[發明專利]一種交聯透明質酸鈉凝膠的制備方法

有效

• 申請號: 201910572212.X
• 申請日: 2019-06-28
• 公開（公告）號: CN110204746B
• 公開（公告）日: 2022-03-08
• 發明（設計）人: 張治國;索艷格;黃偉;孫偉慶
• 申請（專利權）人: 浙江科技學院;杭州協合醫療用品有限公司
• 主分類號: C08J3/24
• 分類號: C08J3/24;C08J3/075;C08L5/08;C08K5/41;C08K5/1515;C08K3/30;A61L27/20;A61L27/52
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司 33212
• 代理人: 李亦慈;唐銀益

本發明公開了一種交聯透明質酸鈉凝膠的制備方法，包括透明質酸的堿性水溶液制備：配制濃度為10?30％g/ml的透明質酸鈉堿液，交聯反應：交聯反應所采用的交聯劑為二乙烯基砜或1,4?丁二醇二縮水甘油醚，交聯反應在透明質酸的堿性水溶液中進行，交聯反應的反應溫度為20?40℃，交聯反應的時間為4～8h等步驟，本發明的方法具有原料易得，反應條件溫和，交聯效率高，工藝和后處理簡單，易操作的優點。通過交聯反應，得到交聯透明質酸鈉具有三維網絡結構，具有較好的機械性能及力學性能，可作為較好的藥物載體及組織工程支架材料。

技術領域

本發明屬高分子材料技術領域，具體涉及一種交聯透明質酸鈉凝膠的制備方法。

背景技術

透明質酸(Hyaluronic acid，HA)，又名玻尿酸，是粘多糖中最具代表性的一種，廣泛分布于人體各部位，以其獨特的分子結構和理化性質在機體內顯示出多種重要的生理功能，如潤滑關節、調節血管壁的通透性，調節蛋白質，水電解質擴散及運轉，促進傷口愈合。透明質酸最早是從牛眼玻璃體中首次分離出的，它廣泛存在于人體結締組織的細胞外基質中，由D-葡萄糖醛酸與N-乙酰葡糖胺通過β1-3鍵及β1-4鍵交替組成雙糖單位，再由雙糖單位重復組成的線性多糖。透明質酸沒有種屬和組織特異性，具有良好的組織相容性，機體很少對其產生免疫反應。透明質酸具有高度親水性，這種理化性質使透明質酸即使在很低的濃度下，依然保持凝膠狀，透明質酸吸水后體積增大，向周圍產生膨脹壓力使其可以支撐周圍組織。然而天然透明質酸在組織中的半衰期僅為1～2天，會被透明質酸酶或氧自由基在肝臟中分解為CO₂和H₂O。

為了延長透明質酸在體內的停留時間，通常通過改性或交聯的方法提高其機械強度和降低其降解速率，目前，常用交聯劑為二乙烯基砜，1,4-丁二醇二縮水甘油醚，只能通過交聯程度調節其降解時間，因此，在臨床上尤其是作為降解可控的組織工程支架材料，實現起來較困難。

交聯透明質酸鈉是交聯透明質酸鈉上糖環活性基團與交聯劑在一定條件下反應，交聯形成的凝膠大分子，也稱為交聯玻璃酸鈉凝膠，是交聯HA衍生物的一種。交聯反應是大分子包含空間多位點的復雜反應。交聯透明質酸鈉的理化性質與交聯度的大小密切相關。目前制備出的交聯透明質酸顆粒粒徑分布均勻，具有較高的水溶脹比，但顆粒大多分布在納米級，適合用于改善皮膚組織吸收能力，不適用于介入栓塞治療；且在水相中初步交聯反應時交聯劑未能均勻的分散于透明質酸分子間，存在整體交聯程度不均一的問題。綜上，目前交聯透明質酸鈉凝膠仍然缺乏更有效的交聯手段以實現作為組織工程支架材料的目的。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種交聯透明質酸鈉凝膠的制備方法，為此，本發明采用了以下技術方案：

本發明公開了一種交聯透明質酸鈉凝膠的制備方法，它包括以下制備步驟:

1)、透明質酸的堿性水溶液制備：配制濃度為10-30％g/ml的透明質酸鈉堿液；

2)、交聯反應：交聯反應所采用的交聯劑為二乙烯基砜或1,4-丁二醇二縮水甘油醚，交聯反應在透明質酸的堿性水溶液中進行，交聯反應的反應溫度為20-40℃，交聯反應的時間為4～8h；

3)、冷凍干燥：交聯反應結束后，透析，冷凍干燥，得到交聯透明質酸鈉凝膠干膠，透析磷酸鹽緩沖液優選磷酸鹽濃度為0.1-0.2M，pH為7.0-7.4；

4)、二次反應：將上述干燥后的凝膠干膠放入到一定量的配好的質量分數為1-5％的過硫酸銨或者過硫酸鉀水溶液中，充分浸泡溶脹后，升溫到50-70℃并維持反應2-6h；

5)、凝膠制備：反應結束后，以大量含水乙醇浸泡洗滌，最后以pH＝7.4的磷酸鹽緩沖溶液浸泡溶脹，即得一種交聯透明質酸鈉凝膠。

作為進一步地改進，本發明所述的透明質酸與交聯劑的質量比為5-20:1。