[發明專利]檢測PH結構域家族A成員6表達水平的試劑的應用和試劑盒

有效

• 申請號: 201910624986.2
• 申請日: 2019-07-11
• 公開（公告）號: CN110358832B
• 公開（公告）日: 2021-01-15
• 發明（設計）人: 孫海燕;夏偉;楊留才;胡明;李春明;張虎
• 申請（專利權）人: 江蘇醫藥職業學院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;G01N33/68;G01N33/574
• 代理公司: 北京思創大成知識產權代理有限公司 11614
• 代理人: 高爽

本發明屬于生物技術領域，涉及檢測PH結構域家族A成員6表達水平的試劑的應用和試劑盒。更具體地，涉及檢測PLEKHA6表達水平的試劑在制備用于乳腺癌輔助診斷和/或乳腺癌患者預后判斷的制劑中的應用以及一種用于乳腺癌輔助診斷和/或乳腺癌患者預后判斷的試劑盒。臨床樣本檢測結果顯示，乳腺癌中PLEKHA6表達較癌旁組織顯著升高；且PLEKHA6高表達不利于乳腺癌患者總體生存。因此，檢測該基因表達變化的試劑可用于乳腺癌預后或者診斷、治療。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，更具體地，涉及檢測PH結構域家族A成員6(PLEKHA6)表達水平的試劑在制備用于乳腺癌輔助診斷和/或乳腺癌患者預后判斷的制劑中的應用以及一種用于乳腺癌輔助診斷和/或乳腺癌患者預后判斷的試劑盒。

背景技術

乳腺癌是最為常見的婦科惡性腫瘤。全球腫瘤流行病統計數據顯示，2012年世界范圍內乳腺癌新發病例總數1677000例，是僅次于肺癌的第二高發腫瘤，也是女性發病率和死亡率最高的惡性腫瘤。我國乳腺癌發病率高達25.89/10萬，約占所有女性惡性腫瘤發病率的16.83％。而且，我國乳腺癌患病數和新診斷患者數在全世界的比例正在逐年增加，且呈現出發病年輕化趨勢，嚴重影響女性的身心健康、甚至危及生命。因此，乳腺癌發病機制和預后的研究對乳腺癌患者意義深遠。乳腺癌在細胞起源、組織學形態、疾病分級、臨床表現、治療反應以及轉移潛能等方面都表現出極大的復雜性與異質性，限制了乳腺癌預后標志物應用的廣泛性。因此，迫切需要開發更有針對性的乳腺癌預后標志物，以滿足臨床需求。

隨著多組學高通量數據的快速增加，一些分子生物學標志物被發現與乳腺癌發生和預后有關，這使得更準確、有效地診療乳腺癌成為可能。

發明內容

本發明的目的是提供一種新的乳腺癌預后標志物PH結構域家族A成員6(PLEKHA6)，由此進一步提供檢測PLEKHA6表達水平的試劑在制備用于乳腺癌輔助診斷和/或乳腺癌患者預后判斷的制劑中的應用以及一種用于乳腺癌輔助診斷和/或乳腺癌患者預后判斷的試劑盒。

PLEKHA6，又名PEPP3，是一種蛋白編碼基因，定位于1q32.1，包含36個外顯子，GeneID:22874，其編碼蛋白質主要定位于細胞質和細胞核。目前，有關PLEKHA6基因在乳腺癌發生發展中的作用未見報道。本發明的發明人通過癌癥和腫瘤基因圖譜(Cancer GenomeAtlas，TCGA)高通量數據挖掘發現PLEKHA6高表達不利于乳腺癌患者預后，并通過收集臨床乳腺癌患者樣本和隨訪信息，進一步驗證PLEKHA6表達差異對乳腺癌患者的預后作用。

為了實現上述目的，本發明的第一方面提供檢測PH結構域家族A成員6(PLEKHA6)表達水平的試劑在制備用于乳腺癌輔助診斷和/或乳腺癌患者預后判斷的制劑中的應用。

進一步地，所述檢測PLEKHA6表達水平包括檢測PLEKHA6的基因表達水平和/或檢測PLEKHA6的蛋白表達水平。

更具體地，所述檢測PLEKHA6表達水平的方法包括：通過RT-qPCR方法檢測乳腺癌和癌旁組織中PLEKHA6的表達量；通過分子探針技術檢測乳腺癌和癌旁組織中PLEKHA6mRNA表達量；通過免疫組化或Western-Blot檢測乳腺癌和癌旁組織中PLEKHA6蛋白表達量。

更具體地，所述檢測PLEKHA6表達水平的試劑為靶向PLEKHA6編碼DNA序列的寡核酸探針、PCR引物，或者為靶向PLEKHA6的抗體。

根據本發明，優選地，所述檢測PLEKHA6表達水平的試劑為具有SEQ ID NO：1和SEQID NO：2所示核苷酸序列的實時熒光定量PCR特異性引物。

5’-AGGCAAGAGGTAGAGGCAGA-3’，SEQ ID NO：1；

5’-GGAGAGTCCATTGGTGAGCC-3’，SEQ ID NO：2。