[發明專利]一種促進白及懸浮培養細胞中次生代謝產物合成的方法有效
| 申請號: | 201910631140.1 | 申請日: | 2019-07-12 |
| 公開(公告)號: | CN110283775B | 公開(公告)日: | 2021-03-19 |
| 發明(設計)人: | 徐德林;潘胤池;肖世基;李林;聞偉鍔;上官艷妮;劉厚伯;黃惻隱;李夢竹 | 申請(專利權)人: | 遵義醫科大學 |
| 主分類號: | C12N5/04 | 分類號: | C12N5/04;C12N5/02 |
| 代理公司: | 重慶強大凱創專利代理事務所(普通合伙) 50217 | 代理人: | 向林 |
| 地址: | 563000 貴*** | 國省代碼: | 貴州;52 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 促進 白及 懸浮 培養 細胞 次生 代謝 產物 合成 方法 | ||
1.一種促進白及懸浮培養細胞中次生代謝產物合成的方法,精確稱取白及愈傷組織,將其加入到MS+1.0mg/L6-BA+3.0mg/L2,4-D的液體培養基中,再向培養基中加入蔗糖進行懸浮培養;其特征在于:
所述液體培養基的pH值為5.85~6.05,液體培養基的體積為21.74~40.13mL,白及愈傷組織的添加量為0.82~1.40g,液體培養基中蔗糖的濃度為28.77~38.32g/L,培養溫度為20℃~25℃,培養環境為暗培養,懸浮培養的時間為30~40d。
2.根據權利要求1所述的促進白及懸浮培養細胞中次生代謝產物合成的方法,其特征在于:所述白及愈傷組織為白及種子于MS+1.0mg/L6-BA+3.0mg/L2,4-D+30.0g/L蔗糖的誘導培養基上誘導培養25~35d后,再于MS+0.1mg/L6-BA+2.0mg/L2,4-D+30.0g/L蔗糖的繼代培養基上繼代培養2代20~40d所獲得的疏松愈傷組織。
3.根據權利要求1或2所述的促進白及懸浮培養細胞中次生代謝產物合成的方法,其特征在于:所述懸浮培養的時間為35d。
4.根據權利要求3所述的促進白及懸浮培養細胞中次生代謝產物合成的方法,其特征在于:所述液體培養基的體積為21.74mL,白及愈傷組織的添加量為0.92g,液體培養基中蔗糖的濃度為28.77g/L。
5.根據權利要求3所述的促進白及懸浮培養細胞中次生代謝產物合成的方法,其特征在于:所述液體培養基體積為40.13mL、白及愈傷組織的添加量為0.82g、液體培養基中蔗糖的濃度為30.73g/L。
6.根據權利要求3所述的促進白及懸浮培養細胞中次生代謝產物合成的方法,其特征在于:所述液體培養基體積為38.35mL、白及愈傷組織添的加量為1.40g、液體培養基中蔗糖的濃度為38.32g/L。
7.根據權利要求3所述的促進白及懸浮培養細胞中次生代謝產物合成的方法,其特征在于:所述液體培養基的體積為39.87mL、白及愈傷組織的添加量為1.19g、液體培養基中蔗糖的濃度為31.16g/L。
8.根據權利要求3所述的促進白及懸浮培養細胞中次生代謝產物合成的方法,其特征在于:所述液體培養基的體積為35.27mL、白及愈傷組織的添加量為1.05g、液體培養基中蔗糖的濃度為30.65g/L。
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