[發明專利]一種測定復雜組分中維生素A的高效液相色譜分析方法

在審

• 申請號: 201910588119.8
• 申請日: 2019-07-02
• 公開（公告）號: CN112179996A
• 公開（公告）日: 2021-01-05
• 發明（設計）人: 鐘曉玲;李勇;白潔;于多;田敏卿;徐希平
• 申請（專利權）人: 深圳奧薩制藥有限公司;深圳奧薩醫藥有限公司;深圳市長卿醫學研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/74
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明提供一種高效測定復雜組分中維生素A的液相色譜分析方法，是以甲醇?水作為流動相進行等度洗脫，可避免其他組分的干擾，在6分鐘內準確靈敏地檢測出維生A的含量。該方法專屬性強、精密度高、穩定性較好、準確度高，操作簡單，試劑與耗材價廉易得。適用于含維生素A的片劑、粉末、膠囊等劑型的復雜組分中維生素A含量檢測、檢測質量控制，可有效地節約檢測成本和時間。

技術領域

本發明涉及一種高效快速測定復雜組分中維生素A含量的液相色譜分析方法。具體通過對樣品前處理和色譜條件的優化，使得實驗簡單，方便且準確快速檢測出復雜組分中維生素A的含量。

背景技術

維生素A(vitaminA)又稱視黃醇(其醛衍生物視黃醛)或抗干眼病因子，是一個具有脂環的不飽和一元醇，其在人體內發揮中重要作用。例如，不僅可以維持正常視覺功能、維護上皮組織細胞的健康和促進免疫球蛋白的合成、維持骨骼正常生長發育、促進生長與生殖，還可以抑制腫瘤生長；因此含有維生素A的保健食品為維持人體健康很有益處。維生素A結構式如下：

維生素A難溶于水，能溶于有機溶劑。現階段檢測維生素A所采用的前處理大多是經過高溫皂化后用正己烷、氫氧化鈉等試劑多次萃取、氮吹、再溶解，需要用到的試劑較多，且操作過程復雜繁瑣。因此，有必要研究一種可以將維生素A成分充分提取出來，且操作簡單的前處理方法。

由于在保健食品中多種維生素礦物質片含有多種成分，某些成分可能會對維生素A造成一定的干擾或使其降解。因此，有必要研究一種檢測維生素A專屬性強，使其與其他組分或雜質峰能很好分離的高效液相色譜分析方法。

發明內容

為克服上述問題，本發明提供一種提取率高、穩定性好、準確度高、重復性好的專屬維生素A的高效液相色譜方法，具體包括以下步驟：

一種用于測定片劑、粉劑、膠囊劑型等復雜組分中維生素A含量的高效液相色譜分析方法，供試品的提取溶劑為低濃度氨水溶液和/或有機溶劑，提取方法為水浴超聲或水浴振蕩提取；流動相A為甲醇，流動相B為水，流動相A與流動相B的混合比例為100～90：0～10，等度洗脫；紫外檢測波長設定為300～350nm。

在本發明中，用于供試品的提取溶劑是低濃度的氨水溶液，提取溶劑的濃度為0.01～0.05％，優選0.02～0.03％，更加優選0.025％。

在本發明中，用于供試品提取的有機溶劑選自乙腈、甲醇或乙醇中的一種，優選乙醇。其中，有機溶劑的濃度選自50％-100％，優選95-100％，更加優選100％。

在本發明中，提取方法水浴超聲的溫度選自25～80℃，優選30～60℃，更加優選40～50℃。

在本發明中，提取方法水浴振蕩的溫度選自25～80℃，優選30～60℃，更加優選40～50℃。

在本發明中，所述的高效液相色譜法中的流速為0.8～1.5ml/min。

在本發明中，所述的維生素A溶液的色譜柱溫度是25℃～30℃，最佳柱溫為25℃。

在一個實施方案中，進行上述色譜分析的色譜儀器及條件為：

檢測儀器：高效液相色譜儀(Thermo Fisher，U3000)，配備紫外檢測器；

色譜條件：

色譜柱：welch-C18150mm*4.6mm，5μm；流動相：純甲醇-水(100～90：0～10)；檢測波長：300～350nm；流速：0.8～1.5ml/min；柱溫：25～30，℃最佳柱溫：25℃；運行時間：6min。

本發明中，采用高效液相色譜對多種維生素礦物質片溶液中的維生素A進行定量檢測，需要對該方法進行專屬性、準確度等多方面的確認，具體為：