，蔗糖30g·L^-1，卡拉膠7.0～8.0g·L^-1，硫酸銅2～4mg·L^-1；所述分化培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基，所述分化培養(yǎng)基中還添加有6-BA 1.5～3.0mg·L^-1，NAA 0.1～0.5mg·L^-1，蔗糖30.0g·L^-1，AC 0～0.05g·L^-1，卡拉膠7.0～8.0g·L^-1，硫酸銅4～6mg·L^-1。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述培養(yǎng)基在接種前進行滅菌操作。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法，其特征在于，所述滅菌操作的過程如下：將培養(yǎng)基于120～125℃下滅菌20～30分鐘。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述增殖培養(yǎng)基中6-BA的添加量為1.0mg·L^-1，NAA的添加量為0.5mg·L^-1，AC的添加量為0.5g·L^-1，蔗糖的添加量為30.0g·L^-1，卡拉膠的添加量為7.0g·L^-1，pH為5.8±0.2；所述分化培養(yǎng)基中6-BA的添加量為1.5mg·L^-1，NAA的添加量為0.5mg·L^-1，蔗糖的添加量為30.0g·L^-1，AC的添加量為0.05g·L^-1，卡拉膠的添加量為7.0g·L^-1，pH為5.8±0.2。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述增殖培養(yǎng)基或分化培養(yǎng)基通過如下過程制備得到：吸取MS培養(yǎng)基的大量元素、微量元素、鐵鹽、維生素以及6-BA、NAA和硫酸銅母液放入燒杯中待用；將卡拉膠用水煮熔，加入蔗糖、母液和AC后定容，調(diào)節(jié)pH即得。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述根狀莖的接種量為8～15條或8～15塊。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其特征在于，所述培養(yǎng)的條件為在熒光燈照射下培養(yǎng)50～60d，培養(yǎng)溫度為24～27℃，光照強度為900～2100lx，光照時間為11～13h·d^-1。