[發(fā)明專利]檢測Tudor結(jié)構(gòu)域蛋白2表達(dá)水平的試劑的應(yīng)用和試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910625616.0
• 申請日: 2019-07-11
• 公開（公告）號: CN110358833B
• 公開（公告）日: 2021-10-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 杜欣娜;夏偉;莊瑩;李春明;胡明;張虎
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇醫(yī)藥職業(yè)學(xué)院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;G01N33/68;G01N33/574
• 代理公司: 北京思創(chuàng)大成知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11614
• 代理人: 高爽

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及檢測Tudor結(jié)構(gòu)域蛋白2表達(dá)水平的試劑的應(yīng)用和試劑盒。更具體地，涉及檢測TDRKH表達(dá)水平的試劑在制備用于乳腺癌輔助診斷和/或乳腺癌患者預(yù)后判斷的制劑中的應(yīng)用以及一種用于乳腺癌輔助診斷和/或乳腺癌患者預(yù)后判斷的試劑盒。臨床樣本檢測結(jié)果顯示，乳腺癌中TDRKH表達(dá)較癌旁組織顯著升高；且TDRKH高表達(dá)不利于乳腺癌患者總體生存。因此，檢測該基因表達(dá)變化的試劑可用于乳腺癌預(yù)后或者診斷、治療。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，更具體地，涉及檢測Tudor結(jié)構(gòu)域蛋白2(TDRKH)表達(dá)水平的試劑在制備用于乳腺癌輔助診斷和/或乳腺癌患者預(yù)后判斷的制劑中的應(yīng)用以及一種用于乳腺癌輔助診斷和/或乳腺癌患者預(yù)后判斷的試劑盒。

背景技術(shù)

乳腺癌是乳腺腺上皮組織異常分化的惡性病變，是女性最常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率和死亡率在女性癌癥中均排在首位。隨著研究的深入，在其診斷和治療方面已經(jīng)取得了令人矚目的進(jìn)步，不再被認(rèn)為是一種疾病，而是多種具有異質(zhì)性亞型的疾病。分子分型的提出使乳腺癌的個(gè)體化治療治療進(jìn)入分類治療時(shí)代，而預(yù)后分期的提出，使乳腺癌的個(gè)體化治療實(shí)現(xiàn)了由量到質(zhì)、由宏觀到微觀的轉(zhuǎn)變。隨著多組學(xué)高通量數(shù)據(jù)的快速增加，一些分子生物學(xué)標(biāo)志物被發(fā)現(xiàn)與乳腺癌發(fā)生和預(yù)后有關(guān)，這使得更準(zhǔn)確、有效地診療乳腺癌成為可能。目前臨床仍迫切需要開發(fā)新的乳腺癌治療靶標(biāo)和預(yù)后標(biāo)志物。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種新的乳腺癌預(yù)后標(biāo)志物Tudor結(jié)構(gòu)域蛋白2(TDRKH)，由此進(jìn)一步提供檢測TDRKH表達(dá)水平的試劑在制備用于乳腺癌輔助診斷和/或乳腺癌患者預(yù)后判斷的制劑中的應(yīng)用以及一種用于乳腺癌輔助診斷和/或乳腺癌患者預(yù)后判斷的試劑盒。

TDRKH，又名TDRD2，是一種蛋白編碼基因，定位于1q21.3，包含16個(gè)外顯子，GeneID:11022，其編碼蛋白質(zhì)主要定位于線粒體和細(xì)胞質(zhì)。目前，有關(guān)TDRKH基因在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用未見報(bào)道。本發(fā)明的發(fā)明人通過癌癥和腫瘤基因圖譜(Cancer GenomeAtlas，TCGA)高通量數(shù)據(jù)挖掘發(fā)現(xiàn)TDRKH高表達(dá)不利于乳腺癌患者預(yù)后，并通過收集臨床乳腺癌患者樣本和隨訪信息，進(jìn)一步驗(yàn)證TDRKH表達(dá)差異對乳腺癌患者的預(yù)后作用。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的第一方面提供檢測Tudor結(jié)構(gòu)域蛋白2(TDRKH)表達(dá)水平的試劑在制備用于乳腺癌輔助診斷和/或乳腺癌患者預(yù)后判斷的制劑中的應(yīng)用。

進(jìn)一步地，所述檢測TDRKH表達(dá)水平包括檢測TDRKH的基因表達(dá)水平和/或檢測TDRKH的蛋白表達(dá)水平。

更具體地，所述檢測TDRKH表達(dá)水平的方法包括：通過RT-qPCR方法檢測乳腺癌和癌旁組織中TDRKH的表達(dá)量；通過分子探針技術(shù)檢測乳腺癌和癌旁組織中TDRKH mRNA表達(dá)量；通過免疫組化或Western-Blot檢測乳腺癌和癌旁組織中TDRKH蛋白表達(dá)量。

更具體地，所述檢測TDRKH表達(dá)水平的試劑為靶向TDRKH編碼DNA序列的寡核酸探針、PCR引物，或者為靶向TDRKH的抗體。

根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選地，所述檢測TDRKH表達(dá)水平的試劑為具有SEQ ID NO：1和SEQID NO：2所示核苷酸序列的實(shí)時(shí)熒光定量PCR特異性引物。

5’-CGCAAACAGCCAATCAGTGT-3’，SEQ ID NO：1；

5’-CCTTTGGGTGGAGGAGTCAC-3’，SEQ ID NO：2。

本發(fā)明的第二方面提供一種用于乳腺癌輔助診斷和/或乳腺癌患者預(yù)后判斷的試劑盒，該試劑盒包括：檢測TDRKH表達(dá)水平的試劑。

進(jìn)一步地，所述檢測TDRKH表達(dá)水平的試劑為靶向TDRKH編碼DNA序列的寡核酸探針、PCR引物，或者為靶向TDRKH的抗體。