[發(fā)明專利]一組血清蛋白在制備檢測人塵肺病早期篩查試劑中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910581058.2
• 申請(qǐng)日: 2019-06-29
• 公開（公告）號(hào): CN110244059B
• 公開（公告）日: 2020-10-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱瑩;張明;袁聚祥;徐洪;姚婧昕;段雨霞;王永斌;楊方
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華北理工大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68
• 代理公司: 北京東方盛凡知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11562
• 代理人: 宋平

1.一組血清蛋白在制備檢測人塵肺病早期篩查試劑中的應(yīng)用，包括一組血清蛋白和由該一組血清蛋白標(biāo)志物組制備的檢測試劑盒，其特征在于，所述一組血清蛋白包括CHIA蛋白、PTPN2蛋白、Factor-B蛋白和VRK1蛋白，所述檢測試劑盒由能檢測CHIA蛋白、PTPN2蛋白、Factor-B蛋白和VRK1蛋白中任意一種血清差異蛋白的多克隆抗體、磷酸鹽緩沖液和ELISA96孔板組成；

所述檢測試劑盒的使用方法，包括以下步驟：

步驟一：采集一組新鮮的血清樣本，并將采集到的血清樣本保存在-80℃的冰箱中；

步驟二：將采集的血清樣本按照血清原液、5倍稀釋血清液和10倍稀釋血清液分為三個(gè)試管；

步驟三：將四種能檢測CHIA蛋白、PTPN2蛋白、Factor-B蛋白和VRK1蛋白中任意一種血清差異蛋白的多克隆抗體各滴加1μL至ELISA96孔板中進(jìn)行包被；

步驟四：按照ELISA方法，將步驟二中三個(gè)試管內(nèi)的血清樣本加入ELISA96孔板，并通過顯色計(jì)算OD值，按照OD值＝|(樣本OD-空白對(duì)照OD)/陰性對(duì)照OD|＞2.1為陽性的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行塵肺病篩查，其中，CHIA蛋白含量標(biāo)準(zhǔn)臨界值為467pg/mL、PTPN2蛋白含量標(biāo)準(zhǔn)臨界值為1835pg/mL、Factor-B蛋白含量標(biāo)準(zhǔn)臨界值為853pg/mL、VRK1蛋白含量標(biāo)準(zhǔn)臨界值為284pg/mL；

步驟五：當(dāng)檢測的血清樣本中任意一個(gè)抗體呈陽性，塵肺病篩查判定為該病例為塵肺病疑似患者；

步驟六：當(dāng)檢測的血清樣本中四個(gè)抗體均呈陽性，塵肺病篩查判定該病例為極高危塵肺病患者。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一組血清蛋白在制備檢測人塵肺病早期篩查試劑中的應(yīng)用，其特征在于：所述CHIA蛋白的蛋白序列號(hào)為Q9BZP6，所述PTPN2蛋白的蛋白序列號(hào)為P17706，所述Factor-B蛋白的蛋白序列號(hào)為P00751，所述VRK1蛋白的蛋白序列號(hào)為Q99986。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一組血清蛋白在制備檢測人塵肺病早期篩查試劑中的應(yīng)用，其特征在于：所述步驟一中采集一組新鮮的CHIA蛋白、PTPN2蛋白、Factor-B蛋白和VRK1蛋白的來源還可以為來自于血漿樣本。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一組血清蛋白在制備檢測人塵肺病早期篩查試劑中的應(yīng)用，其特征在于：所述步驟一中一組新鮮的血清樣本采集步驟為：

S1：按照臨床采血方法抽取患者的血液5mL于離心管中，在4℃環(huán)境下靜置3h；

S2：將離心管在4℃環(huán)境下，采用2000rpm～3000rpm的離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心分離10min；

S3：用移液器吸取上層淡黃色的血清，得到血清樣本。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一組血清蛋白在制備檢測人塵肺病早期篩查試劑中的應(yīng)用，其特征在于：所述步驟五中塵肺病篩查判定為該病例為塵肺病疑似患者后，還需要定期再做檢測復(fù)查。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一組血清蛋白在制備檢測人塵肺病早期篩查試劑中的應(yīng)用，其特征在于：所述步驟六中塵肺病篩查判定該病例為極高危塵肺病患者后，該病例患者需要立即進(jìn)行脫塵治療，并進(jìn)行進(jìn)一步檢查。