[發明專利]一種用于修復毛囊的育發液制劑及其制備方法

有效

• 申請號: 201910598631.0
• 申請日: 2019-07-03
• 公開（公告）號: CN110302223B
• 公開（公告）日: 2021-08-20
• 發明（設計）人: 陳鎮洲;馮焯威
• 申請（專利權）人: 廣州賽瑯生物技術有限公司
• 主分類號: A61K36/24
• 分類號: A61K36/24;A61K35/28;A61K31/047;A61P17/14
• 代理公司: 北京化育知識產權代理有限公司 11833
• 代理人: 秦麗

1.一種用于修復毛囊的育發液制劑，其特征在于，所述育發液制劑由占芭花提取液、干細胞提取物溶液、防腐劑、肌醇、黃原膠、去離子水和pH調節劑制成；

所述占芭花提取液為占芭花的60％～65％的乙醇溶液的回流提取液；

所述干細胞提取物溶液為間充質干細胞破碎細胞液或者間充質干細胞培養液在13000×g下離心收集到的上清液經100000×g離心得到的外泌體沉淀的溶液；

所述pH調節劑用于將育發液制劑調節pH為6；

所述育發液制劑中占芭花提取液、干細胞提取物溶液、去離子水、肌醇、黃原膠的用量比例為：1～3ml:6-8ml:0.6-1.6ml:0.15-0.3g:0.01-0.05g；

所述育發液制劑在制備用于雄激素源性脫發的制劑中應用；

所述育發液制劑通過以下方法制備：

(1)將占芭花鮮花在18倍占芭花鮮花重量的65％乙醇中回流提取1.5h，過濾得到濾渣A和濾液A；將濾渣A在10倍占芭花鮮花重量的60％乙醇中回流提取1.5h，過濾得到濾渣B和濾液B；將濾渣B在8倍占芭花鮮花重量的60％乙醇中回流提取1.5h，過濾得到濾渣C和濾液C；將濾液A、濾液B和濾液C混合均勻后濃縮至占芭花鮮花5倍重量，得占芭花提取液；

(2)間充質干細胞體外培養后，固液分離得到間充質干細胞和間充質干細胞培養液；將間充質干細胞分散在生理鹽水中，得到細胞密度1×10⁶個/ml，經600W超聲10min細胞破碎后得到間充質干細胞破碎細胞液，將間充質干細胞破碎細胞液在300×g離心10min后收集上清液A，將上清液A在2500×g離心30min后收集上清液B，將上清液B在13000×g離心1h后收集上清液C，將上清液C在100000×g離心70min得到外泌體沉淀A；將間充質干細胞培養液在2000×g離心10min后收集上清液D，將上清液D在13000×g離心1h后收集上清液E，將上清液E在100000×g離心70min后得到外泌體沉淀B；將外泌體沉淀A和外泌體沉淀B溶解于生理鹽水中得到干細胞提取物溶液；

(3)將步驟(1)得到的占芭花提取液、步驟(2)得到的干細胞提取物溶液、防腐劑、肌醇、黃原膠、去離子水按照比例混合均勻；

(4)用pH調節劑調節pH值至育發液制劑的pH為6。

2.根據權利要求1所述的用于修復毛囊的育發液制劑，其特征在于，所述干細胞提取物溶液的制備方法包括以下步驟：

(1)間充質干細胞體外培養后，固液分離得到間充質干細胞和間充質干細胞培養液；

(2)將間充質干細胞分散在氯化鈉溶液中，經超聲細胞破碎后得到間充質干細胞破碎細胞液，將間充質干細胞破碎細胞液在300×g離心后收集上清液A，將上清液A在2500×g離心后收集上清液B，將上清液B在13000×g離心后收集上清液C，將上清液C在100000×g離心得到外泌體沉淀A；

(3)將間充質干細胞培養液在2000×g離心后收集上清液D，將上清液D在13000×g離心后收集上清液E，將上清液E在100000×g離心后得到外泌體沉淀B；

(4)將外泌體沉淀A和外泌體沉淀B溶解于氯化鈉溶液中得到干細胞提取物溶液。

3.根據權利要求2所述的用于修復毛囊的育發液制劑，其特征在于，所述干細胞提取物溶液中BCA蛋白濃度為30mg/ml，所述間充質干細胞為人臍帶間充質干細胞，步驟(2)和步驟(4)中的氯化鈉溶液為生理鹽水。

4.根據權利要求1所述的用于修復毛囊的育發液制劑，其特征在于，所述占芭花提取液的制備方法包括以下步驟：

(1)將占芭花鮮花在18倍占芭花鮮花重量的65％乙醇中回流提取1.5h，過濾得到濾渣A和濾液A；

(2)將濾渣A在10倍占芭花鮮花重量的60％乙醇中回流提取1.5h，過濾得到濾渣B和濾液B；

(3)將濾渣B在8倍占芭花鮮花重量的60％乙醇中回流提取1.5h，過濾得到濾渣C和濾液C；

(4)將濾液A、濾液B和濾液C混合均勻后濃縮至占芭花鮮花5倍重量，得占芭花提取液。