[發明專利]一種同時測定虎掌南星中7種有機酸的HPLC方法

有效

• 申請號: 201910577384.6
• 申請日: 2019-06-28
• 公開（公告）號: CN110243969B
• 公開（公告）日: 2021-09-03
• 發明（設計）人: 李敏;敬勇;賴月月;陳華林;劉佳靈;李巧
• 申請（專利權）人: 成都中醫藥大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222
• 代理人: 李高峽;張娟

本發明提供了一種同時測定虎掌南星中4種有機酸的HPLC方法(草酸、L?蘋果酸、枸櫞酸和富馬酸)的HPLC方法，該方法還能同時檢測另外3種有機酸(琥珀酸、順式烏頭酸和反式烏頭酸)。本發明的HPLC檢測方法，能同時測定虎掌南星藥材中的多種有機酸成分，且操作簡單，靈敏度高，專屬性好，準確度高，可以有效地評價虎掌南星藥材的質量。

技術領域

本發明屬于中藥分析技術領域，具體涉及一種同時測定虎掌南星中7種有機酸的HPLC方法。

背景技術

虎掌南星來源于天南星科半夏屬植物虎掌(掌葉半夏)Pinellia pedatisectaSchott的干燥塊莖，具有燥濕化痰，祛風定驚，消腫散結的功效。治中風痰壅，口眼歪斜，半身不遂，癲癇，驚風，破傷風，風痰眩暈，喉痹，瘰疬，癰腫，跌撲折傷，蛇蟲咬傷。

關于虎掌南星藥材及其同屬植物半夏的含量測定已有許多報道，但只是測定其中的2～4種成分。眾所周知中藥的多效性源于其復雜的化學成分，僅靠一兩個成分的含量測定不能反映其他成分的情況，難以真正控制其質量。選擇更多的成分作為指標進行質量控制研究，更能合理、全面評價虎掌南星藥材質量。

發明內容

為解決上述問題，本發明提供了一種同時測定虎掌南星藥材中4種有機酸的HPLC方法。

本發明的虎掌南星中有機酸的HPLC測定方法，包括如下操作步驟：

1)對照品溶液的制備：取對照品，溶解，即得對照品溶液；

2)供試品溶液的制備：取虎掌南星藥材，提取，即得供試品溶液；

3)分別吸取對照品和供試品溶液注入高效液相色譜儀，色譜條件如下：

色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；檢測波長：190～260nm；流動相：乙腈為流動相A，0.1％磷酸溶液-甲醇-乙腈為流動相B；梯度洗脫程序如下：

其中，步驟1)所述對照品包括：草酸、L-蘋果酸、枸櫞酸和富馬酸對照品。

更進一步地，該方法還能同時檢測另外3種有機酸：琥珀酸、順式烏頭酸和反式烏頭酸。

其中，步驟1)所述溶解是加入水溶解。

其中，步驟2)所述提取是指：加入水，超聲提取，離心，取上清液，加入乙酸乙酯萃取。

其中，步驟2)所述提取方法如下：

取虎掌南星藥材，加入藥材25～200w/v(g/mL)倍的水，超聲提取30～90min，放冷，用水補足減失的質量，濾過或離心(10000r/min，離心5min，取上層清液再離心一次)，精密量取清液5mL，加磷酸(或鹽酸)后，搖勻，用乙酸乙酯萃取5次，合并乙酸乙酯，減壓濃縮至干，殘渣加0.1％磷酸溶液使溶解，并定容，濾過，取續濾液，即得供試品溶液。

進一步地，所述提取方法如下：

取虎掌南星藥材粉末(過四號篩)0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入藥材100w/v(g/mL)倍的水，稱定質量，超聲提取60min，放冷，用水補足減失的質量，濾過或離心(10000r/min，離心5min，取上層清液再離心一次)，精密量取上清液5mL，加磷酸(或鹽酸)0.5mL，搖勻，用乙酸乙酯萃取5次，每次25mL，合并乙酸乙酯，減壓濃縮至干，殘渣加0.1％磷酸溶液使溶解，并定容至5mL，搖勻，濾過，取續濾液，過0.45μm微孔濾膜，即得供試品溶液。

其中，所用色譜柱為Intersil ODS-3 C₁₈色譜柱；規格為4.6mm×250mm，5μm。

其中，所述檢測波長為210nm。