[發明專利]利用荊半夏組培叢生苗的帶葉葉柄一步成苗的組培方法

在審

• 申請號: 201910583950.4
• 申請日: 2019-07-01
• 公開（公告）號: CN110278870A
• 公開（公告）日: 2019-09-27
• 發明（設計）人: 張建;趙振軍;曹運梅;熊玉婷;向云;向蘭蘭
• 申請（專利權）人: 長江大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 武漢智嘉聯合知識產權代理事務所(普通合伙) 42231
• 代理人: 江慧

本發明提供了一種利用荊半夏組培叢生苗的帶葉葉柄一步成苗的組培方法，包括如下步驟：(1)外植體的選擇：取半夏的種子，經消毒處理后，進行催芽形成叢生芽，選擇帶葉的葉柄作為組培用的外植體；(2)將外植體接種于一步成苗培養基中培養至苗高4～10cm即可；所述一步成苗培養基的配方為：1/2MS+IBA 0.5～1.2mg/L+NAA 0.2～0.8mg/L+TDZ 0.15～0.25mg/L+蔗糖3％+瓊脂0.7％。本發明以荊半夏組培叢生苗的帶葉葉柄作為外植體且采用特制的培養基，只需45天即可快速成苗，且保障了荊半夏苗的增殖系數和種苗質量(生根率高達95％以上；移栽存活率為100％)，實現規模化生產。

技術領域

本發明涉及苗木無性繁殖技術領域，特別涉及一種利用荊半夏組培叢生苗的帶葉葉柄一步成苗的組培方法。

背景技術

半夏屬天南星科半夏屬植物，以干燥塊莖入藥，是一種重要的中藥材，半夏塊莖含揮發油、煙堿、谷氨酸、谷甾醇等化學成分。具有降逆止吐、燥濕化痰、消痞散結等功能，多用于治療痰喘咳、惡心嘔吐、眩暈等。古之《神龍本草經》稱半夏為守田、水玉，其為多年生草本植物，多為夏秋兩季采挖，其塊莖成圓球形或扁圓形，喜沙性土壤，是一味應用廣泛、療效確切的大宗傳統中藥材。原荊州尤江陵、潛江盛產，且品質優良，俗稱“荊半夏”。因其品質優良、藥效特佳而成為半夏入藥首選。令人無奈的是，如今市場上供給的荊半夏越來越少，現時多用的半夏為“水半夏”，雖都有半夏之稱，“水半夏”在上世紀八十年代卻是屬于查處、沒收、罰款的藥材，藥性與荊半夏大不相同，藥價有天壤之別。為什么曾經的被查處的“水半夏”如今能替代半夏大行其道呢？由于半夏藥用和出口需求量大，造成野生資源日益枯竭難以滿足要求，價格持續上揚，居高不下。目前，雖有人工栽培種植荊半夏可以緩解市場壓力，但由于荊半夏生長要求陰濕環境，在災害性天氣較多的年份，會造成收獲量不足的情況，這對荊半夏的生產造成極大限制。另外，半夏連作種植易導致病毒侵染，種性退后，產量和品質下降。因此，考慮使用植物組培快繁技術進行荊半夏種苗生產并進行人工種植是解決荊半夏資源短缺的有效途徑。

荊半夏雖然人工種植成功，但擴大種植仍存在障礙：其一，繁殖方法依然局限于塊莖繁殖和珠芽繁殖，種子繁殖在實際生產中很少運用或幾乎不運用；其二，病蟲防治技術與生產不匹配，病毒病、腐爛病、疫病等對生產影響較大；其三，塊莖作種，種植成本高；其四，規模化種植面積較少。而組織培養體系的建立，對于荊半夏連作病害的控制有重要作用，脫毒苗的種植能夠大大減少其病害的發生率，提高“荊半夏”的品質以及產量，并保持其優良品質，使“荊半夏”實現大面積種植，供應市場需求，讓人民群眾生活水平得以提高。

對比文件1：申請號為“CN201410023655.0”，名稱為“一種半夏一步成苗的組織培養方法以及新的半夏培養基”公開了一種半夏一步成苗的組織培養方法，以6-BA和NAA激素組合，對株芽、塊莖、葉片和葉柄為外植體，進行一步成苗誘導，塊莖分化效率最高，每塊愈傷組織分化出12-14個小苗，成苗率95％。塊莖成苗天數35-40d，葉片和葉柄需要2-3個月。然而該案存在愈傷組織增殖速度慢、器官分化效率低等顯著不足的缺點。此外，該案在外植體選擇上存在較多限制因素，塊莖和株芽作為外植體存在消毒不徹底，污染率高的問題；且成苗時間過長，難以滿足市場的需求。

因而，如何開發一種以荊半夏組培叢生苗的帶葉葉柄作為外植體一步成苗的方法，且提高其增值效率以及分化效率，以滿足市場需求，成為亟待解決的技術問題。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術之缺陷，提供了一種利用荊半夏組培叢生苗的帶葉葉柄一步成苗的組培方法，以荊半夏組培叢生苗的帶葉葉柄作為外植體且采用特制的培養基，在該培養基下，外植體先長根系，吸收營養后，再長芽，這樣可充分吸收培養基中的營養物質，因而成苗時間短，只需45天即可快速成苗，且保障了荊半夏苗的增殖系數(高達22以上)和種苗質量(生根率高達95％以上；移栽存活率為100％)，實現規模化生產，滿足了生產上的需要。

本發明是這樣實現的：