[發明專利]一種蒽醌類化合物的檢測試劑及檢測方法

有效

• 申請號: 201910552938.7
• 申請日: 2019-06-25
• 公開（公告）號: CN110243981B
• 公開（公告）日: 2022-06-21
• 發明（設計）人: 夏伯候;林麗美;廖端芳
• 申請（專利權）人: 湖南中醫藥大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/74
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 肖云

本發明實施例提供了一種蒽醌類化合物的檢測試劑及檢測方法。該檢測試劑包括氫鍵受體以及與氫鍵受體對應的氫鍵供體，氫鍵受體包括L?薄荷醇，氫鍵供體包括乙酸。檢測方法步驟包括將待測液加熱后，向待測液中加入檢測試劑，混勻后冰浴，得到凝固層和液體層，再將液體層倒出后，向凝固層中加入解凝劑解固后通過HPLC測定蒽醌類化合物的含量。本發明實施例提供的檢測試劑及檢測方法，減少了繁瑣的離心和過濾，在保留離子優勢的基礎上，還具有成本低、環保、高效等特征，此外DESs的應用還避免了反乳化劑的使用，解決了現有技術中蒽醌類化合物通過質譜檢測成本高的問題。

技術領域

本發明屬于醌類化合物檢測技術領域，具體涉及一種蒽醌類化合物的檢測試劑及檢測方法。

背景技術

蒽醌類物質廣泛分布于蓼科、豆科、鼠李科、茜草科和百合科植物中，具有瀉下、抗菌消炎、抗癌和抗腫瘤等多種藥理作用。然而，由于大黃素、大黃酸和大黃素甲醚等蒽醌類物質能夠抑制HK-2細胞的增殖，使細胞乳酸脫氫酶漏出率增加，細胞空泡化，線粒體膜電位降低，細胞出現明顯的凋亡等，長期使用蒽醌類物質將產生可逆性肝腎毒性，尤其是腎臟毒性。長期服用含有蒽醌類物質還會破壞腸粘膜屏障，促進腫瘤壞死因子等促炎癥因子的釋放，誘導結腸上皮細胞凋亡，最終導致色素沉積而發生大腸黑變病。基于蒽醌類物質存在的上述威脅，采取簡單、有效的技術手段來檢測蒽醌類物質變得尤為重要。

目前從復雜成分中提取蒽醌類物質的方法主要分為固相萃取法和液相萃取法。固相萃取法是指當液體樣品通過柱萃取吸附時，其部分或全部待測物質被吸附，然后使用一種或幾種混合溶劑洗滌雜質，最后，使用少量的溶劑洗脫被測物質。隨著技術的發展，固相萃取法包括固相微萃取、分散微固相萃取和磁性固相萃取等。其中，固相微萃取空白值較高、靈敏度差；分散微固相萃取擴散和傳質速率有限，萃取過程的平衡時間較長；而磁性固相萃取洗脫劑選擇受限。液相萃取法又稱為兩相溶劑提取，是利用混合物中各組分在兩種互不相溶的溶劑中分配系數的不同而達到分離目的的一種方法。液相萃取法包括單滴液相微萃取、雙水相萃取、中空纖維液相微萃取、懸浮固化分散液液微萃取和分散液液微萃取(Dispersive liquid-liquid microextraction，簡稱DLLME)等。單滴液相微萃取在萃取過程中萃取效率重現性差；雙水相萃取需通過大量實驗確定滿足分配要求方能體現其優勢；分散液液微萃取(DLLME)重現性和抗干擾能力差；中空纖維液相微萃取實驗操作難度較大，對操作者要求較高；懸浮固化分散液液微萃取往往需要繁瑣的過濾或離心過程。除了固相萃取和液相萃取外，還有濁點萃取和電膜萃取等技術。

針對蒽醌類物質的分離富集和檢測，目前主要以液液萃取法并結合液相質譜分析為主，本發明發明人在實現本發明實施例發明技術方案的過程中，發現現有技術中至少存在如下問題：一是質譜的檢測成本高，不利于技術的普及使用；二是現有技術對微量的蒽醌類物質檢測效果仍不理想。

發明內容

本發明實施例之一通過提供一種蒽醌類化合物的檢測試劑，所述檢測試劑包括氫鍵受體以及與所述氫鍵受體對應的氫鍵供體，所述氫鍵受體包括L-薄荷醇，所述氫鍵供體包括乙酸，解決了現有技術中蒽醌類物質質譜檢測成本高的問題。

上述檢測試劑為低共熔溶劑(Deep eutectic solvents，簡稱DESs)，DESs在室溫下的蒸氣壓力可以忽略不計，在分離和純化過程中可回收和重用，DESs中由于氫鍵受體(Hydrogen bond acceptor，簡稱HBA))和氫鍵供體(Hydrogen bond donor，簡稱HBD)之間的氫鍵相互作用，其冰點比二者均要低，在保留離子優勢的基礎上，還具有成本低、環保、高效等特征。同時DESs的應用可以避免反乳化劑的使用，又因其冰點特性，減少了繁瑣的離心和過濾。

優選地，所述氫鍵受體和對應的氫鍵供體的摩爾比為1：(0.5～4)。

優選地，所述對應的氫鍵供體還包括乳酸、月桂酸和癸酸。

優選地，所述對應的氫鍵供體還包括1，3-丁二醇和甘油。