[發明專利]豬肉中食源性寄生蟲的多重PCR檢測引物組及試劑盒

有效

• 申請號: 201910622073.7
• 申請日: 2019-07-10
• 公開（公告）號: CN110452993B
• 公開（公告）日: 2022-12-27
• 發明（設計）人: 陳兆國;張燁華;米榮升;黃燕;龔海燕;韓先干;張曉麗;王旭
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院上海獸醫研究所（中國動物衛生與流行病學中心上海分中心）
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 上海段和段律師事務所 31334
• 代理人: 李佳俊;郭國中

本發明公開了一種豬肉中食源性寄生蟲的多重PCR檢測引物組及試劑盒；包括如SEQ ID NO.1/2所示的旋毛蟲檢測引物；如SEQ ID NO.3/4所示的剛地弓形蟲檢測引物；如SEQ ID NO.5/6所示的豬囊尾蚴檢測引物；如SEQ ID NO.7/8所示的歐猥裂頭蚴檢測引物。本發明建立了能同時檢測豬肉中豬囊尾蚴、旋毛蟲、剛地弓形蟲、歐猥裂頭蚴的多重PCR引物組、包括該引物組的多重PCR檢測試劑盒以及利用該引物組的多重PCR檢測方法，極大地提高了分子檢測的工作效率，而且方法的敏感性高、特異性強，適合于屠宰場、養殖場及出入境檢驗檢疫機構等使用。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種豬肉中食源性寄生蟲的多重PCR檢測引物組及試劑盒。

背景技術

豬肉是我國居民最喜歡的肉類食品，但我國生豬產品的質量和安全離人民群眾的期望仍有較大差距，食品安全事故頻發，其中，食源性寄生蟲是引發動物食品安全事件最主要的因素。寄生于豬肉中的食源性寄生蟲主要包括豬帶絳蟲(Taenia solium)的幼蟲——豬囊尾蚴(Cysticercus cellulosae)、旋毛蟲(Trichinella spiralis)、剛地弓形蟲(Toxoplasma gondii)、曼氏迭宮絳蟲(Spirometra mansoni)的幼蟲歐猥裂頭蚴(Spirometra erinaceieuropaei plerocercoid larvae)4種。

豬囊尾蚴寄生于豬的橫紋肌，以及腦、心臟、皮下、眼、淋巴結、肺等組織和器官，人吃生的或含未殺死囊尾蚴的豬肉，以及被豬帶絳蟲蟲卵污染的食物時造成感染。當寄生于人的腦部，其致殘、致死率相當高，輕者引起頭痛、頭暈、惡心、嘔吐，重者神經系統受損，癲癇頻繁發作，顱內壓升高，造成癡呆、失明等嚴重后遺癥，甚至危及生命；如寄生于眼部，可引起視力下降甚至失明；寄生于肌肉，引起局部肌肉疼痛。由于寄生部位特殊，治愈非常困難。豬自身感染豬囊尾蚴后，亦可造成巨大的經濟損失。2004年，全國第二次人體重要寄生蟲病現狀調查(簡稱“第二次全國寄生蟲調查”)結果顯示，我國共有29個省(區、市)存在其成蟲帶絳蟲的流行，約55萬人感染，感染率0.28％，較1988-1992年第一次調查上升52.5％，其中西藏、四川分別上升97.0％和98.0％。

豬的旋毛蟲感染遍布我國26個省(區、市)，部分地區感染率高達10％～34.2％，對養豬業危害巨大，被農業部列為二類動物疾病。人通過生食或半生食含蟲的肉類(主要是豬肉)而感染，其成蟲寄生于腸黏膜上皮細胞，新生幼蟲經血液循環移行后分布全身各處，尤其是骨骼肌細胞，且可長期寄生，終生帶蟲。感染初期，患者出現惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉、乏力、發熱畏寒癥狀；感染中期，表現常年肌肉酸痛和無力，持續性高熱、頭痛、頭暈、水腫、皮膚瘙癢等癥狀，嚴重者喪失勞動能力；后期持續肌肉疼痛、消瘦乏力、嚴重衰竭，重度感染者可造成嚴重的心肌炎、心力衰竭、肺水腫、尿毒癥及大腦損傷，導致死亡。全球約有1 100萬人感染。我國居民血清陽性率為3.38％；至少有15個省(區、市)的121個縣市報道存在病例；1964-2011年共暴發600余起，感染38 797例，死亡336例，95％因攝入攜帶旋毛蟲的豬肉引起；隱性感染由1995年的200萬人上升至4 000萬人。

剛地弓形蟲可感染包括人在內的200余種脊椎動物，我國豬的感染率為4.78％～85.7％，但多為隱性感染，缺乏明顯的臨床癥狀。人食用生的、未煮熟的豬肉可造成感染，對孕婦及免疫功能不全者的危害嚴重，常引起流產、死胎或早產，并可傳給胎兒，導致智力發育缺陷、視力障礙、腦膜炎等急慢性疾病。國外人群平均感染率在0.6％～94.0％，約有10-20億人感染，歐美地區較高，英、法、美國的感染率分別為20％～40％、80％～90％、50％～60％。我國居民感染率在0.1％-47.3％，第二次全國寄生蟲調查顯示，我國居民血清陽性率為7.97％，比第一次調查時上升45.2％，其中動物飼養員等特殊人群的陽性率高達9.83％，全國約6 000萬人感染。目前剛地弓形蟲病尚缺乏非常有效的治療藥物。