[發明專利]細胞外泌體優化培養系統及細胞外泌體優化培養方法

在審

• 申請號: 201910582795.4
• 申請日: 2019-07-01
• 公開（公告）號: CN110423686A
• 公開（公告）日: 2019-11-08
• 發明（設計）人: 吳興;言力韜
• 申請（專利權）人: 上海市第十人民醫院
• 主分類號: C12M3/00
• 分類號: C12M3/00;C12M1/36;C12M1/00;C12N5/077
• 代理公司: 常州市科誼專利代理事務所 32225
• 代理人: 言倩玉

1.一種細胞外泌體優化培養系統，其特征在于，包括：

細胞承載組件，所述細胞承載組件包括采用PDMS軟刻蝕及不可逆封接形成的微流控芯片體，以及與所述微流控芯片體的底端面貼合相接的透明玻璃支承板；其中在微流控芯片體內預制形成的若干條陣列分布的且彼此貫通的微流通道；所述微流通道分別與預制在所述微流控芯片體內的一進液通道和出液通道連通；所述進液通道遠離微流通道的一端設為進液口，以及與所述出液通道遠離所述微流通道的一端設為出液口；

PDMS形變膜，所述PDMS形變膜與所述微流控芯片體背離所述透明玻璃支承板的頂端面相連；所述PDMS形變膜適于向背離所述透明玻璃支承板一側凸起變形；

透明蓋板，所述透明蓋板上預制有若干條陣列分布的遮光條，所述透明蓋板適于從所述透明玻璃承載板的一側使若干條遮光條中部分的遮光條覆蓋部分的微流通道以阻擋光線穿透。

2.根據權利要求1所述的細胞外泌體優化培養系統，其特征在于，若干條所述微流通道采用同心圓結構；以及

若干條所述遮光條采用同心圓結構。

3.根據權利要求1所述的細胞外泌體優化培養系統，其特征在于，若干條所述微流通道采用同心正多邊形結構；以及

若干條所述遮光條采用同心正多邊形結構。

4.根據權利要求2或3任一項所述的細胞外泌體優化培養系統，其特征在于，若干條所述遮光條適于對若干條微流通道進行間隔遮擋，即每相鄰的三條微流通道中位于中間的微流通道被遮光條遮擋。

5.根據權利要求4所述的細胞外泌體優化培養系統，其特征在于，所述PDMS形變膜圍繞所述微流通道的周向外側部分與微流控芯片體之間固連。

6.根據權利要求4所述的細胞外泌體優化培養系統，其特征在于，所述細胞外泌體優化培養系統還包括與進液口相連的進液管道，以及與所述出液口相連的出液管道。

7.根據權利要求6所述的細胞外泌體優化培養系統，其特征在于，所述進液管道上且近進液口設有一進液電磁控制閥；

所述出液管道上近出液口設有一出液電磁控制閥。

8.一種細胞外泌體優化培養方法，其特征在于，采用如權利要求1～7任一項所述的細胞外泌體優化培養系統，包括：

步驟S1：出液口關閉，打開進液口以通過進液口從進液通道通入含有細胞的凝膠；

步驟S2：待凝膠充滿微流通道且使PDMS形變膜向背離所述透明玻璃支承板一側凸起變形至一定高度H后關閉進液口；

步驟S3：從透明蓋板背離透明玻璃支承板的一側進行紫外光照射一定時間，以使若干條微流通道中接紫外光受照射的微流通道中的凝膠交聯凝固，而被透明蓋板的遮光條遮擋的微流通道中的凝膠不會交聯凝固；

步驟S4：打開出液口，使得若干條微流通道中未交聯凝固的凝膠從出液口排出；

步驟S5：關閉出液口，打開進液口，對微流通道內通入培養基，以使PDMS形變膜向背離所述透明玻璃支承板一側凸起變形至一定高度H后，關閉進液口，打開出液口，以使PDMS形變膜復位；

步驟S6：重復步驟S5通過控制進液口和出液口的開閉狀態以使PDMS形變膜在變形和復位之間切換。

9.根據權利要求8所述的細胞外泌體優化培養方法，其特征在于，步驟S5中的PDMS形變膜向背離所述透明玻璃支承板一側凸起變形的高度H范圍為0.2～0.4mm。

10.根據權利要求9所述的細胞外泌體優化培養方法，其特征在于，所述凝膠中具有光敏基團。