[發(fā)明專利]一種表達抗原識別區(qū)域的通用型細(xì)胞治療產(chǎn)品及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910654336.2
• 申請日: 2019-07-19
• 公開（公告）號: CN110331134B
• 公開（公告）日: 2023-09-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉晗;李丹;王睿恒;許瓊予;謝樹峰
• 申請（專利權(quán)）人: 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N15/867;A61K39/00;A61P35/02
• 代理公司: 上海卓陽知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31262
• 代理人: 巫蓓麗

本發(fā)明涉及一種表達抗原識別區(qū)域的通用型細(xì)胞治療產(chǎn)品及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明在不具有HLA限制的通用細(xì)胞上攜帶針對腫瘤細(xì)胞抗原的抗原識別區(qū)域，治療后該抗原被降解，腫瘤細(xì)胞發(fā)生一系列改變，直至死亡，進而起到治療作用。本發(fā)明提供了一種治療腫瘤的新策略，有望替代個體化CART，顯著降低CART細(xì)胞制備成本的同時，達到治療腫瘤的目的，又不會產(chǎn)生細(xì)胞因子風(fēng)暴和神經(jīng)毒性，降低CART治療的門檻，造福更多的患者。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，涉及一種表達抗原識別區(qū)域的通用型細(xì)胞治療產(chǎn)品及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

嵌合抗原受體T細(xì)胞(Chimeric?Antigen?Receptor?T?cells，CART)是通過基因修飾的手段，使能夠特異性識別靶抗原的單克隆抗體的單鏈可變區(qū)(scFv)表達在T細(xì)胞表面，同時scFv通過跨膜區(qū)與人工設(shè)計的T細(xì)胞胞內(nèi)的活化增殖信號閾相耦連。因此，單克隆抗體對靶抗原的特異性識別與T細(xì)胞的功能相結(jié)合，產(chǎn)生特異性的殺傷作用，且CART能夠以非MHC限制性的方式殺傷靶細(xì)胞。B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)的腫瘤細(xì)胞表面穩(wěn)定表達CD19分子，這就為免疫治療提供了靶點。近年來，應(yīng)用靶向CD19的嵌合抗原受體重組T細(xì)胞治療B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病(B-ALL)獲得了重大進展，在臨床上取得了顛覆性治療效果。然而，CART的制備耗時較長，花費巨大。需要采集病人自體T細(xì)胞，在體外進行擴增，但白血病病人一般需多次化療，因此T細(xì)胞數(shù)量少，質(zhì)量差，甚至一些長期化療病人的T細(xì)胞無法實現(xiàn)體外擴增。這就為CART的廣泛應(yīng)用設(shè)置了阻礙。此外，CART推廣應(yīng)用過程中還面臨一項巨大挑戰(zhàn)，即細(xì)胞因子釋放綜合癥(CRS)，也稱細(xì)胞因子風(fēng)暴。患者接受治療后，在CAR分子的共刺激信號的作用下，T細(xì)胞大量擴增，并釋放大量細(xì)胞因子，這些炎癥介質(zhì)引起炎性反應(yīng)致組織損傷，甚至引起死亡。患者甚至?xí)霈F(xiàn)高熱，低血壓，心動過速，心功能不全，肝衰竭等危及生命的癥狀。神經(jīng)毒性也是CART治療過程中的另一大安全隱患。CART治療后引發(fā)的神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，如：神經(jīng)錯亂，表達性失語，肌痙攣，癲癇發(fā)作等，被認(rèn)為和細(xì)胞因子水平急劇增高有關(guān)。

CART治療腫瘤的原理是利用嵌合抗原受體T細(xì)胞特異性識別腫瘤相關(guān)抗原靶點，經(jīng)信號傳遞至胞內(nèi)引起T細(xì)胞激活和增殖以有效殺傷腫瘤細(xì)胞。雖然T細(xì)胞在CART療法中發(fā)揮關(guān)鍵作用，但也正是限制CART廣泛應(yīng)用和引發(fā)諸多不良反應(yīng)的原因所在。

目前還未見針對白血病的表達抗原識別區(qū)域的通用型細(xì)胞治療產(chǎn)品。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供針對白血病的表達抗原識別區(qū)域的通用型細(xì)胞治療產(chǎn)品。

第一方面，本發(fā)明提供了一種表達抗原識別區(qū)域的細(xì)胞，所述表達抗原識別區(qū)域的細(xì)胞是以淋巴細(xì)胞、髓系細(xì)胞或間充質(zhì)干細(xì)胞為本體細(xì)胞，在所述本體細(xì)胞的表面表達能夠特異性識別白血病細(xì)胞表面抗原的抗體，且不表達免疫細(xì)胞的共刺激信號。

作為一種優(yōu)選的實施方案，所述白血病選自急性淋巴性白血病、慢性淋巴性白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、多毛細(xì)胞性白血病、T細(xì)胞淋巴細(xì)胞白血病、大顆粒淋巴細(xì)胞性白血病和成人T細(xì)胞白血病。

作為另一優(yōu)選的實施方案，所述白血病細(xì)胞表面抗原為CD抗原。

作為另一優(yōu)選的實施方案，所述CD抗原選自CD19、CD20、CD33、CD52、CD45、CD22、CD25、CD7、CD2、CD3、CD79A、CD79B、CD133和CD13。

作為另一優(yōu)選的實施方案，所述抗體選自scFV、Fab、VHH和單克隆抗體。

作為另一優(yōu)選的實施方案，所述表達抗原識別區(qū)域的細(xì)胞其制備方法為：構(gòu)建表達所述抗體的重組表達載體，然后將所述重組表達載體導(dǎo)入所述本體細(xì)胞。

作為另一優(yōu)選的實施方案，表達所述抗體的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：3所示。