[發明專利]用于偵測及預防豬流行性下痢病毒感染的桿狀病毒及組合物

在審

• 申請號: 201910554239.6
• 申請日: 2019-06-25
• 公開（公告）號: CN110628729A
• 公開（公告）日: 2019-12-31
• 發明（設計）人: 趙裕展;徐偉婷;張惠雯;張佳瑜
• 申請（專利權）人: 中央研究院
• 主分類號: C12N7/01
• 分類號: C12N7/01;C12N15/866;A61K39/215;A61P31/14;C12N5/10;G01N33/569
• 代理公司: 11127 北京三友知識產權代理有限公司
• 代理人: 韓蕾;李輝

本揭露提供用于偵測及預防豬流行性下痢病毒感染的桿狀病毒及組合物，具體提供一種表達豬流行性下痢病毒S蛋白質、該S蛋白質的S1結構域、或其N蛋白質的桿狀病毒，其是用于偵測及/或預防豬流行性下痢病毒感染。

相關申請案

本申請案主張于2018年6月25日提申的美國專利臨時申請第62/689,427號案為優先權，其經由引用完整并入本案。

技術領域

本揭露是關于一種桿狀病毒；特別是表達用于偵測及預防豬只于豬流行性下痢病毒感染的蛋白質的桿狀病毒。

背景技術

豬流行性下痢(PED)是一種高度傳染性的豬只疾病，其特征在于仔豬的急性水 性下痢和嘔吐。PED于20世紀70年代首次在歐洲被發現，隨后成為亞洲和歐洲零 星爆發的地方性疾病。自2010年底以來，中國出現了高毒力豬流行性下痢病毒 (PEDV)并襲擊了新生仔豬。2013年，包括中國臺灣在內的北美和東亞地區爆發了 高毒力的PED，導致養豬業遭受了巨大的經濟損失。

市面上可取得的疫苗是PEDV RNA疫苗，且先前的結果顯示該疫苗僅能使仔豬 的死亡率降低3％。第二個策略是使用PEDV的死毒疫苗，而6.6log¹⁰TCID50/mL效 價的低病毒產量明顯限制了疫苗的廣泛應用。領域中為開發可控制PED流行的疫苗 已經付出了很多努力。然而，目前仍無有效的商業化疫苗可用于控制全球的PED。 有效、安全且具有成本效益的用于控制PEDV的疫苗仍為領域中所迫切需要。

發明內容

本揭露的目的之一是提供偵測及預防豬流行性下痢病毒感染的有用工具。有用的工具可以是新的組合物(在一些具體實施例中也可以稱為疫苗)，及/或其特定的活 性成分。

本揭露的另一個目的是提供可用于制備上述活性成分的工具。

為了實現上述目的，本揭露提供了一種表達豬流行性下痢病毒S蛋白質、該S 蛋白質的S1結構域、或豬流行性下痢病毒N蛋白質的桿狀病毒。

本揭露亦提供一種醫藥組合物，其包含本揭露的桿狀病毒以及醫藥上可接受的載體。

本揭露另提供一種表達卡匣，包含：啟動子；第一多核苷酸，其編碼SEQ ID NO:04；以及第二多核苷酸，其編碼豬流行性下痢病毒S蛋白質、該S蛋白質的S1結構 域、或豬流行性下痢病毒N蛋白質。

本揭露又提供一種細胞，其包含本揭露的表達卡匣。

本揭露再提供一種于活體外評估豬流行性下痢病毒感染的方法，其包含：取得一待評估的個體的樣本；使該樣本與本揭露的桿狀病毒或細胞接觸。

附圖說明

圖1顯示實驗1的表達卡匣的組成及質粒pTriEx-S、pTriEx-S1、及pTriEx-N的 構建圖。接續在GP64訊號蛋白質和6x His-標簽之后的全長S蛋白質、S1結構域、 及N蛋白質基因由TriEx啟動子驅動。pTriEx-S含有優化密碼子的全長S基因。 pTriEx-S1及pTriEx-N具有與GP64跨膜結構域(TM-B)以及用于膜錨定的GP64細 胞質結構域(CTD-B)相接的優化密碼子的編碼為S1結構域多核苷酸及N蛋白質基 因。這些構建體亦插入由SV40-pag啟動子驅動的mCherry熒光蛋白基因作為報導子。