[發(fā)明專利]一種利用酶處理海藻多糖制備生物乙醇的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910571503.7
• 申請日: 2019-06-28
• 公開（公告）號: CN110257439B
• 公開（公告）日: 2021-08-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 肖安風;焦超;楊秋明;曾潔;張永輝;翁惠芬;肖瓊
• 申請（專利權(quán)）人: 集美大學(xué)
• 主分類號: C12P7/06
• 分類號: C12P7/06;C12P19/14;C12P19/02
• 代理公司: 廈門市精誠新創(chuàng)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 35218
• 代理人: 秦華

1.一種利用酶處理海藻多糖制備生物乙醇的方法，其特征在于，包括如下步驟，

原料預(yù)處理：將除去雜質(zhì)的海藻原料在陽光下暴曬2-4d，再使用烘箱烘干殘余水分，粉碎過篩；

高壓蒸煮：將上述所得按質(zhì)量比為1：（30-40）加水后；進行高溫高壓蒸煮；然后3-5層絹布過濾，收集濾液； 所述高溫高壓蒸煮為高壓滅菌鍋中110-120℃下蒸煮20-40min；

硫酸酯酶酶解：調(diào)上述濾液的pH至6.5-8.5，加入硫酸酯酶，反應(yīng)6-12h得到濾渣；所述硫酸酯酶的加入量為5-15U/ml；其中硫酸酯酶為重組酶Sulf1694；所述重組酶Sulf1694的氨基酸序列為SEQ ID NO:2所示；

多功能海藻多糖酶酶解：將上述得到的濾渣按1：（20-40）質(zhì)量比加水；調(diào)其pH至6.5-8.5，同時加入多功能海藻多糖降解酶和果膠酶，反應(yīng)6h-12h，即可得到發(fā)酵性還原糖糖化液；其中多功能海藻多糖降解酶為重組酶AlgL1281；所述重組酶AlgL1281的氨基酸序列為SEQ ID NO:6所示；

離心收集：將發(fā)酵性還原糖糖化液進行離心后；收集上清液，并進行高溫滅菌得到高溫滅菌后的糖化液；

酵母發(fā)酵：將活化后的酵母按照7%-20%的體積比接入上述高溫滅菌后的糖化液里，在28-45℃下厭氧發(fā)酵2-4天；

乙醇的分離制備：將發(fā)酵完的發(fā)酵液經(jīng)5-10層紗布過濾；過濾后的上清液采用減壓蒸餾的方法蒸出乙醇，將蒸餾出的乙醇再進行濃縮，即可得體積分數(shù)90％以上的乙醇。

2.如權(quán)利要求1所述利用酶處理海藻多糖制備生物乙醇的方法，其特征在于，所述海藻原料為紅藻和褐藻。

3.如權(quán)利要求1所述利用酶處理海藻多糖制備生物乙醇的方法，其特征在于，所述海藻原料為石花菜，龍須菜，海帶，鹿角菜或馬尾藻中的至少一種。

4.如權(quán)利要求1所述利用酶處理海藻多糖制備生物乙醇的方法，其特征在于，所述高壓蒸煮中，將上述所得按質(zhì)量比為1：35加水后；于110-120℃下進行高溫高壓蒸煮20-40min，然后3-5層絹布過濾，收集濾液。

5.如權(quán)利要求4所述利用酶處理海藻多糖制備生物乙醇的方法，其特征在于，于115℃下進行高溫高壓蒸煮30min。

6.如權(quán)利要求1所述利用酶處理海藻多糖制備生物乙醇的方法，其特征在于，所述硫酸酯酶酶解中，硫酸酯酶加入量為10U/ml。

7.如權(quán)利要求1所述利用酶處理海藻多糖制備生物乙醇的方法，其特征在于，所述多功能海藻多糖酶酶解中，將上述得到的濾渣按1:30質(zhì)量比加水；所述的多功能海藻多糖降解酶的加入量為3-8U/ml；所述果膠酶的加入量為0.1-0.3%，果膠酶的酶活為4000U/ml。

8.如權(quán)利要求7所述利用酶處理海藻多糖制備生物乙醇的方法，其特征在于，所述的多功能海藻多糖降解酶的加入量為5U/ml；所述果膠酶的加入量為0.1%。

9.如權(quán)利要求1所述利用酶處理海藻多糖制備生物乙醇的方法，其特征在于，所述離心收集中，所述離心的條件為4000-6000r/min離心15-20min；所述高溫滅菌的條件為115℃下高溫滅菌0.5h-2h。

10.如權(quán)利要求1所述利用酶處理海藻多糖制備生物乙醇的方法，其特征在于，所述乙醇的分離制備中，將發(fā)酵完的發(fā)酵液經(jīng)八層紗布過濾。