[發明專利]組織工程耳廓形態復合支架及其制備方法

有效

• 申請號: 201910589511.4
• 申請日: 2019-07-02
• 公開（公告）號: CN110327495B
• 公開（公告）日: 2021-11-30
• 發明（設計）人: 賈立濤;周廣東;劉豫;張偉;姚琳;張沛靈;徐亞文;侯夢潔;王雅慧
• 申請（專利權）人: 上海國睿生命科技有限公司
• 主分類號: A61L27/36
• 分類號: A61L27/36;A61L27/22;A61L27/24;B33Y10/00
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 王晶

1.一種組織工程耳廓形態復合支架的制備方法，其特征在于,包括以下步驟：

(1)將軟骨組織切成小塊，液氮中預冷，用低溫冷凍研磨儀和組織破碎機粉碎成細顆粒狀，制備成軟骨粉末，并經脫細胞處理和真空冷凍干燥制成軟骨脫細胞基質粉末；

(2)用一定質量的明膠或膠原溶于去離子水中配成1-5％(w/v)濃度的明膠或膠原溶液，1-5％(w/v)濃度的明膠或膠原溶液中混入一定質量的軟骨脫細胞基質粉末，4度低溫預冷攪拌混勻，配成軟骨脫細胞基質含量占1-10％(w/v)的明膠或膠原混懸液；

(3)應用CT、MRI或激光掃描、經計算機輔助設計構建人耳形態的三維數字模型；

(4)基于三維數字模型經3D打印PCL基材制備毫米級三維人耳形態耳廓網格框架；以及基于三維數字模型制備出對應耳廓形態的實體陽模和實體陰模；

(5)將三維人耳形態耳廓網格框架固定于實體陽模和實體陰模正中間，灌注配制好的軟骨脫細胞基質的明膠或膠原混懸液，灌注后行冷凍處理，溫度為-20-0度，時間為6-12小時；冷凍后剝離實體陽模和實體陰模，獲得三維冷凍支架；

(6)三維冷凍支架經冷凍干燥后，浸入化學交聯劑中交聯，交聯完成去離子水反復沖洗、浸泡去除殘余的化學交聯劑，再經真空冷凍干燥獲得最終的三維耳形態支架。

2.根據權利要求1所述的組織工程耳廓形態復合支架的制備方法，其特征在于：所述軟骨組織包括耳軟骨、關節軟骨、肋軟骨、肩胛軟骨、半月板。

3.根據權利要求1所述的組織工程耳廓形態復合支架的制備方法，其特征在于：所述軟骨組織切成小塊在液氮中預冷時間為0.5～5min。

4.根據權利要求1所述的組織工程耳廓形態復合支架的制備方法，其特征在于：所述脫細胞處理為低滲處理、胰蛋白酶處理、去污劑處理和核酸酶處理。

5.根據權利要求1所述的組織工程耳廓形態復合支架的制備方法，其特征在于：所述明膠或膠原混懸液中加入軟骨誘導生長因子、血管抑制因子或藥物。

6.根據權利要求1所述的組織工程耳廓形態復合支架的制備方法，其特征在于：所述交聯試劑為：1-3-二甲氨基丙基-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽，或者戊二醛、或者京尼平。

7.一種組織工程耳廓形態復合支架，其特征在于：包括由權利要求1-6任一所述的組織工程耳廓形態復合支架的制備方法制得的三維耳形態支架。