[發明專利]一種可注射性抗菌肽水凝膠及其制備方法

有效

• 申請號: 201910598840.5
• 申請日: 2019-07-04
• 公開（公告）號: CN110169950B
• 公開（公告）日: 2023-01-24
• 發明（設計）人: 曹鳳儀;梅林
• 申請（專利權）人: 中原工學院
• 主分類號: A61K9/06
• 分類號: A61K9/06;A61K38/08;A61P31/04;C07K7/06;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 鄭州優盾知識產權代理有限公司 41125
• 代理人: 冉珊敏

本發明涉及抗菌水凝膠領域，特別是指一種可注射性抗菌肽水凝膠及其制備方法。解決了現有多肽水凝膠的特異性抗菌效果差、不能實現可注射、毒副作用大的問題。所述水凝膠經抗菌肽自組裝制備而得。本發明以小分子抗菌肽為原料，抗菌肽能夠破壞微生物膜，產生抗菌效果，因此不需要添加抗菌藥物；以自組裝機制制備水凝膠，不需要添加交聯劑，且自組裝能夠在幾分鐘內完成。制備的水凝膠強度適中，且展現出剪切變稀效應，具有可注射性，能夠適用于深層組織。制備的水凝膠具有較好的抗菌性能。

技術領域

本發明涉及抗菌水凝膠領域，特別是指一種可注射性抗菌肽水凝膠及其制備方法。

背景技術

上世紀70年代，水凝膠抗菌敷料開始被歐美國家研制。相比于傳統敷料，水凝膠敷料含水量較高，因此傷口不會結痂，愈合更快。水凝膠敷料主要成分是有機及高分子材料，因此在體內容易降解，易于排出。目前市面上的水凝膠敷料多是通過具有抗菌性的高分子或抗菌劑與高分子結合的技術制備，其抗菌性能主要來自于高分子基體或抗菌劑。

抗菌肽是自然界中由生物有機體產生，用于抵抗細菌感染的活性分子。近年來，抗菌肽在傷口抗菌領域得到了廣泛研究，文獻表明抗菌肽具有廣譜的抗菌活性和良好的生物相容性。隨著檢測技術以及蛋白質、多肽篩選技術的發展，越來越多抗菌肽的結構信息被科學家解析。研究表明抗菌肽通常具有典型的結構特征：1)富含疏水氨基酸，如 Leu（亮氨酸）、IIe (異亮氨酸)、Val (纈氨酸)、Phe (苯丙氨酸) 和Trp (色氨酸)等；2）包含大量的陽離子氨基酸，使多肽顯正電性（+2—+9）；3）具有兩親性結構。

分子自組裝是分子利用分子間作用力（氫鍵作用、靜電作用、疏水作用、超分子作用等）自行聚集、組織成規則結構的現象。多肽是由氨基酸按照一定的連接順序，通過肽鍵結合而成，因此可以通過調節多肽中氨基酸種類和排列來調控自組裝行為。

專利CN201310517751.6，公開了一種包埋抗菌肽分子的醫用水凝膠敷料及其制備方法，采用現有技術中化學合成或者采用基因工程的方法使用生物反應器將含有人源肽基因的載體在細胞中表達出人源肽，分離純化可得；專利CN201811594955.9也公開了一種抗菌肽、抗菌肽水凝膠及其制備方法，主要應用于保持傷口局部濕潤，保護新生肉芽組織不受損傷的外用藥膜。水凝膠的應用不僅限于外用敷料，水凝膠有益的性能如果能實現可注射，則將帶來更廣大的應用前景。

發明內容

本發明提出一種可注射性抗菌肽水凝膠及其制備方法，解決了現有多肽水凝膠的特異性抗菌效果差、不能實現可注射、毒副作用大的問題。

本發明的技術方案是這樣實現的：

一種可注射性抗菌肽水凝膠，所述水凝膠經抗菌肽自組裝制備而得。

所述抗菌肽序列為Ac-RKKWFW-NH₂。

所述的可注射性抗菌肽水凝膠的制備方法步驟如下：

（1）抗菌肽的制備

以Rink amide-AM樹脂為固相載體，按順序加入氨基酸原料，以DMF為溶劑，在催化劑的作用下，利用固相合成技術，制備抗菌肽，純化后得純度≥95%的抗菌肽。

（2）水凝膠的制備

取步驟（1）制備的純度≥95%的抗菌肽，加入蒸餾水超聲溶解，制得抗菌肽水溶液，然后逐滴加入NaOH水溶液調pH，充分混合，直至形成水凝膠。

所述步驟（1）中催化劑為1-羥基苯并三氮唑、O-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸鹽和二異丙基乙胺的混合物。

所述步驟（1）中氨基酸原料為以9-芴甲氧羰基保護的L型氨基酸。

所述以9-芴甲氧羰基保護的L型氨基酸為Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH和Fmoc-Arg(Pbf)-OH。