[發(fā)明專(zhuān)利]核酸組合物、流感病毒的檢測(cè)試劑盒和微流控芯片

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910564911.X
• 申請(qǐng)日: 2019-06-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110283940A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-09-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 游騰飛
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 深圳市剛竹醫(yī)療科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/70
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12M1/00;C12M1/34
• 代理公司: 廣州華進(jìn)聯(lián)合專(zhuān)利商標(biāo)代理有限公司 44224
• 代理人: 林青中

本發(fā)明涉及一種核酸組合物、流感病毒的檢測(cè)試劑盒和微流控芯片。該核酸組合物包括檢測(cè)引物對(duì)，所述檢測(cè)引物對(duì)包括如下引物對(duì)中的至少兩種：甲流引物對(duì)、乙流引物對(duì)、丙流引物對(duì)、甲型H1引物對(duì)、甲型H3引物對(duì)、甲型H5引物對(duì)、甲型H7引物對(duì)、甲型H9引物對(duì)、甲型N9引物對(duì)和高致病性甲型H7N9引物對(duì)。上述核酸組合物能夠避免各引物及探針之間的干擾，一次性同時(shí)檢測(cè)至少兩種流感病毒，且檢測(cè)靈敏度能夠達(dá)到100copies/mL。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種核酸組合物、流感病毒的檢測(cè)試劑盒和微流控芯片。

背景技術(shù)

在病毒學(xué)分類(lèi)上，流感病毒(Influenza virus)屬于正黏病毒科(Orthomyxoviridae)，流感病毒包括甲型流感病毒、乙型流感病毒、丙型流感病毒和丁型流感病毒。甲型流感病毒、乙型流感病毒、丙型流感病毒均可感染人類(lèi)。其中，甲型流感病毒的宿主范圍廣、血清型眾多、跨種傳播頻發(fā)，是一種重要的人獸共患病病原，也是引起新的流感大流行的主要病原。

流感病毒是一種基因組含有8個(gè)單鏈負(fù)義RNA節(jié)段的有包膜病毒。包膜病毒具有宿主來(lái)源的脂雙層，脂雙層含有兩種主要的負(fù)責(zé)病毒附著的表面病毒糖蛋白：血凝素(Hemagglutinin,HA)和神經(jīng)氨酸酶(Neuraminidase,NA)。

根據(jù)病毒的血凝素和神經(jīng)氨酸酶的抗原性差異，流感病毒分為不同的血清型。目前，甲型流感病毒已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了18種HA亞型和11種NA亞型。18種HA亞型在系統(tǒng)進(jìn)化上分為兩個(gè)組：組1(Group 1)包括H1、H2、H5、H6、H8、H9、H11、H12、H13、H16、H17和H18；組2(Group 2)包括H3、H4、H7、H10、H14和H15。11種NA亞型也分為兩個(gè)組：組1包括N1、N4、N5、N8；組2包括N2、N3、N6、N7和N9。

一般地，檢測(cè)流感病毒的方法包括病毒分離培養(yǎng)、免疫學(xué)檢驗(yàn)和PCR。病毒分離培養(yǎng)和免疫學(xué)的檢測(cè)周期長(zhǎng)，檢測(cè)敏感度較低，不能滿(mǎn)足實(shí)際需求。而PCR的通量低，一次只能檢測(cè)一種病原體。

發(fā)明內(nèi)容

基于此，有必要提供一種能夠同時(shí)檢測(cè)至少兩種流感病毒且檢測(cè)靈敏度高的核酸組合物。

一種核酸組合物，包括檢測(cè)引物對(duì)，所述檢測(cè)引物對(duì)包括如下引物對(duì)中的至少兩種：

序列如SEQ ID No.1及SEQ ID No.2所示的甲流引物對(duì)、序列如SEQ ID No.4及SEQID No.5所示的乙流引物對(duì)、序列如SEQ ID No.7及SEQ ID No.8所示的丙流引物對(duì)、序列如SEQ ID No.10及SEQ ID No.11所示的甲型H1引物對(duì)、序列如SEQ ID No.13及SEQ ID No.14所示的甲型H3引物對(duì)、序列如SEQ ID No.16及SEQ ID No.17所示的甲型H5引物對(duì)、序列如SEQ ID No.19及SEQ ID No.20所示的甲型H7引物對(duì)、序列如SEQ ID No.22及SEQ ID No.23所示的甲型H9引物對(duì)、序列如SEQ ID No.25及SEQ ID No.26所示的甲型N9引物對(duì)、和序列如SEQ ID No.28及SEQ ID No.29所示的高致病性甲型H7N9引物對(duì)。

上述核酸組合物包括檢測(cè)引物對(duì)，檢測(cè)引物對(duì)包括甲流引物對(duì)、乙流引物對(duì)、丙流引物對(duì)、甲型H1引物對(duì)、甲型H3引物對(duì)、甲型H5引物對(duì)、甲型H7引物對(duì)、甲型H9引物對(duì)、甲型N9引物對(duì)和高致病性甲型H7N9引物對(duì)中的至少兩種。上述核酸組合物能夠降低各引物之間的干擾，一次性同時(shí)檢測(cè)至少兩種流感病毒，且檢測(cè)靈敏度能夠達(dá)到100copies/mL。

在其中一個(gè)實(shí)施例中，還包括與所述檢測(cè)引物對(duì)對(duì)應(yīng)的檢測(cè)探針，與所述檢測(cè)引物對(duì)對(duì)應(yīng)的檢測(cè)探針包括：