[發明專利]一種順鉑所致急性腎損傷的小鼠模型的構建方法

在審

• 申請號: 201910626056.0
• 申請日: 2019-07-11
• 公開（公告）號: CN110250110A
• 公開（公告）日: 2019-09-20
• 發明（設計）人: 曹長春;伍俊霞;萬辛;李汶汶
• 申請（專利權）人: 南京醫科大學附屬逸夫醫院
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027
• 代理公司: 南京業騰知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32321
• 代理人: 鄭婷

本發明涉及一種順鉑所致急性腎損傷的小鼠模型的構建方法，屬于動物模型技術領域。首先采用生理鹽水溶解順鉑，制備2mg/mL的順鉑溶液；選擇體重20±2g、12周齡的C57BL/6J小鼠作為建立小鼠模型的對象，將小鼠麻醉后，將順鉑溶液通過眶后靜脈注射到小鼠體內，5天后，即獲得順鉑所致急性腎損傷的小鼠模型。本發明采用經眶后靜脈注射順鉑成功構建了順鉑所致急性腎損傷模型，解決了現有技術中腹腔注射順鉑構建順鉑所致急性腎損傷模型中同時需要腹腔注射其他藥物造成吸收率降低的問題。

技術領域

本發明涉及一種順鉑所致急性腎損傷(cisplatin-induced-acute kidneyinjury,CDDP-AKI)的小鼠模型的構建方法，屬于動物模型技術領域。

背景技術

順鉑(cisplatin，CP)是一種廣泛應用于多種實體腫瘤的化療藥物，特別是頭頸部惡性腫瘤，膀胱癌，食管癌，宮頸癌及肺癌的化療。近年來CP還應用于“三陰性乳腺癌”的化療。然而CP作為化療藥在臨床上的使用常常會引起腎毒性，耳毒性，周圍神經病變，骨髓抑制等一系列副作用，其中以腎臟毒性最為常見，約三分之一的患者在接受單劑量(50-100mg/m²)CP化療后會出現急性腎損傷(acute kidney injury,AKI)，表現為進展性腎臟功能減退以腎小球濾過率降低，血清肌酐、尿素氮、血鉀及血鈉的升高為特征。在這些發生AKI的患者中50％的患者在經過治療后的15天血肌酐仍然維持在較高水平，因此CDDP-AKI是重要的臨床疾病模型。

現有技術中，CDDP-AKI的小鼠模型多采用腹腔注射順鉑來構建，但在聯合用藥的情況下，多種藥物同時腹腔注射則會存在藥物吸收率降低的問題。

發明內容

本發明的目的在于解決現有技術中CDDP-AKI的小鼠模型存在的不足，提供一種順鉑所致急性腎損傷的小鼠模型的構建方法，本發明首次采用眶后靜脈注射順鉑成功構建了CDDP-AKI的小鼠模型，解決了腹腔注射順鉑構建CDDP-AKI模型中同時需要腹腔注射其他藥物造成吸收率降低的難題。

技術方案

一種順鉑所致急性腎損傷的小鼠模型的構建方法，包括如下步驟：

(1)采用生理鹽水溶解順鉑，制備2mg/mL的順鉑溶液；

(2)選擇體重20±2g、12周齡的C57BL/6J小鼠作為建立小鼠模型的對象，將小鼠麻醉后，將順鉑溶液通過眶后靜脈注射到小鼠體內，5天后，即獲得順鉑所致急性腎損傷的小鼠模型。

進一步，步驟(1)中，順鉑溶液的制備方法：稱取50mg順鉑粉末于50mL離心管中，加入25mL生理鹽水溶解，2800r/min的轉速下渦旋震蕩5min以充分溶解，然后在搖床上以80r/min的轉速室溫搖晃30min，最后經0.22μm細菌過濾器過濾除菌，得到順鉑溶液。

進一步，步驟(2)中，小鼠的麻醉方法：采用小動物麻醉機，通過吸入異氟烷的方式進行麻醉。

進一步，步驟(2)中，順鉑溶液的注射量按小鼠體重計，為7.5μL/g。

進一步，步驟(2)中，在注射順鉑溶液前，將順鉑溶液預熱至37℃。

進一步，步驟(2)中，小鼠的飼養環境溫度24±2℃，濕度40％-60％，自由飲水和采食。

與現有技術相比，本發明的有益效果為：本發明采用經眶后靜脈注射順鉑成功構建了順鉑所致急性腎損傷模型，解決了現有技術中腹腔注射順鉑構建順鉑所致急性腎損傷模型中同時需要腹腔注射其他藥物造成吸收率降低的問題。

附圖說明

圖1為小鼠眶后靜脈注射的位置；

圖2為眶后靜脈注射法實驗組和對照組小鼠的血漿肌酐值；