[發明專利]一種分離提取高純度兩性霉素B的方法在審
| 申請號： | 201910593800.1 | 申請日： | 2019-07-03 |
| 公開（公告）號： | CN110467645A | 公開（公告）日： | 2019-11-19 |
| 發明（設計）人： | 柳志強;張博;鄭裕國;陳燏;張雨涵;姜圣賢;黃愷 | 申請（專利權）人： | 浙江工業大學 |
| 主分類號： | C07H17/08 | 分類號： | C07H17/08;C07H1/06 |
| 代理公司： | 33246 浙江千克知識產權代理有限公司 | 代理人： | 冷紅梅<國際申請>=<國際公布>=<進入 |
| 地址： | 310000 浙*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 兩性霉素B 去除 大分子物質 高純度 提取液 熱源 超濾膜過濾 高純度產品 鹽酸水溶液 產品純度 產品顏色 分離提取 固液分離 結晶沉淀 發酵液 凈化液 菌絲體 雜蛋白 萃取罐 抽濾 烘干 甲醇 堿液 洗滌 沉淀 過濾 溶解 | ||
1.一種分離提取高純度兩性霉素B的方法，所述方法包括：
(1)將含有兩性霉素B的發酵液固液分離得到兩性霉素B菌絲體，烘干得到菌絲體；
(2)烘干后的菌絲體投入萃取罐，加入甲醇，溫度降至2～10℃，調節pH至3.0～4.0，攪拌1～2小時后固液分離，得到提取液；
(3)提取液通過截留分子量為5000～30000 Da的超濾膜，除去熱源、雜蛋白和色素等大分子量雜質后得到兩性霉素B凈化液；
(4)兩性霉素B凈化液加入結晶罐，調節pH至5.0～6.5，升溫至20～25℃，保溫1～2小時待結晶完成，固液分離，得到高純度兩性霉素B結晶粉；
(5)兩性霉素B結晶粉加入甲醇洗滌，洗滌后固液分離烘干粉碎得到兩性霉素B成品。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述含有兩性霉素B的發酵液為結節鏈霉菌經發酵獲得的發酵液。
3.如權利要求2所述的方法，其特征在與所述結節鏈霉菌為結節鏈霉菌CCTCC NO：M2017426。
4.如權利要求1所述的方法，其特征在于步驟(2)所用甲醇為菌絲體質量的6～8倍。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于步驟(2)pH值調至3.0，提取溫度為4℃，攪拌時間90分鐘。
6.如權利要求1所述的方法，其特征在于步驟(3)中超濾膜為陶瓷膜或中空纖維膜。
7.如權利要求1所述的方法，其特征在于步驟(4)調節pH為6.0，結晶溫度25℃，結晶時間為90分鐘。
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