[發明專利]抗性水稻品種在特定稻區栽種抗稻瘟病鑒定方法

在審

• 申請號: 201910585583.1
• 申請日: 2019-07-01
• 公開（公告）號: CN110257473A
• 公開（公告）日: 2019-09-20
• 發明（設計）人: 楊小林;張舒;張佑宏;呂亮;常向前;王佐乾;袁斌;張瑞洋
• 申請（專利權）人: 湖北省農業科學院植保土肥研究所
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18;C12Q1/6895
• 代理公司: 成都方圓聿聯專利代理事務所(普通合伙) 51241
• 代理人: 胡文莉

1.抗性水稻品種在特定稻區栽種抗稻瘟病鑒定方法，其特征在于：包括以下步驟，依托分子生物學和植物病理學研究手段，首先獲知水稻品種推廣應用稻區的稻瘟病菌種群的無毒基因型結構，其次獲知推廣應用的水稻品種的主要抗性基因型，然后對兩項結果進行比對分析，以及利用稻區菌群對水稻品種進行綜合接種，最終高效鑒定出水稻抗性品種是否在擬推廣應用的稻區表現抗性。

2.根據權利要求1所述的抗性水稻品種在特定稻區栽種抗稻瘟病鑒定方法，其特征在于：具體包括以下步驟：

(1)稻瘟病菌無毒基因型分析

(1.1)獲得稻瘟病菌單孢菌株

基于組織分離法，保濕培養在水稻品種擬推廣應用稻區采集的穗頸瘟標本，通過孢子培養、飄落、鏡檢、標記、定位、挑取、培養，獲得稻瘟病菌單孢菌株，保存備用；

(1.2)獲得稻瘟病菌單孢菌株基因組DNA

利用CTAB法提取稻瘟病菌單孢菌株的基因組DNA；

(1.3)獲知稻區稻瘟病菌群的無毒基因結構

利用已構建的稻瘟病菌無毒基因特異性引物，分別PCR擴增稻瘟病菌單孢菌株DNA，通過條帶分析，獲知單孢菌株的無毒基因型，對此進行數據分析獲知菌群的無毒基因結構；

(2)水稻品種抗性基因分析

(2.1)獲得抗性品種基因組DNA

利用CTAB法提取稻瘟病菌單孢菌株的基因組DNA；

(2.2)獲知水稻品種抗性基因型

利用已構建的水稻品種抗性基因特異性引物，分別PCR擴增水稻品種DNA，通過條帶分析，獲知水稻品種具有的抗性基因型；

(3)抗性基因型與無毒基因型的比對分析

比較水稻品種的抗性基因型與稻瘟病菌群的無毒基因型，如果抗性基因型與無毒基因型對應存在，表示抗性基因型與無毒基因型契合，該水稻品種在稻區大田生產中具備抗性；如果抗性基因與無毒基因不對應存在，表示抗性基因型與主要無毒基因型不契合；

(4)水稻品種稻瘟病抗性室內接種鑒定分析

于室內對抗性基因與無毒基因不對應存在的水稻品種進行噴霧接種稻瘟病菌群的混合分生孢子液，7d后獲得抗性結果；

如果稻瘟病抗性鑒定結果為抗性，表明檢測出的抗性基因型與無毒基因型雖然不對應存在，但是表明水稻品種具有未知的抗性基因，稻瘟病菌群具有未知的無毒基因型，且二者對應存在，在大田生產中該水稻品種對稻瘟病具有抗性；

如果稻瘟病抗性鑒定結果為感病，表明該水稻品種中的抗性基因與稻瘟病菌群的無毒基因型不存在契合，在大田生產中該水稻品種對稻瘟病不具有抗性。