[發(fā)明專利]一種同時測定金絲桃苷和金絲桃素含量的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910570100.0
• 申請日: 2019-06-27
• 公開（公告）號: CN110346467A
• 公開（公告）日: 2019-10-18
• 發(fā)明（設計）人: 馬君義;李茂星;任曉霞;呂孝飛;田秀玉;陳麗萍;宋娜
• 申請（專利權）人: 西北師范大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34
• 代理公司: 甘肅省知識產(chǎn)權事務中心 62100
• 代理人: 武戰(zhàn)翠

1.一種同時測定金絲桃苷和金絲桃素含量的方法，其特征在于：包括以下步驟：

步驟（1）金絲桃苷和金絲桃素標準曲線的制備：取金絲桃苷和金絲桃素對照品，加甲醇配制成系列濃度的對照品溶液；分別注入高效液相色譜儀進行梯度洗脫，測定色譜峰面積，繪制金絲桃苷和金絲桃素的標準曲線；

步驟（2）供試品溶液的制備：取待測樣品，加乙醇提取，過濾得供試品溶液；

步驟（3）供試品溶液中金絲桃苷和金絲桃素含量的測定：取供試品溶液，注入高效液相色譜儀，進行梯度洗脫，測定色譜峰面積，根據(jù)步驟（1）所得的標準曲線，計算待測樣品中金絲桃苷和金絲桃素的含量；

其中，上述步驟（1）和步驟（3）中高效液相色譜條件為：

色譜柱：C18色譜柱；

檢測波長：360 nm，590 nm；

柱溫：18℃-25℃；流速：0.8-1.2 mL·min^-1；進樣量：8-12 μL；

流動相：乙腈-0.05%磷酸水溶液-0.30 mol·L^-1乙酸銨緩沖液；

梯度洗脫為：

第一梯度：0-11 min，乙腈25%-0.05%磷酸水溶液75%；

第二梯度：11-18 min，乙腈90%-0.30 mol·L^-1乙酸銨緩沖液10%；

第三梯度：18-22 min，乙腈25%-0.05%磷酸水溶液75%。

2.如權利要求1所述的一種同時測定金絲桃苷和金絲桃素含量的方法，其特征在于：所述0.05%磷酸水溶液的pH為2.30-2.32，所述乙酸銨緩沖液的pH為4.10-4.34。

3.如權利要求1所述的一種同時測定金絲桃苷和金絲桃素含量的方法，其特征在于：所述0.05%磷酸水溶液的pH為2.31，所述乙酸銨緩沖液的pH為4.22。

4.如權利要求1-3任一項所述的一種同時測定金絲桃苷和金絲桃素含量的方法，其特征在于：所述色譜柱為Hypersil GOLD^TM C18 LC色譜柱，規(guī)格為150 mm×4.6 mm，5 μm。

5.如權利要求4所述的一種同時測定金絲桃苷和金絲桃素含量的方法，其特征在于：所述流速為1.0 mL·min^-1，所述進樣量為10 μL。

6.如權利要求1、 2 、3或5所述的一種同時測定金絲桃苷和金絲桃素含量的方法，其特征在于：所述步驟（2）中乙醇的濃度為70%，所述乙醇的體積與待測樣品的質量比為25 mL：2g。

7.如權利要求6所述的一種同時測定金絲桃苷和金絲桃素含量的方法，其特征在于：所述步驟（2）中的提取方法為超聲提取或回流提取。

8.如權利要求6所述的一種同時測定金絲桃苷和金絲桃素含量的方法，其特征在于：所述提取方法為超聲提取，超聲功率為300 W，超聲頻率為40 kHz，提取時間為1 h。

9.一種如權利要求1 、7或8所述的方法在控制貫葉金絲桃藥材及相關藥品質量中的應用。