[發(fā)明專利]一種基于熒光光度法測定亞硫酸鹽的方法及應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910584057.3
• 申請日: 2019-06-28
• 公開（公告）號: CN110261360B
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發(fā)明（設計）人: 鄧湘舟;榮銘聰;陳冬杰
• 申請（專利權）人: 廣州大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N1/34;G01N1/38
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 顏希文;宋靜娜

本發(fā)明提供了一種基于熒光光度法測定亞硫酸鹽的方法及應用，所述方法包括以下步驟：(1)將定量的待測樣品分散在定量的緩沖溶液或純水中，提取待測樣品中可能含有的亞硫酸鹽，收集清液，取定量的清液與吡咯紅Y和pH為6.0?8.5緩沖溶液混合均勻，得到待測溶液A；(2)制備試劑空白溶液B；(3)在激發(fā)波長500?580nm和發(fā)射波長540?650nm下，以相同的條件分別測試待測溶液A、空白溶液B的熒光強度值，得到待測溶液A和空白溶液B的熒光強度值的差值；(4)用外標法定量。本發(fā)明的方法為一種新的亞硫酸鹽的檢測方法，可以用于食品中亞硫酸鹽的檢測，本發(fā)明方法靈敏度高、選擇性好、簡便快速，分析時間短。本發(fā)明的一種用于測定亞硫酸鹽的試劑盒，使用簡便、精確。

技術領域

本發(fā)明屬于分析檢測技術領域，具體涉及一種基于熒光光度法測定亞硫酸鹽的方法及應用。

背景技術

現(xiàn)有測量亞硫酸鹽的標準方法有以下幾種：

比色法：如鹽酸副玫瑰苯胺比色法，靈敏度和重現(xiàn)性高，是GB/T5009.34-2003中規(guī)定的仲裁方法。此法的不足是需要4h以上的分析時間，所形成絡合物易與試樣中的干擾物質(zhì)反應，影響測定結果；操作過程中使用的四氯汞鈉吸收液具有毒性，易污染環(huán)境且對操作者健康造成危害。

蒸餾-碘量法，是GB/T5009.34-2003中第二種方法，通過在密閉容器中蒸餾酸化后的樣品來得到其中含有的SO₂，再使用乙酸鉛溶液接收，最后經(jīng)濃鹽酸酸化后用碘液標定，該法缺點是操作耗時多。

蒸餾-堿滴定法，該法目前被許多國外機構所使用，用過量氫氧化鈉接受酸化過且經(jīng)氮氣流蒸餾出的樣品，再將接收液經(jīng)酸化、氧化得到硫酸，用氫氧化鈉標液標定，該法有較為廣泛的適用范圍，易于判定其終點，但是對設備、操作的要求較高。

食品生產(chǎn)加工行業(yè)中對亞硫酸鹽的使用由來已久，食品中亞硫酸鹽的危害性主要表現(xiàn)幾個方面如：

亞硫酸鹽類食品添加劑過量添加，食品中的營養(yǎng)成分會被大量破壞，導致食品本身營養(yǎng)價值降低；

人類攝入過量亞硫酸鹽會出現(xiàn)如惡心、頭痛、氣喘、暈眩等不良反應，其中以哮喘病人反應尤甚。因此，檢測并控制食品中亞硫酸鹽的含量就顯得重要了。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術存在的不足之處而提供一種基于熒光光度法測定亞硫酸鹽的方法及應用。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術方案為：一種基于熒光光度法測定亞硫酸鹽的方法，所述方法包括以下步驟：

(1)將定量的待測樣品分散在定量的緩沖溶液或純水中提取待測樣品中可能含有的亞硫酸鹽，收集清液，取定量的清液與吡咯紅Y和緩沖溶液混合均勻，得到待測溶液A，所述緩沖溶液的pH為6.0-8.5；

(2)制備與所述待測溶液A對應的試劑空白溶液B；

(3)在激發(fā)波長500-580nm和發(fā)射波長540-650nm下，以相同的條件分別測試待測溶液A、空白溶液B的熒光強度值，得到待測溶液A和空白溶液B的熒光強度值的差值；

(4)用外標法根據(jù)熒光強度值的差值與亞硫酸鹽量的關系計算待測樣品中亞硫酸鹽的含量。

發(fā)明人通過研究發(fā)現(xiàn)在pH為6.0-8.5的緩沖溶液中吡咯紅Y與亞硫酸根能夠發(fā)生加成反應，導致吡咯紅Y熒光強度猝滅，并且發(fā)現(xiàn)緩沖溶液、吡咯紅Y與亞硫酸根組成的反應體系在反應后，反應體系的熒光強度的變化與亞硫酸根的含量呈線性關系，因此，以反應體系的熒光強度與空白試劑的熒光強度的差值作為響應值，可以利用反應體系的熒光強度的差值與亞硫酸根的含量的關系，測定樣品中亞硫酸鹽的含量，上述方法操作簡易，快速、靈敏度高。

優(yōu)選地，所述緩沖溶液的pH為6.0或者7.0-8.5。