[發明專利]一種結核分枝桿菌抗酸染色劑及其制備方法

在審

• 申請號: 201910582583.6
• 申請日: 2019-06-29
• 公開（公告）號: CN110411806A
• 公開（公告）日: 2019-11-05
• 發明（設計）人: 何元林
• 申請（專利權）人: 江蘇諾鬲生物科技有限公司
• 主分類號: G01N1/30
• 分類號: G01N1/30;G01N21/64;G01N33/58
• 代理公司: 北京聯瑞聯豐知識產權代理事務所(普通合伙) 11411
• 代理人: 鄭自群

本發明公開了一種結核分枝桿菌抗酸染色劑，屬于醫藥領域。包括試劑A液和B液；每100mlA液包括以下含量的各組分：金胺O 0.25?0.35g、羅丹明B 0.1?0.2g、高碘酸0.5?1.5g、水40?45ml、苯酚15?20ml、乙醇20?25ml、甘油15?25ml；每100ml B液包括以下含量的各組分：水25?35ml，鹽酸0.5?1ml，乙醇65?75ml，孔雀綠0.5?1.5g。本發明A液和B液兩種試劑，能夠將傳統方法中的三步法改為兩步操作即可完成染色，且染色時間由傳統的20分鐘縮減到2分鐘左右，大大提高病菌的檢測效率，且抗酸桿菌的顏色有黃綠色變為金黃色，與背景反差更大，更易識別，且產品穩定、方便、快捷。

技術領域

本發明涉及醫藥領域，具體涉及一種快速檢測結核分枝桿菌的抗酸色液。

背景技術

肺結核是一種常見的呼吸系統傳染性疾病，傳播速度很快，若未能及時接受有效診斷及治療，很容易引發結核桿菌感染其他臟器或系統，比如骨結核、腸道結核、腎臟結核，不僅帶給患者較大痛苦，還能提高治療難度，加速病情進展，延長治療時間，增加臟器功能衰竭風險。隨著我國醫療水平的不斷深入發展，對肺結核防控力度的逐步加強，加上民眾對于醫療衛生要求的逐漸提高，綜合作用之下，很多結核患者獲得了及時有效的治療。但據醫學調查顯示，肺結核患者發病率仍然居高不下，現已成為全世界突出的公共衛生問題。

而引起肺結核的病菌即為結核分枝桿菌，結核分枝桿菌為細長略帶彎曲的桿菌，大小1～0.4μm；牛分枝桿菌則比較粗短。分枝桿菌屬的細菌細胞壁脂質含量較高，約占干重的60％，特別是有大量分枝菌酸包圍在肽聚糖層的外面，可影響染料的穿入。結核分枝桿菌在體內外經青霉素、環絲氨酸或溶菌酶誘導可影響細胞壁中肽聚糖的合成，異煙肼影響分枝菌酸的合成，巨噬細胞吞噬結核分枝桿菌后溶菌酶的作用可破壞肽聚糖，均可導致其變為L型，呈顆粒狀或絲狀。臨床常見的用于結合桿菌檢測的方法包括齊-尼氏抗酸染色法、培養法和金胺O熒光染色法等。其中金胺O熒光染色法(抗酸染色液)是通過金胺O染色及復染后，用含有紫外光源的熒光顯微鏡檢查，抗酸桿菌呈亮黃色，而其他細菌及背景中的物質呈暗黃色，這種方法可用低倍鏡檢，因此能更快速找出分枝桿菌。但該方法中使用了三種試劑，且三步法操作，操作步驟以及檢測時間比較長；單使用金胺O對抗酸桿菌進行染色，顏色偏黃綠色，與背景差異不大，不太易識別。在石蠟切片標本中，因石蠟切片在前期福爾馬林固定過程中會出現抗原封閉現象，需進行抗原修復。傳統抗原修復為EDTA修復法，操作繁瑣，無法與現有的試劑合并在一起，增加了操作步驟和檢測時間。

發明內容

為了解決上述問題，本發明提出了一種能夠減少試劑應用，且產品穩定，能夠更加方便、快捷的提高結核分枝桿菌的檢測效率的抗酸染色液。

為了實現上述目的，本發明是通過以下技術方案來實現的：

一種結核分枝桿菌抗酸染色劑，包括試劑A液和B液；每100ml所述A液包括以下含量的各組分：金胺O 0.25-0.35g、羅丹明B 0.1-0.2g、高碘酸0.5-1.5g、水40-45ml、苯酚15-20ml、乙醇20-25ml、甘油15-25ml；

每100ml所述B液包括以下含量的各組分：水25-35ml，鹽酸0.5-1ml，乙醇65-75ml，孔雀綠0.5-1.5g。

優選的，每100ml所述A液包括以下含量的各組分：金胺O 0.25-0.30g、羅丹明B0.12-0.15g、高碘酸0.8-1.0g、水40-42ml、苯酚16-18ml、乙醇23-25ml、甘油18-20ml。

優選的，每100ml所述A液包括以下含量的各組分：金胺O 0.28g、羅丹明B 0.14g、高碘酸1.0g、水40.5ml、苯酚17ml、乙醇23.5ml、甘油19ml。

優選的，每100ml所述B液包括以下含量的各組分：水28-30ml，鹽酸0.8-1ml，乙醇68-70ml，孔雀綠0.8-1.2g。