[發(fā)明專利]一種用于化學(xué)發(fā)光檢測的微球組合物及其應(yīng)用

在審

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• 申請日: 2019-07-18
• 公開（公告）號: CN110736737A
• 公開（公告）日: 2020-01-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊陽;趙衛(wèi)國;劉宇卉;李臨
• 申請（專利權(quán)）人: 博陽生物科技(上海)有限公司;科美診斷技術(shù)股份有限公司
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N21/01
• 代理公司: 11372 北京聿宏知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 劉建軍;吳大建

本發(fā)明涉及化學(xué)發(fā)光技術(shù)領(lǐng)域的一種用于化學(xué)發(fā)光檢測的微球組合物及其應(yīng)用。該微球組合物，其包括各自供體微球，其能夠在激發(fā)狀態(tài)產(chǎn)生活性氧，所述供體微球表面包被有標(biāo)記物；和，受體微球，其能夠與活性氧反應(yīng)生成可檢測的化學(xué)發(fā)光信號，所述受體微球表面包被有生物分子，所述生物分子能夠與待測目標(biāo)分子特異性結(jié)合；其中，所述供體微球的粒徑等于所述受體微球的粒徑。本發(fā)明所述微球組合物通過控制發(fā)光微球和感光微球的基質(zhì)及其粒徑，使得將所述發(fā)光微球組合物用于免疫分析檢測時，提高了檢測的發(fā)光效率，具有很好的檢測靈敏度。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于化學(xué)發(fā)光技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用于化學(xué)發(fā)光檢測的微球組合物及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

迄今為止，生物體內(nèi)微量生物活性物質(zhì)的、測定方法已經(jīng)歷了由放射免疫、分析(RIA)、熒光免疫分析(FIA)、酶聯(lián)免疫分析(EIA)以及化學(xué)發(fā)光分析等諸階段。這一衍變過程主要是基于對檢測方法的敏感性、準(zhǔn)確性、以及操作簡捷性需求的不斷提高而決定的。

化學(xué)發(fā)光分析法是一種利用化學(xué)發(fā)光物質(zhì)發(fā)射的光波進(jìn)行檢測的方法。化學(xué)發(fā)光物質(zhì)作為標(biāo)記應(yīng)用于核酸檢測與免疫檢測中。例如，可通過多種途徑將特異結(jié)合對中的某一分子與發(fā)光物質(zhì)結(jié)合形成發(fā)光復(fù)合物。該復(fù)合物可與樣品中被檢測物(特異結(jié)合對中的另一分子)反應(yīng)，分配于固相與液相中，且分配比例與檢測物的量相關(guān)。通過測定固相或液相中發(fā)光量，即可得出樣品中檢測物的相應(yīng)濃度。

化學(xué)發(fā)光分析中供體微球和受體微球的發(fā)光效率決定了化學(xué)發(fā)光分析法的檢測靈敏度。為了提高供體微球和/或受體微球的發(fā)光效率，本領(lǐng)域一般采用提高供體微球中染料的感光效率和/或受體微球中發(fā)光化合物的接受光的效率和發(fā)光效率的方法。

雖然采用本領(lǐng)域所述方法可在一定程度上提高化學(xué)發(fā)光檢測法的檢測靈敏度，但是檢測量程或線性范圍卻較窄。因此，目前需要開發(fā)一種不僅具有較高的靈敏度，而且檢測量程又較寬的方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足提供一種用于化學(xué)發(fā)光檢測的微球組合物，將該組合物用于化學(xué)發(fā)光檢測時不僅具有較高的靈敏度，而且具有較寬的檢測量程。

為此本發(fā)明第一方面提供了一種用于化學(xué)發(fā)光檢測的微球組合物，其包括：

供體微球，其能夠在激發(fā)狀態(tài)產(chǎn)生活性氧，所述供體微球表面包被有標(biāo)記物；和，

受體微球，其能夠與活性氧反應(yīng)生成可檢測的化學(xué)發(fā)光信號，所述受體微球表面包被有生物分子，所述生物分子能夠與待測目標(biāo)分子特異性結(jié)合；

其中，所述供體微球的粒徑等于所述受體微球的粒徑。

在本發(fā)明的一些實施方式中，所述供體微球與受體微球的平均粒徑均為20nm-350nm，優(yōu)選為50nm-300nm，更優(yōu)選為100nm-250nm，最優(yōu)選為180nm-220nm。

在本發(fā)明的一些實施方式中，所述供體微球包括第一載體，所述第一載體的內(nèi)部填充有敏化劑，所述第一載體的表面化學(xué)鍵合標(biāo)記物。

在本發(fā)明的另一些實施方式中，所述第一載體的表面沒有包被或連接有多糖物質(zhì)，其直接化學(xué)鍵合標(biāo)記物。

在本發(fā)明的一些實施方式中，所述標(biāo)記物為親和素。

在本發(fā)明的另一些實施方式中，所述親和素選自卵白親和素、鏈霉親和素、卵黃親和素、中性親和素和類親和素，優(yōu)選選自中性親和素或鏈霉親和素。

在本發(fā)明的一些實施方式中，所述親和素通過氨基與所述第一載體表面的醛基反應(yīng)形成席夫堿的方式化學(xué)鍵合在所述第一載體的表面。

在本發(fā)明的另一些實施方式中，所述第一載體的表面帶有鍵合官能團(tuán)，所述鍵合官能團(tuán)用于將標(biāo)記物化學(xué)鍵合在所述第一載體的表面。