[發明專利]一種高效主動靶向近紅外熒光示蹤劑的合成方法

在審

• 申請號: 201910587417.5
• 申請日: 2019-06-28
• 公開（公告）號: CN111363007A
• 公開（公告）日: 2020-07-03
• 發明（設計）人: 王毅慶;賀興臣;王子陽
• 申請（專利權）人: 南京大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/04;C07K1/06;C09K11/06;A61K49/00
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1.一種主動靶向近紅外熒光分子的合成方法，其特征包括主要步驟如下：

步驟A：對ZW800近紅外小分子進行全合成，利用成環加成反應合成了單邊硫酸根的中間體，再進行親核取代的方式將單邊磺酸根的中間體再接一個磺酸根。通過Vilsmeier-Haack試劑將單邊雙磺酸根的中間體連接在一起合成氯代全水溶ICG衍生物母體。確定方法和實驗步驟

(A1)首先通過不同的反應時間和劑量，合成ZW800-Cl的母體結構，為下一步鹵代為取代反應做基礎。

(A2)在已有氯代ZW800母體的基礎上，通過親核取代的方式制備出ZW800-COOH，然后進行分離和提純。

步驟B：在ZW800-COOH的基礎上進一步鏈接iRGD合成ZW800-iRGD，進一步分離和提純。

(B1)通過一步固相法全合成ZW800-iRGD。

(B2)對全合成的全水溶性ZW800-iRGD小分子進行分離和提純。

2.基于專利要求1中所述的一種主動靶向近紅外熒光分子的制備方法，其特征在于，所述的(A1)具體步驟包括：

(A1.1)1eq 4-肼苯磺酸(1-2g，19.9-39.8mmol)，3eq 3-甲基-2-丁烷(1.5-3ml，60-120mmol)冰醋酸(40-60ml)混合加熱到90-120℃在氮氣氣氛下反應15-20h。

(A1.2)在乙酸乙酯中沉淀后，以粉紅色固體的形式過濾和收集粗產物，所得產物溶解在甲醇(40mL-60mL)中。

(A1.3)在室溫條件下，溶解液滴加入1eq的氫氧化鉀(1.12-2.24g，19.9-39.8mmol)和異丙醇(30-40ml)的溶液中，用濾紙過濾得到粗品。

(A1.4)將粗品用異丙醇洗滌三次至澄清，沒有進一步純化，得到棕色固體。(97％)

(A1.5)將1eq的2(1-2g，3.6-7.2mmol)和1.5eq的(3-溴丙基)三甲基溴銨(2-3g，7.68-11.52mmol)在氮氣氣氛下加入甲苯溶液中加熱80-110℃，30-48h。

(A1.6)將混合料冷卻至室溫，溶劑析出。在粗混合物中加入甲醇(10-20ml)攪拌20-40min，粗混合物過濾，收集，溶解在1∶2(v/v)甲醇(10-20ml)和水(20-40ml)混合溶劑中。

(A1.7)然后用滴液漏斗將混合溶液慢慢加入乙腈(120-180ml)中。沉淀物被過濾并收集為粉紅色固體。(40％)

(A1.8)將2eq的3(1-2g，1.86-3.72mmol)、1eq的Vilsmeier-Haack試劑(0.33-0.67g，0.93-1.86mmol)和3eq的無水乙酸鈉(0.22g-0.45g，2.79mmol-5.58mmol)在10mL-30mL的無水乙醇中，在氮氣氣氛下回流加熱4h-8h。

(A1.9)反應混合物冷卻至室溫，然后過濾，用過量的乙醇和甲醇洗滌，收集為棕綠色固體4。(90％)

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3.基于專利要求1中所述的一種主動靶向近紅外熒光分子的制備方法，其特征在于，所述的(A2)具體步驟包括：

(A2.1)1eq 3-(4-羥基苯基)丙酸(1-2g，6.0-12.0mmol)溶解于10-30mL的2eq氫氧化鈉(0.48-0.96g，12-24mmol)水溶液中，在室溫下反應24-48h，旋轉蒸發得到白色固體5。(95％)

(A2.2)將2eq的5(1-1.5g，4.7-7.05mmol)與1eq的4(1.9-2.88g，2.35-3.525mmol)混合加入DMSO和水(40mL、1∶1 v/v)溶液中回流加熱6h，在乙酸乙酯和乙醇(400ml、1∶1 v/v)混合沉出。沉淀物經過過濾，用乙醇和丙酮洗滌，以深綠色固體的形式收集(10.4g，80％)物即為6。

(A2.3)使用0.1％甲酸水和10％甲醇作為流動相，在制備液相色譜中分離提純。

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